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1、水饱和酚和水饱和酚和 Tris 饱和酚的区别饱和酚的区别水饱和酚和 Tris 饱和酚( Phenoi Water/Tris-phenol)的区别:一、水饱和酚又叫水平衡酚。水饱和酚的 PH 小于 7,一般是 PH 为 5.0 左右,通常与异硫氢酸胍一起使用,用于细胞 RNA 的提取,在酸性环境中,DNA 在酚相,RNA 在水相。两者就分开了。二、Tris 饱和酚一般 PH 大于 7.8,用于 DNA 的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。 而 Tris 的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。 同时,由于
2、PH 值大于 7,在碱性环境中 DNA 处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到 DNA。Tris 饱和酚的配置:1、冰箱取出重蒸酚,室温放置68 度水浴溶化,切勿立即放入 68 度的水浴中,以防玻璃炸裂2、加 8羟基喹啉至 0.1和 巯基乙醇至 0.2,(原液 14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)3、加入等溶剂的 1MOL/ML 的 Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层4、加固体 Tris 约 1g/100ml 酚,摇匀,去水相5、加 0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至 PH 为 8.06、加 0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中 4 度保存7、如黄色消失或呈粉红色(说明酚已经被氧化),则不能使用