电针刺对手术创伤大鼠脾t淋巴细胞内il-2、ifn-γ及erk信号

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1、09年会年会-麻醉学基础研究麻醉学基础研究电针刺对手术创伤大鼠脾电针刺对手术创伤大鼠脾T T淋巴细胞内淋巴细胞内IL-2、IFN-及及ERKERK信号信号通路的影响通路的影响哈尔滨医科大学附属肿瘤医院麻醉科 (黑龙江哈尔滨,150081)王坤 王国年针刺疗法是我国传统医学的瑰宝,许多证据表明电针刺 “足三里”和“阑尾”穴能明显改善创伤诱导的免疫抑制,但是这种作用的分子机制尚未十分明确。胞外信号调节激酶(extracellular-regulated protein kinase1/2,ERK1/2)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK

2、)家族一员,在细胞信号转导网络中处于枢纽地位,与辅助性T细胞分化有关。那么,电针刺是否可以通过活化ERK信号通路,促进IL-2、IFN-炎症因子mRNA表达和蛋白生成,进而提高脾脏T细胞免疫功能,目前尚不清楚。目的目的:观察电针刺“足三里”和“阑尾”穴对手术创伤大鼠脾脏T细胞内IL-2、IFN-和ERK信号转导通路的影响,探讨其保护作用的分子机制,旨在为临床探索术后免疫功能治疗提供新思路。方法方法:健康雄性SD大鼠32只随机分为:正常对照组(Control组, n=8)、单纯电针组(EA组, n=8)、创伤组(Trauma组, n=8)和创伤后电针组(T + EA组, n=8)。采用手术创伤致

3、术后免疫抑制方法造模,大鼠术前12h 禁食、自由饮水,经腹腔注射戊巴比妥钠(40mg/kg体重)麻醉后,分别沿大鼠背部中线、腹部中线作6cm和5cm的纵行切口,背部切口以暴露脊柱为度,腹部作纵行切口后,暴露腹部脏器3分钟,以检查有无病灶及损伤,然后关闭腹腔。选取双侧足阳明胃经上的“足三里”、“阑尾”穴进行电针刺激,疏密波(60 Hz,1.05秒和2 Hz,2.85秒交替) ,强度以引起大鼠后肢肌肉轻微抖动而不嘶叫为宜(1 mA) ,持续30 min,每日1次,共3次。于术后3天无菌取脾,尼龙毛柱法分离脾脏中的T淋巴细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检

4、测脾脏T淋巴细胞内IL-2、IFN-蛋白和mRNA表达;应用Western blot 检测ERK1/2表达;ERK1/2下游核转录因子NF-B和AP-1表达测定,采用Trans-AM ELISA-based kits 分析法。结果结果:(1)EA组脾脏T淋巴细胞内IL-2、IFN-蛋白和mRNA表达,与Control组比较没有明显改变;手术创伤后IL-2和IFN-蛋白和mRNA表达明显降低,Trauma组与Control组比较有显著差异(P 0.001);给予电针刺处理后IL-2、IFN-蛋白和mRNA表达明显增加,T + EA组与Trauma组比较有明显差异(P = 0.002)。 (2)脾

5、脏T淋巴细胞内total-ERK1/2及p-ERK1/2、 NF-B和AP-1的DNA连接活性,EA组与Control组比较,无明显差异;手术创伤后p-ERK1/2表达、 NF-B和AP-1的DNA连接活性明显降低,Trauma组与Control组比较有明显差异(P 0.001);给予电针处理后p-ERK1/2表达、 NF-B和AP-1的DNA连接活性明显增加,T + EA组与Trauma组比较有统计学差异(P 0.001)。结论结论:电针刺“足三里”和“阑尾”可以提高创伤大鼠脾脏T细胞内IL-2、IFN-蛋白和mRNA的表达,激活其免疫功能,改善术后免疫抑制状态,这种保护作用与提高ERK1/2、 NF-B 和 AP-1活性密切相关。这一发现对于理解电针免疫调节机制和临床应用具有重要意义。关键词:关键词:电针;手术创伤;IL-2;IFN-;ERK1/2

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