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1、微生物学实验常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g 蛋白胨5g 氯化钠10g 琼脂1520g pH 7.07.2 水1000mL 121灭菌20min。2、高氏（ Gause） 1 号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g 硝酸钾1g 氯化钠0.5g 磷酸氢二钾0.5g 硫酸镁0.5g 硫酸亚铁0.01g 琼脂20g 水1000mL pH 7.2 7.4 配制时， 先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL 。121灭菌 20min。3、查氏（ Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g 磷酸氢二钾1g
2、 氯化钾0.5g 硫酸镁0.5g 硫酸亚铁0.01g 蔗糖30g 琼脂1520g 水1000mL pH 自然121灭菌 20min。4、马丁氏（ Martin ）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g 蛋白胨5g 磷酸二氢钾1g 七水合硫酸镁0.5g 1/3000 孟加拉红（rose bengal，玫瑰红水溶液）100mL 琼脂1520g pH 自然蒸馏水800mL 112灭菌 30min。 临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30 g。5、马铃薯培养基（简称PDA ）（培养真菌用）马铃薯200g 蔗糖（或葡萄糖）20g 琼脂1520g pH 自然培养基的配制：马
3、铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL 。121灭菌30min。6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水612 小时，至15阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65水浴中糖化34 小时，糖化程度可用碘滴定之。加水约20mL ，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3)、将糖化液用46 层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL ，调匀至生泡沫
4、时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(4)、将滤液稀释到56 波美度， pH约 6.4 ，加入 2% 琼脂即成。 121灭菌30min。7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）甘露醇（或葡萄糖）10g 磷酸二氢钾0.2g 七水合硫酸镁0.2g 氯化钠0.2g 二水合硫酸钙0.2g 碳酸钙5g 蒸馏水1000mL pH 7.0 7.2 113灭菌 30min。8、半固体肉膏蛋白胨培养基肉膏蛋白胨液体培养基100mL 琼脂0.35 0.4g pH 7.6 121灭菌 20min。9、合成培养基偏磷酸铵1g 氯化钾0.2g 七水合硫酸镁0.2g 豆芽汁10mL 琼脂20g 蒸馏水1000mL pH
5、 7.0 加 12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.26.8 ，颜色由黄变紫，作指示剂）。121灭菌20min。10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基黄豆芽100g 蔗糖（或葡萄糖）50g 水1000mL pH 自然培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL ，煮沸约30min，用纱布过滤。用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。 121灭菌20min 。11、油脂培养基蛋白胨10g 牛肉膏5g 氯化钠5g 香油或花生油10g 1.6%中性红水溶液1mL 琼脂1520g 蒸馏水1000mL pH 7.2 121灭菌 20min 注： (1) 、不能使用变质油。
6、(2)、油和琼脂及水先加热。(3)、调好 pH值后，再加入中性红。(4)、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。12、淀粉培养基蛋白胨10g 牛肉膏5g 氯化钠5g 可溶性淀粉2g 蒸馏水1000mL 琼脂1520g 121灭菌 20min 13、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液100mL 明胶1218g pH 7.6 在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH7.27.4 。121灭菌 30min。14、蛋白胨水培养基蛋白胨10g 氯化钠5g 蒸馏水1000mL pH 7.6 121灭菌 20min。15、糖发酵培养基蛋白胨水培养基1000mL 1.6%溴钾酚紫乙醇溶液12mL pH 7
7、.6 另配制 20% 糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10mL 。培养基的配制：(1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH7.6）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（ Durham tube ），使之充满培养液。(2)、将已分装好的蛋白胨水和20% 的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121灭菌20min；糖溶液112灭菌30min。(3)、灭菌后，每管以无菌操作分别加入20% 无菌糖溶液0.5 mL （按每 10mL培养基中加入 20% 的糖液 0.5mL，则成 1% 的浓度）。配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。16、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨5g 葡糖糖5g 磷酸氢二钾2g 蒸馏水1
8、000mL 将上述各成分溶于1000mL水中，调 pH7.0 7.2 ，过滤。分装试管， 每管 10mL ，112灭菌 30min。17、麦氏（ Meclary ）琼脂（酵母菌）葡萄糖1g 氯化钾1.8g 酵母浸膏2.5g 醋酸钠8.2g 琼脂1520g 蒸馏水1000mL 113灭菌 20min。18、柠檬酸盐培养基磷酸二氢铵1g 磷酸氢二钾1g 氯化钠5g 硫酸镁0.2g 柠檬酸钠2g 琼脂1520g 蒸馏水1000 mL 1% 溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL 培养基的配制：将上述各成分加热溶解后，调pH6.8，然后加入指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色，分装试管，121灭菌20mi
9、n 后制成斜面，注意配制时控制好pH ，不要过碱，以黄绿色为准。19、醋酸铅培养基pH7.4 的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL 硫代硫酸钠0.25g 10% 醋酸铅水溶液1 mL 培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL加热溶解，待冷却至60时加入硫代硫酸钠 0.25g ，调至 pH7.2，分装于三角瓶中， 115灭菌15min。取出后待冷却至5560，加入 10% 醋酸铅水溶液（无菌的）1mL ，混匀后倒入灭菌试管或平板中。20、血琼脂培养基pH7.6 的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL 脱纤维羊血（或兔血）10 mL 培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至50时，加入无菌脱纤维羊
10、血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。37过夜检查无菌生长即可使用。21、玉米粉蔗糖培养基玉米粉60g 磷酸二氢钾3g 维生素 B1 100mg 蔗糖10g 七水合硫酸镁1.5g 水1000 mL 121灭菌 30min，维生素B1单独灭菌15min 后另加。22、酵母膏麦芽汁琼脂麦芽粉3g 酵母浸膏0.1g 水1000 mL 121灭菌 30min。24、棉籽壳培养基培养基的配制：棉籽壳50% ，石灰粉 1% ，过磷酸钙1% ，水 65% 70% ，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。25、复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）蛋白胨10g 乳糖10g 磷酸氢二钾3.5g 琼脂203
11、0g 蒸馏水1000 mL 5% 碱性复红乙醇溶液20 mL 培养基的配制：先将琼脂加入900 mL 蒸馏水中，加热溶解，再加入磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000 mL ，调 pH至 7.2 7.4 。加入乳糖，混匀溶解后，115灭菌 20min。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min 后。立刻滴加于20 mL 5% 碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中，充分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过2 周。26、伊红美蓝培养基（EMB培养基）蛋白胨水培
12、养基100 mL 20% 乳糖溶液2 mL 2% 伊红水溶液2 mL 0.5%美蓝水溶液1 mL 培养基的配制： 将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化， 冷却至 60左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后， 立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115灭菌20min。27、乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查”用）蛋白胨10g 牛肉膏3g 乳糖5g 氯化钠5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL 蒸馏水1000 mL 培养基的配制：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000 mL蒸馏水中，调pH至 7.2 7.4 。加入
13、 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。115灭菌 20min。28、石蕊牛奶培养基牛奶粉100g 石蕊0.075g 水1000 mL pH 6.8 121灭菌 15min。29、 LB（Luria-Bertani）培养基蛋白胨10g 酵母膏5g 氯化钠10g 蒸馏水1000 mL pH 7.0 121灭菌 20min。30、基本培养基磷酸氢二钾10.5g 磷酸二氢钾4.5 硫酸铵1g 二水合柠檬酸钠0.5g 蒸馏水1000 mL 121灭菌20min。需要时灭菌后加入：糖（ 20% ）10 mL 维生素 B1（硫胺素）（1% ）0.5 mL 七水合硫酸镁（20%
14、 ）1 mL 链霉素（ 50mg/ mL）4 mL，终浓度200g/ mL 氨基酸（ 10mg/ mL）4 mL，终浓度40 g/ mL pH 自然（ 7.0 ）31、庖肉培养基培养基的配制：(1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方块，置1000 mL蒸馏水中，以弱火煮1 小时， 用纱布过滤， 挤干肉汁， 将肉汁保留备用。将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。(2)、将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000 mL，加入蛋白胨20g，葡萄糖2g，氯化钠 5g，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。(3)、取上层溶液测量pH，并调整其达到8.0 ，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度，1
15、21灭菌15min 后补足蒸发的水分，重新调整pH值 8.0 ，再煮沸1020min，补足水量后调整pH7.4。(4)、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的1/4 左右。经 121灭菌 15min 后备用，如当日不用，应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林，以隔绝氧气。32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基乳糖5g 牛肉膏5g 酵母膏5g 蛋白胨10g 葡萄糖10g 氯化钠5g 琼脂粉15g pH 6.8 水1000mL 33、马铃薯牛乳培养基培养基的配制：200g 马铃薯（去皮）煮出汁，脱脂鲜乳100mL ，酵母膏5g，琼脂粉15g，加水 1000mLpH7.0。制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混合。34、尿素琼脂培养基尿素20g 琼脂15g 氯化钠5g 磷酸二氢钾2g 蛋白胨1g 酚红0.012g 蒸馏水1000mL pH 6.8 0.2 培养基的配制：在蒸馏水或去离子水100mL中，加入上述所有成分（除琼脂外）。混合均匀。过滤灭菌。将琼脂加入900mL蒸馏水或去离子水中，加热煮沸腾。在15 磅 121灭菌15min。冷却至 50，加入灭菌好的基本培养基，混匀后，分装于灭菌的试管中，放在倾斜位置上使其凝固。
