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1、验证溶血对血清检测验证溶血对血清检测 NSE 的影响的影响 彭静 合肥市第八人民医院 检验科摘要摘要目的目的：探讨溶血程度对血清检测 NSE 的影响程度。方法方法：采用 Elecsys 2010 电化学发光仪，检测正常人血清标本及不同溶血程度的标本 NSE 含量。 结果结果：当血清中 Hb 含量0.685g/L 时，就会使血清 NSE 出现假阳性，每增加 1g/L 的血红蛋白，就会使 NSE 含量增加 23.764 ug/l。结论结论：溶血对血清检测 NSE 存在严重影响，NSE 含量随溶血程度的增加而增加，临床检测 NSE 要杜 绝溶血标本。 关键词关键词溶血 NSE Hb 含量神经元特异性
2、烯醇化酶(NSE) 为糖酵解关键酶,在临床上应用非常广泛,可 作为神经元损伤的标志物 1 ,也可作为肿瘤标志物用于神经母细胞瘤、小细 胞肺癌、垂体腺瘤等疾病的诊断2 。由于血小板和红细胞中存在其同工酶， 因而标本溶血，红细胞中可释放大量的NSE ,因此溶血可导致结果偏高3，严 重影响检测结果的真实性和可靠性。本文重点验证不同溶血标本对NSE检测的影 响程度，从而给临床医生很好的判断和依据。 1 资料与方法 1.1 仪器与试剂瑞士罗氏公司生产的Elecsys 2010全自动电化学发光分析仪及配套NSE 原装试剂，质控液。瑞典博尔医疗有限公司生产的MEDONIC CA620 全自动血细胞分析仪及
3、配套试剂。 1.2 检测对象及方法抽取正常人（体检各项指标均正常）全血7ml,其中5 ml置于促凝胶管 2 ml置于EDTA-K2抗凝管，将促凝胶管于离心机3000r/m离心5分钟，立 即分离血清，将血清标本分成10等份，每份200ul,进行编号。将抗凝全血混匀，用CA620血细胞分析仪，检测其血红蛋白（Hb）含量。用微量加样器，分别吸取0.1 ul，0.2 ul，0.5 ul，0.8 ul，1.0 ul, 1.5 ul，2 ul,5 ul，10 ul抗凝全血，置于2-10号管，混匀。将10个 样本置于-20冷冻2小时，使其充分溶血。 用Elecsys 2010分析仪检测NSE原装质控，确定其
4、仪器状态是否稳定。 将1-10号样本分别置于Elecsys 2010检测NSE含量。1.3 结果判断 NSE原装质控范围9.58-15.60 ug/l ,正常人群参考范围为0.00-16.30 ug/l。 2 结果全血HB含量为145 g/l，NSE原装质控测定值为11.61 ug/l，在控，仪器 处于稳定状态。1-10号血清管HB含量及其测得NSE值见下表1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 加入全血量 0 0.1 0.2 0.5 0.8 1.0 1.5 2.0 5.0 10.0 （ul） Hb 含量 0 0.076 0.145 0.363 0.580 0.725 1.087 1.450
5、 3.625 7.250 （g/l） NSE 值 9.81 11.88 13.96 20.60 24.25 29.86 37.06 50.89 92.55 182.10（ug/l） 3 讨论烯醇化酶是催化糖原酵途径中甘油分解的最后的酶。由3个独立的基因片段编 码3种免疫学性质不同的亚基、，组成5种形式的同工酶 、。二聚体是该酶分子的活性形式，亚基同工 酶存在于神经元和神经内分泌组织，称为神经元特异性烯醇化酶（NSE）。因为 NSE参与了糖酵解，使癌肿组织糖酵解作用增强，细胞增殖周期加快，细胞内的 NSE释放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增多，小细胞肺癌也是一种分泌 NSE的神经内分泌性质的
6、肿瘤。所以，NSE是小细胞肺癌，神经母细胞瘤最敏感、 最特异的肿瘤标志物4 .其中，NSE水平升高以小细胞肺癌 (SCLC)最为显著 (86 72 98 2 g L) ,灵敏度为 82 4 % ,特异性为 95 5 % 5。另外，NSE 在Whims瘤、乳腺癌、胃癌、淋巴瘤中也可有表达，68.7%的转移性精原细胞瘤 患者在行睾丸切除术前血清NSE水平可见升高。所以NSE检测的准确性对临床诊 断非常重要。而在红细胞、浆细胞和血小板中也有NSE存在，若静脉穿刺抽血后 的60分钟内未进行红细胞分离，那么NSE便会释放到血清中， 或由于抽血不顺 利等其他原因造成标本溶血都会对检测结果影响非常大，本试验
7、结果显示，当 正常血清NSE为9.81 ug/l，Hb浓度为0.363 g/l时，NSE浓度就会出现假阳性 （20.60 ug/l） ，每增加1g/L的血红蛋白，就会使NSE含量增加23.764 ug/l。按 照这个比例，即使正常血清检测值为0，当Hb浓度0.685 g/l，NSE就会出现假 阳性（16.3 ug/l） 。而含有0.685 g/l的Hb，血清肉眼可见微红色。所以当临 床采集标本困难，尤其是采集儿童患者，造成标本溶血，而又必须检测时，临 床医生和检验人员可以根据溶血程度来大致判断NSE的真实水平。当然，规范采 血、及时分离血清，避免溶血，才能得出准确而可靠的肿瘤指标含量。1 De
8、 Giorgio CM.Neurom-specific enolase,marker of acute neuronal injury,is increased in complex partial-status epilepticus J.Epilepsia,1996,37(7):606-609 2 晏勇，王学峰，陈阳美，等. 癫痫患者血清神经元特异性烯醇酶的测定 J； 中华神经科杂志；1999，32（1）：34-36. 3 张亚松;肖登岩;麦富巨. 温度、时间及溶血对全血标本中NSE测定的影响 J;医学临床研究；2008，25（7）：1193-1194 4 Ebraheim NA ,Mekhail AO ,Gargasz SS,et al.Ankle fractures involving the fibula proximal to the distal tibiofibular syndesmosisJ.J Bone Jt Surg,1997,18:512-513.5 陈社安,陈斌鸿,胡维维,庞丹梅. 血清NSE、CYFRA21-1检测对肺癌诊断的临床应用 广西医学2004年07期
