临床常用免疫学检查

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1、1 1第八章第八章 临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查 免疫学检查是实验诊断学中的重要组成部分，常用于 一些疾病的诊断与疗效监测，这些疾病主要有：1.感染性疾病，如肝炎、伤寒等；2.自身免疫性疾病，如SLE、类风关、自免溶、ITP等 ；3.变态反应性疾病（超敏），分为四型：4.免疫缺陷病：如AIDS。5.肿瘤 免疫功能包括体液免疫和细胞免疫。2 2第一节 血清免疫球蛋白检测 免疫球蛋白(Ig)是指一组具有抗体活性的球蛋白，由浆 细胞合成与分泌，存在于机体的血液、体液、外分泌 液和部分细胞的膜上。Ig因其功能和理化性质分IgG、 IgA、IgM、IgD和IgE五大类。一、免疫球蛋白G检测 免疫

2、球蛋白G(IgG)为人体含量最多和最主要的Ig，占 总免疫球蛋白的70-80。它对病毒、细菌和寄生虫 等都有抗体活性，也是唯一能够通过胎盘的Ig，通过 自然被动免疫使新生儿获得免疫抗体。参考值 7.016.6gL3 3临床意义1IgG增高 多克隆性增高：即IgG、IgA、IgM均增高。常见 于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核 、链球菌感染以及自身免疫性疾病如系统性红 斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎等； 单克隆性增高：仅有某一种Ig增高而其他种类不 增高。主要见于免疫增殖性疾病，如分泌型多 发性骨髓瘤(MM)，可见到IgG、IgA、IgD或IgE 增高，据此可将MM分为IgG型、IgA型、

3、IgD型 和IgE型。其中多为IgG型，其次为IgA型、IgD 型，少见IgE型。4 42. IgG降低 见于各种先天性和获得性体液免疫缺陷病、联 合免疫缺陷病、也见于重链病、轻链病、肾病综 合征、病毒感染和免疫抑制剂患者。儿童较成年 人低，女性稍高于男性。 需按年龄组参考值来进行分析和判断。5 5二、免疫球蛋白A检测 免疫球蛋白A(IgA)分为血清型IgA与分泌型IgA(SIgA)两种 。参考值 血清IgA为0.73.58L；SIgA：唾液平均为0.3g L，泪液为3080gL，初乳平均为5.06gL，粪便平 均为1.3gL。临床意义 1IgA增高 见于IgA型MM，SLE、类风湿性关节炎、

4、肝硬化、湿疹 和肾脏疾病等。 2IgA降低 见于反复呼吸道感染、非IgA型MM、重链病、 轻链病、原发性和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病 等。 6 6三、免疫球蛋白M检测 免疫球蛋白M(IgM)是分子质量最大的Ig，约占血清总 Ig的5-10, IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子，天然同族凝聚素 (抗A、抗B)、冷凝集素及伤寒沙门菌的抗体均属此类 。 参考值 0.52.6gL 临床意义 1IgM增高：见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关 节炎、SLE等。此外，在原发性巨球蛋白血症时，IgM 呈单克隆性明显增高； 2IgM降低：见于IgG型重链病、IgA型MM、先天性免 疫缺陷症、免疫抑制疗法

5、后、淋巴系统肿瘤和肾病综 合征等。 7 7四、免疫球蛋白E检测 免疫球蛋白E(IgE)为血清中最少的一种Ig，约占血清总Ig 的0.002；它是一种亲细胞性抗体，与变态反应、寄生 虫感染及皮肤过敏等有关。 参考值 ELISA法为0.10.9mgL。 临床意义 1IgE增高 见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类 风湿关节炎，以及各种过敏性疾病,寄生虫感染等；2IgE降低 见于先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性 肿瘤、长期用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩张症等 。 8 8五、血清M蛋白检测 M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，它是一种单克隆B细胞增 殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白

6、分子及 其分子片段。 参考值 蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法 临床意义 检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。正常人为阴性。 见于：多发性骨髓瘤：以IgG型最常见，其次为IgA型， IgD和IgE罕见，也有IgM型的报道；巨球蛋白血症 (Waldenstrom症)：存在大量单克隆IgM；重链病：出现 Ig重链(、重链)；轻链病：出现单克隆游离轻链； 半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片 段；7S IgG病：为恶性M蛋白病等。9 9第二节 血清补体检测 补体(complement，C)是一组具有酶原活性的不 耐热的糖蛋白。 有三组分子组成：第一组：它由传统途径的九种成分C1

7、(C1q、C1r 、C1s)C9；第二组：B因子、D因子、P因子、H因子等；第三组：补体调节蛋白，如C1抑制物等。 血清总补体活性或其单一补体成分的变化对某些 疾病的诊断和疗效观察有极其重要的意义。1010一、总补体溶血活性检测 总补体溶血活性(CH50)以溶血素(抗体)致敏的绵羊红细 胞(抗原抗体复合物)激活待测血清中的Cl，进而引起补 体活化的连锁反应，（在绵羊红细胞上形成多分子的聚 合物，影响其膜表面的结构与功能，）最终导致绵羊红 细胞溶解。 溶血程度在一定范围内（2080溶血率）与补体的 活性呈正相关，为S形曲线关系。故一般以50溶血作 为检测终点(CH50)，较为灵敏、准确。 参考值

8、 试管法为50100kUL1111临床意义 主要反映补体传统途径9种补体成分(ClC9)的综合水 平。CH50增高：见于急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤 ；CH50减低：更有意义：见于各种免疫复合物性疾病， 如肾小球肾炎、自身免疫性疾病(如SLE)、感染性心内 膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病，重症营养不良和遗传 性补体成分缺乏症等。1212二、补体C3检测 补体C3(C3)是一种由肝脏合成的2-球蛋白，由和两条 多肽链组成。 C3 在补体系统各成分中含量最多，是传统 途径和旁路途径被激活的关键物质。 参考值 0.81.5gL 临床意义 增高：见于急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应等； 减低：见于

9、大多数急性肾小球肾炎、链球菌感染后肾炎、 狼疮性肾炎患者。还见于活动性SLE和类风湿关节炎等。 因此检测C3对这些疾病诊断有价值。1313第三节 细胞免疫检测 人体的淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群体， 可分为T、B、K和NK等细胞群，它们又分别有若干亚群 ，各有其特异的表面标志和功能。 这些淋巴细胞群和亚群在免疫应答过程中相互协作、相 互制约，共同完成对抗原物质的识别、应答和清除，从 而维持机体内环境的稳定。 临床上各种免疫病均可出现不同群淋巴细胞数量和功能 的变化。对它们进行检测可用以判断细胞免疫功能。 1414T淋巴细胞T淋巴细胞执行特异性细胞免疫应答，在机体细胞 免疫和体液免疫中

10、均有重要作用。 u T淋巴细胞作为免疫效应细胞主要行使TDTH介导的 DTH反应和TC细胞直接杀伤靶细胞。 uT淋巴细胞作为免疫调节细胞，具有辅助其他免疫细胞 分化和调节免疫应答（促进和抑制）的功能。1515一、T淋巴细胞的检测 T淋巴细胞是由一群功能不同的异质性淋巴细胞组成， 在形态学上难以区分，但是可借助于其细胞膜表面标 志加以区别，此检测方法众多，现主要介绍下面几种 ： (一)T细胞花结形成试验 T细胞表面有绵羊红细胞(SRBC)受体，可与SRBC结 合形成花结样细胞，称为红细胞玫瑰花结形成试验或E 玫瑰花结形成试验(ERFT)。 本试验用于检测T细胞的数量。 显微镜下计数花结形成细胞（

11、以每个淋巴细胞粘附3个 或3个以上绵羊红细胞者为花结形成细胞）占淋巴细胞 的比例，T淋巴细胞的百分率（EtRFC）1616参考值 EtRFC为64.46.7 临床意义 降低：见于免疫缺陷性疾病如恶性肿瘤、某些病毒感染、大面 积烧伤、多发性神经炎、淋巴增殖性疾病； 升高：见于甲状腺功能亢进症、甲状腺炎、重症肌无力、慢性 活动性肝炎、SLE活动期及器官移植排斥反应等。1717T细胞花结形成试验1818(二)T细胞转化试验 体外培养时，T淋巴细胞被丝裂原，如植物血凝素(PHA) 或刀豆蛋白A(ConA)刺激，代谢活跃，增加蛋白质、 RNA和DNA的合成，从而转化为母细胞，部分细胞发生 有丝分裂。 计

12、数淋巴细胞及转化的母细胞数，求出转化的百分率。 其检测方法有： 1.形态学法：母细胞特点体积增大，浆深染，核增大，染色质疏松，核仁明显。19192. 3H-TdR掺入法: T淋巴细胞中加入PHA等发生有丝分裂，且伴有新的 DNA合成，此时若加入氚标记的胸腺嘧啶核苷（3H- TdR），则3H-TdR可被淋巴细胞作为合成DNA的原料 摄入，根据3H-TdR的摄入量，可判断细胞的增殖程度 。 采用液体闪烁仪测定淋巴细胞的脉冲数分(cpm)值， 计算出刺激指数（SI）。 从而反映T细胞的免疫功能。2020参考值 形态学法：转化百分率为60.17.6。3H-TdR掺入法：刺激指数(S1)测定组cpm均值

13、对照组 cpm均值；正常SI0.25。 临床意义 1前列腺癌时6090患者血清PSA水平明显升高 ；当行外科切除术后，90患者血清PSA水平明显降低 。 2若见PSA水平升高，即有转移或复发的可能。 3良性前列腺瘤、前列腺肥大或急性前列腺炎时，约有14的患者血清PSA水平升高，此时应注意鉴别。4747二、糖脂肿瘤标志物检测(一)癌抗原-50测定 癌抗原-50(CA-50)是一种肿瘤糖类相关抗原，主要由唾液酸 糖脂和唾液酸糖蛋白所组成。它对肿瘤的诊断有广泛性。临床意义 1增高见于87的胰腺癌，80的胆(道)囊癌，73的原发 性肝癌，50的卵巢癌，20的结肠癌、乳腺癌、子宫癌等 。 2动态观察其水

14、平变化对癌肿瘤疗效及预后判断、复发监测 。 3对鉴别良性和恶性胸、腹水有价值。 4在慢性肝病时，CA-50也升高。 4848(三)糖链抗原19-9测定糖链抗原19-9(CAl9-9)是一种糖蛋白。胚胎期分布于胎儿的 胰腺、胆和肠等组织；在成人的胰、胆等部位也有少量存 在。 临床意义 1.胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病时血中CAl9-9的水平可明显升 高。但无早期诊断价值，对早期病人的敏感度仅为30。 2连续检测对病情进展、手术疗效、预后估计及复发诊断有 重要价值。 3急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性肝炎、肝 硬化等，血清CAl9-9也可出现不同程度的升高。 4若结合CEA检测，对胃癌诊断符

15、合率达85。4949(四)癌抗原125测定 癌抗原125（CA125)是一种糖蛋白。存在于上皮性卵巢癌组织及患者血清中 参考值： 血清CA125 3.5万uL。 临床意义 1. 卵巢上皮癌病人的CA125的水平可明显升高；对观察疗效和判断复发较为敏感。 2盆腔肿瘤的鉴别。 3其他肿瘤可出现不同程度的升高。 4早孕等。5050三、酶类肿瘤标志物检测（一）异常凝血酶原测定： 在缺乏维生素K的情况下，肝细胞不能合成正常的依赖维生素K的凝血因子(、X)，只能合成无凝血功能的异常凝血酶原(APT)。 肝细胞癌时，由于癌细胞对凝血酶原前体的合成发生异常，凝血酶原前体羧化不足，从而生成大量的APT。APT测定是反映肝细胞癌的一种标志物。参考值 1：40为阳性。 临床意义 1ANA阳性 最多见于未治疗的SLE，阳性率达80-100； 活动期SLE几乎100阳性。经皮质激素治疗后，阳性率可降低。 也可见于药物性狼疮(100)、混合性结缔组织病(100) 、全身性硬皮病(85-95)、多发性肌炎(30-90)、 狼疮性肝炎(95-100)、原发性胆汁性肝硬化(95-100 )。 其他还见于干燥综合征、类风湿关节炎、桥本甲状腺炎等 。 62622荧光核型