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1、五味中药对灵芝菌液体发酵过程的影响摘要观察中药对灵芝菌液体发酵过程中生物量和胞外多糖的影响。麻黄、莱蔗子、金银花和 连翘 4 味中药对生物量有明显促进作用。黄岑对灵芝生长有抑制作用。 关锐词中药,灵芝,发酵,多糖灵芝(Ganodermalucidum)为担子菌纲, 多孔菌科,灵芝菌属真菌,自古以来就是我国名 贵药用真菌。现代医学研究证明,灵芝中所含 的灵芝多糖和灵芝酸类物质能提高肌体免疫 力,延缓衰老,对老年慢性支气管炎有明显的疗 效。为了定向强化灵芝的药效,作者将中药添 加到灵芝液体培养基中,观察中药成分对灵芝 菌丝体生长及代谢产物胞外多糖的影响。1 材料和方法 1.1 材料 灵芝菌:研究室
2、保存的菌种。种子培基养: 葡萄糖 209/L,玉米粉 109/L,鼓皮粉 59/Lo 基础培养基:葡萄糖 409/L,蛋白陈 49/L,Mg- 5040759/L,K 姚 pO4159/L,几、10mg/LO 中药材:购自无锡山禾药业集团。无水 NaZs 氏,HZS()4 市售分析纯。 1.2 方法1 . 2.1 中药的粉碎 称取中药材,粉碎,过 40 目筛。药粉用于 灵芝液体培养。1 . 2.2 接种培养 将药粉按一定比例加入 250mL 三角瓶中, 加入基础培养基溶解。121灭菌 30min。冷 却后接入灵芝液体菌种,接种量 10%。摇瓶条 件:三角瓶 250mL,装液量 70mL,30,
3、转速 150 叮 min,培养时间 7d。 1.2.3 生物量的计算 发酵液经离心,沉淀,用水洗涤 3 次,再次 离心,沉淀,在 105OC 烘干至恒重,称得生物量。1 . 2.4 胞外多糖的计算 将发酵液离心所得上清液合并,减压浓缩到发酵液体积的 2/5 一 1/2,加 95%乙醇到乙醇 含量为 30%,4oC 静置 24h。离心,弃去沉淀, 向上清液中再加 95%乙醇到乙醇含量达到 60%,4静置 24h。离心,沉淀用 60%乙醇水 溶液分散,再离心,弃去上清液,以此法清洗沉 淀,去除沉淀中夹带的少量单糖和低聚糖。沉 淀洗 2 次。再次离心后的沉淀用蒸馏水溶解并 定容到 25mL,然后用浓
4、玩 s 氏一苯酚法测多糖 含量。 2 结果2 . 1 中药对生物 t 的影响2 . 1 . 1 不同品种中药对灵芝菌生物量影响的 比较 培养基中分别加入 5 味不同的中药,接种 培养后所得生物量如表 1,其中的对照样为在 不添加中药的基础培养基培养的结果,其他条 件相同。从表 1 可见,加黄等、连翘和金银花的 样品生物量比对照样低得多,说明这些中药对 灵芝菌的生长可能存在抑制作用;麻黄和莱旅 子样品的生物量. 比对照样高,说明这些中药对 灵芝菌的生长可能有一定的促进作用。 2.1.2 中药用量的影响 在基础培养基相同的条件下,改变中药用 量,灵芝的生物量也受到影响。结果如图 1 第一作者:硕士
5、研究生。 收稿时间:2003 一 12 一 05.改回时间:2004 一 03 一 09 (46)(I,H)所示。 表 1 中药对生物 t 的影响 中药名称 加药量生物量 用量下不会抑制灵芝生长,而在 0.6259/mL 以 上则会显著抑制灵芝生长。 2.2 对胞外多糖的影响 对生物量不会产生大的抑制作用的 4 味中 药对灵芝菌在液体培养下产生胞外多糖旱的影 响结果见表 2。表 2 中药对胞外多枯的影响 中药用量胞外多搪 中药名称 ,于,工 R 内 J 内、 内 JLU 弓 JJ 门,lU.立.1 丹 j 八乙 0000000 朋 00 对照样 黄苹(R.&“tel 纽) 金银花(月“肠 ni
6、ce。) 连翘(介“之。Fo 移皿 h 二) 麻黄(E 琳耐栩:动 1ca 腼 Pf) 莱旅子(反尺“刘巨爪)45 4) 对照样 0318 金银花(月。:肠 nicerae)100236 连翘(开 uct“:Forsy 之 hzae)100229 麻黄(万助己己 msinlcas 勿 pf)2001451 莱放子(&menRaPhan)1001177 从表 2 可见,金银花和连翘对灵芝胞外多 糖分泌量没有明显的影响,而麻黄和莱旅子能 成倍增加胞外多糖分泌量。0n “山圳妙州娜 2O 旬 6O 中药用 801001201 引) 量 29L 一,3 讨论 叨30 斗金银花 一连翘 .山妙圳浑好01
7、,. , 406()801001201 钓 l 印 l8()20()2202 绷】 中药用量 lgL-, 图 1 中药用量对灵芝生物量的影响 从图 1 可见,随着 5 味中药用量的增加,生 物量均下降,表现为一定程度的抑制作用。但 是,加麻黄、莱兼子的样品虽然有随中药量增加 生物量下降的趋势,但生物量的绝对值却比不 加中药的对照样高。因此,这 2 味中药对灵芝菌的生长可能同时存在促进因子和抑制因子, 促进因子使生物量比对照样的大,而中药用量 的增加,使抑制因子的作用增加,所以生物量下 降。加黄芬的发酵液生物量比对照样刁、得多, 说明抑制作用较强。连翘的用量达到 1009/L 时有很强的抑制作用
8、,在 459/L 以下的用量没 有表现出强的抑制作用。金银花在 31 岁 L 的 研究表明,麻黄和莱服子对灵芝菌生长有 促进作用,还能促进胞外多糖的分泌,这将加强 灵芝的疗效。连翘和金银花对灵芝多糖没有大 的影响,但是它们在较小用量下对生物量有明 显促进作用,这也将有利于灵芝发酵液中灵芝 含量,从而增加灵芝发酵液的药用价值并减少 中药用量,为灵芝发酵类产品的研究开发提供 一定的依据。而黄答在灵芝培养过程中的变化 以及中药对灵芝的代谢产物可能产生的影响, 也有可能对灵芝发酵液的疗效产生某些影响, 为此我们将做另文报道。 参考文献 1Ta 吃 YJ,zhongJJ.Roleofoxygensupp
9、lyinsub- metgedfermentationofGan“lermaluc 以 umforPro- duetionofGanoderma 即 lysaeeharideandganoderie aeidJ.Enz 卿 eandMicrobialTeehnology,2003, 32:478 一 4842EoSK.Antiviralaetivitiesofvariouswaterand methanolsolublesubstaneesisolatedfrornGan 耐 erma Luc 以umJ.JEthn 叩 harmacol,1999,68(x 一 3): (47)129 一 13
10、6 张惟杰.复合多糖生化研究技术M.上海:上海科 技出版社,1987.211 一 213 徐锦堂.中国药用真菌学【M.北京:中国医科大 学,中国协和医科大学联合出版社,1997.509 一 515 肖贵平,黄占平.灵芝菌丝提取物对小鼠呼吸系统 炎症防治作用的研究【J.食用菌学报,2002,9(2): 17 一 21TheEffeetofChineseTraditionalMedieineson SubmergedFermentationofGanodermaLucidum WangLinZhangKeehangWangYuhong (BiomassLabofSouthernYangtzeUni
11、versity,Wuxi,214036) ABSTRACT5kindsofChinesetraditionalmedieineswereaddedintothemediumforeulturinga fu 眼 usGan 心ermaLucidum.Theresultsshowedthatthemyeelialmasseontentsinereasedwhen FlosLonicerae,FruetusForsythiae,E 户人 edrasinicaStaPfandSemenRaPhaniareadded.R. Scutellariaeeaninhibitthegrowthofthefu 雌
12、 us.KeywordsChinesetraditionalmedieine,邵 n 心 ermalucidum,fermentation,卯lysaeeharide 国外开发的新型鱼品添加瓤 口随着对营养性功能食品及有关成分的深入研究,人们发现植物亚麻的种子具有重要的功用。 这包 括了亚麻子的香精功能特性,以及它的脂肪酸组成、食物纤维、维生素和无机盐成分的含量 丰富与作用效 果。因此,引起了各家公司的重视,纷纷开发研究了各种营养功能性添加物,可应用在许多产 品生产中。 信怎窗 有一种营养功能性饮料产品叫.“BeuGrede”,产品中含有丰富。3 脂肪酸(24%)、可溶性食 物纤维(10%)、
13、木酚 素植物性雌激素和其他植物性化学物质。该产品是作为营养饮料和能源饮料组配制成的,具 有柔滑滋润的组织结 构和微生物学上呈稳定的淡白色,略显柔和的焦味。 口近年来,对天然抗菌剂的研究十分活跃,市场上出现了许多新产品。研究发现,从橄榄树叶 到人们饮食生活 中常用的大蒜等许多天然植物都具有杀菌或促进抗菌作用,其中最有望开发成抗菌剂的是浓 缩洋李(Prune)汁和 活性乳胆铁质(Lactoferrine)。由加利福尼亚洋李委员会资助的研究项目承担者堪萨斯州立 大学的丹尼尔冯教授在 研究中作了如下试验:在接菌纹碎的牛肉糜中添加了 3%的洋李提取物,结果牛肉糜中的致病 菌降低到 Iog1(对数 1)。
14、与月桂和其他香辣调味料不同,添加洋李提取物和用洋李汁处理后,牛肉糜显示出强烈的 抗菌性,同时还起到 保持牛肉糜水分的作用。 口最近,巴林通营养(BarringtomNutritionals)公司开发生产了一种商品名为“Origanox” 的由迷迭香酸衍生的强 力食品添加剂。这是一种水溶性的植物提取物,可以广泛添加利用在食品中的高抗氧化性添 加物,具有减少人们 随着年龄增加而产生的几种慢性疾病的危险性。此植物提取物添加剂已为专业生产提高人体 免疫系统之类产品 的阿尔特耐铁瓦天然食品(AlterantivaNatural)公司采用,用于该公司生产的产品“高能营 养棒”(Pro 一 EnergyBar)食 品中。该“营养棒”制品是使用在此植物提取物中添加了绿茶的抗氧化成分和辅酶 Q 组成的 添加物。由于这些添 加物的组成成分分别具有抗氧化作用效果,从而不仅提高了食用此高能量营养棒产品者抵御 身体感染症的能力, 而且还可以减轻身患感冒和发热症状时的病痛程度。 口最近,美国帕拉弟尼特(PalatimtofAlllerica)公司开发生产并上市销售了多种异麦芽糖醇 (ISOMAIJT)新产 品,形成了系列制品。这些新产品满足了消费者对无糖制品的需要。异麦芽糖醇产品的发热 量为砂糖的 50%,还 有低吸湿性、低血糖反应和防龋齿等优点,成为在开发新产品时可以考虑使用的最佳砂糖代替品。(48)