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1、一种中小型哺乳动物标本整体塑化制作方法一种中小型哺乳动物标本整体塑化制作方法*唐安科，唐发辉，赵元莙（重庆师范大学 重庆市动物生物学重点实验室 400047）摘摘 要要：本研究在改变传统哺乳动物标本制作方法上进行了一些新的尝试与改进，并形成了一种小型哺乳动物标本的制作方法。将哺乳动物整体按原生活姿态完整保存，制作标本的全过程不加任何有毒药品，并能长期保持标本原有形态。本方法所制标本不仅可作为教学、科研材料之用外，由于其无毒处理，还可用于家居装饰。关键词关键词：哺乳动物；标本制作；聚乙二醇哺乳动物标本是教学、科研中的重要材料，传统的哺乳动物剥制标本制作大多采用剧毒品三氧化二砷（AS2O3，俗称砒
2、霜） 、苯酚等作为防腐剂 。本研究经过反复试验：采用水溶性，温和性及稳定性较好的高分子化合物-聚乙二醇(分子量 600)11对小型哺乳动物标本进行塑化制作；其基本原理在于使用聚乙二醇（分子量 600）替换动物体内的水，能起到防腐固定的作用。由于在整个标本制作过程中不涉及到有毒药品的使用，故由该方法制作而成的小型哺乳动物标本不仅可作为科研教学之用，也可作为百姓的家居装饰之用。由于哺乳动物标本种类繁多，个体大小及形体差异较大，如外部形态、皮肤情况等都不一样，因而在制作过程中就必须根据不同情况采取不同方法进行标本的制作。下面以狗、兔、猫、鼠等哺乳动物为例，简述标本的制作塑化过程。1 仪器设备与药品仪
3、器设备与药品仪器设备：D型台式循环水真空泵、玻璃真空干燥器、强制对流干燥箱、*本工作为重庆市动物学市级精品课程和重庆师范大学重点基金(No. 08X1Z001)联合资助 唐安科, 男， 高级实验师, 动物学实验技术。电话:13389678688 通讯作者，赵元莙，zhao-脱水机，铁丝，平口钳，各种型号的义眼等。药品：聚乙二醇（分子量 600）HO(CH2CH2O)nH(PEG） ，工业酒精(CH3CH2OH)，冰醋酸 (CH3COOH)。2 塑化标本的制作方法塑化标本的制作方法2.1 标本的选取标本的选取所需标本力求保持个体或标本所标示部分的完整22。标本完整度表现为：标本无脱毛、皮肤无损伤
4、及无缺损的结构器官等。同时，对需制作标本的完整度进行评估，以决定姿态标本的种类。2.2 标本的处死标本的处死活体的动物应当在标本制作前 12 小时将其处死，使其血液凝固，以便在制作过程中不会有大量的血液流动而污染标本。需制作的标本可根据动物类型及实验条件而选用不同的处死方法：1、麻醉法：乙醚麻醉或酒精麻醉（本研究选择酒精麻醉法） ；2 栓塞法：空针注入空气栓塞，使血循受阻而死；3、窒息法：溺死、压迫心脏死亡或其它致其窒息死亡的方法。2.3 标本及内脏处理标本及内脏处理本研究中，对于处死的标本内脏处理有采有两种自制的方法：1. 中型标本，如狗、兔、猫的内脏解剖，从两腿不易观查到的腹部处纵或横剪开
5、一小口，采用止血钳夹出或取出全部内脏及腹部的油脂，并同时去除眼球；另从口腔上腭至脑部开孔取出脑浆，其余表皮、骨胳、肌肉保留。2. 对于小型标本，如鼠类，可不经解剖，可直接进行下一步的操作。2.4 定形及填充定形及填充上述第一种方法处理的标本根据标本大小，取粗细合适的铁丝 5 根，分别从足掌内侧肌肉处和尾部穿入至口腔穿出，穿出的 5 根铁丝打结使其固定，再退入口腔，在关节处需要根据标本的姿态使铁丝弯曲，此时关节能活动，一旦塑化后关节就不宜移动了。铁丝加固完成后即可填充。填充的材料可使用塑料瓶剪成 0.2-1cm 的条带（采用塑料条填充后期不易变形） 。填充时要尽量使其饱满，填充完毕后用线将开口缝
6、合。安装义眼时要尽是保持眼睛为张开状态，或者使用昆虫针辅助固定。对于第二种方法未经处理的标本，用细铁丝穿入四肢及头部固定姿态，并从肛门及口腔处进行填充。2.5 标本的整形标本的整形 第一、二种方法加固及填充的标本在整形过程中是关键环节，制作前要收集标本的各种数据，各部位的尺寸，并做记录，图片等，尽可能的保持标本的形象在标本生活时的某一刻的形态。上述第一、二种方法处理后的标本，按所需形态整理形态，因为塑化后关节就不能移动了，所以这一步就能看到完成的标本形态。2.6 标本的固定、防腐、脱水标本的固定、防腐、脱水上述处理的标本要即时用药品固定、防腐，以防标本尸体腐烂。为了减少甲醛、苯酚、等有毒药品的
7、使用，只用 95工业酒精加入 5的冰醋酸就能达到固定防腐的目的。上述整理好的标本在肌肉比较多的部位用注射器注入酒精后，把标本整体放入酒精中，主要起防腐和脱水的作用。条件允许情况下可中途更换酒精。固定时间长短视标本的大小而定，一般 7-30 天。2.7 标本塑化标本塑化 拫据标本的大小及实验的条件来考虑塑化方法。真空脱水塑化法：固定后的标本放入脱水机中经 60120 秒脱水后即可放入装有聚乙二醇的真空容器内进行塑化，并保证标本完全浸没于聚乙二醇内，否则其上可用重物压施，以防抽气时标本不能完全浸在聚乙二醇内。塑化全过程均在玻璃真空干燥器密闭和间歇负压下完成33。为保证聚乙二醇的充分渗入，需要每隔一
8、天翻动标本。期间视标本大小而定，每天负压抽气二次（负压 0.09 Mpa） ，此操作一般要持续约 7-15 天。经塑化完成后的标本放在脱水机内经 5-10 分钟的脱水处理后，取出标本整形状后即放入 40-45C 强制对流干燥箱中，直至标本干燥，其间每天要观察标本，看有无变形的情况，以便及时进行调整固定。经干燥的标本取出后，用清水冲洗表面毛皮上的聚乙二醇，时间不能过长，随后再次放入脱水机内经 5-10 分钟的脱水处理后，再次放入 45-50C 干燥箱中，反复操作，直至表面毛皮完全干燥，此时标本制作才算完成。逐步脱水塑化法：此方法要求设备不多，但聚乙二醇的用量较大。用将分子量 600 的聚乙二醇分
9、别配制成能够浸没标本，含量 25、50、75、100溶液44备用。固定、防腐后的标本经脱水机脱水处理后浸入 25聚乙二醇溶液内约 1 周后，依次转入增加聚乙二醇溶液含量的浓度直至 100聚乙二醇内，浸泡 1-2 周。然后按真空脱水法所述入干燥箱直至标本完全干燥后即制作完成。3 讨讨 论论传统哺乳动物标本制作要使用三氧化二砷（砒霜）等剧毒药品处理，如保存地点潮湿，则放置的时间过长后容易发霉长虫、脱毛等现象的出现，对保存环境的要求告别高，所以大多数标本都只能保存在标本室、标本馆内，并由专人管理，因为标本含有剧毒故不可能进入平常百姓家庭。而采用本方法塑化制作的标本优点便在于：整个制作过程未使用有毒药
10、品，对标本制作人及标本使用人都的健康都有保障。且所制作的标本经多年来的检验表明用聚乙二醇塑化的标本，不易霉变和虫蛀、无鼠咬且无味55,等显著优点。特别能保持毛皮的光滑及色泽（动物标本塑化文章） 。采用上述方法制作标本的肌肉及骨骼都保存下来，使标本的完成后的姿态及定形就更容易，不会因填充物过多或过少而在干燥后造成的变形。标本皮肤及肌肉内的水份由聚乙二醇交换所以保持了一定的弹性。尤其在目前人们大量饲养宠物的年代，有一定的感情，死后能用这种方法保存下来，使标本能走进平常人家，而不担心有毒药品的伤害。同时，前期研究结果亦表明，经以上述方法塑化的标本还可用于DNA的抽提，经实验数据表明，利用聚乙二醇固定
11、的样品DNA提取量比95%乙醇固定的样品DNA提取量要大，证明了聚乙二醇可作为一种较好的固定液应用于生物标本的保存66。除此之外，塑化的标本在制作时间上看比传统制作的周期时间长，一次性投资较多，实际每个标本完成后所需的药品的成本并不高。由于标本大多采用整体塑化，肌肉等结构更加接近真实的状态。参考文献1 严瑞瑄.鲍其鼐. 水溶性高分子. 北京: 化学工业出版社, 2003: 223 - 234.2 王少龙. 博物馆标本及动物录制技术.引进与咨询, 2004.10:39-40.3 张绍祥. 刘正津等. 生物塑化技术. 中国临床解剖学杂志, 1996. 14 (1): 67 - 70.4 钟思群. 曾剑波等. 动物标本塑化保存研究. 广东药学院学报，1999. 15 (4): 333 - 334.5 唐安科. 一种简易塑化动物标本的制作方法. 生物学通报, 2006,41(9).56-57.6 黄为.赵元莙.唐安科. 3 种不同保存方法固定标本的基因组 DNA 抽提及其影响因素的研究. 重庆师范大学学报,2008. 4(2): 20-24.
