721A型分光光度计的使用方法

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1、【实验操作】1.检查 721A 型分光光度计的旋钮和开关,使其回复零点。2.按要求接通电源,按下“T 键”,打开暗盒盖和电源开关,指示灯亮。预热 20 分钟。3.调节波长旋钮至所需波长。4.取比色皿分别盛装 B、S、U 液,置入检测室(比色皿先用蒸馏水洗后,再用比色液润洗才能装比色液) 。B 液对准光路。5.调节面板“零位细调”,使指示为 00.0,即透射比“T”的零点,同时“一”号闪跃。6.合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器,使指示为 100.0,须反复 5、6 两点操作达到稳定。7.按下“A”键,指示为“.000”同时“一”闪跃,如果指示读数不是比值时,应调节“消光调零“电位器,使其

2、达到要求。8.拉出或推入拉杆,使 U、S 液分别置于光路读取 A 值,然后移动拉杆,读 B 管 A 值,如为 0,则前述 A 值有效。9.在稳定时,重复读数一次,并按下“T”键。10.打开检测室盖,取出比色皿,倾去比色液于水槽中,用自来水冲洗干净,倒置于表面皿(铺有滤纸)中。11.关上电源开关,拔出电源插头,取出比色皿架,检查检测室内是否有液体溅出,并擦净。检测室内放入硅胶袋,合上盖,套上仪器罩。【计算】1.利用标准管计算测定物含量 实际测定过程中,用一已知浓度的测定物按测定管同样处理显色,读取吸光度,再根据(6)式计算,即A1= K1C1l1 A2= K2C2l2式中 A1、A2 分别为已知

3、浓度标准和未知浓度测定吸光度。c1、c2 分别为已知浓度标准管和未知浓度测定管中测定物浓度。因盛标准液和测定液的比色杯径长相同(l1=l2) ,故上二式可写成:A1/K1C1= A2/K2C2(7)因标准液和测定液中溶质为同一物,K 值相同,即:(7)式可换算成下式:C2=(A2/A1) C1 (8)因测定液和标准液在处理过程中体积相同,故(8)式可写成:m2 =(A2/A?1)?m1(9)式中 m1、m2 分别表示标准液和测定液中待测物的含量。(9)式为实验操作中常用计算式。【注意事项】1.仪器须安放在稳固的工作台上,不能随意搬动。严防震动,潮湿和强光直射。2.盛装比色液时,约达比色皿 2/

4、3 体积,不宜过多或过少。若不慎使溶液流至比色皿外面须用棉花或拭镜纸擦干,才能放入比色架。拉比色杆时要轻,以防溶液溅出,腐蚀机械。3.千万不可用手或滤纸等物摩擦比色皿的透光面。4.比色皿用后应立即用自来水冲洗干净,若不能洗净,用 5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡,也可用新鲜配制的重铬酸钾洗液短时间浸泡,然后用水冲洗干净,倒置晾干。5.每套分光光度计上的比色皿和比色皿架不得随意更换。6.试管或试剂不得放置于仪器上,以防试剂溅出腐蚀机壳。7.如果试剂溅在仪器上,应立即用棉花或纱布擦干。8.测定溶液浓度的光密度值宜在 0.10.7 之间最符合光吸收定律,线性好,读数误差较小。如光密度超过 0.11.0 范围,可调节比色液浓度,适当稀释或加浓,再进行比色。9.合上检测室盖连续工作的时间不宜过长,以防光电管疲乏。每次读完比色架内的一组读数后,立即打开检测室盖。10.仪器连续使用不应超过 2 小时,必要时间歇半小时再用。11.测定未知液时,先作该溶液的吸收光谱曲线,再选择最大吸收峰的波长作为测定波长。12.721 分光光度计的放大器暗盒及单色器箱处放有两个硅胶筒,检测室内放硅胶袋,应经常检查,发现硅胶变色,应更换新硅胶或烘干再用。13.仪器较长时间不使用,应定期通电、预热。14.仪器用完之后,须拔去电源,套上仪器罩。

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