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1、植物多糖植物多糖,又称植物多聚糖,是植物细胞代谢产生的聚合度超过 10 个的聚糖。是由许多相同或不同的单糖以 一或 一糖苷键所组成的化合物,普遍存在于自然界植物体中,包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。由于植物多糖的来源广泛,不同种的植物多糖的分子构成及分子量各不相同。有些植物多糖如淀粉、纤维素、果胶,早已成为人们日常生活中的重要组成部分。现今植物多糖研究日益受到关注,国际科学界甚至提出 21 世纪是多糖的世纪;科学实验研究显示,许多植物多糖具有生物活性,具有包括包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、保护肝脏等保健作用。所以植物多糖早已被广泛运用到医学界、餐饮界等大众生活领域
2、中。许多多糖可显著提高机体巨噬细胞的吞噬指数,并可刺激抗体的产生,从而增强人体的免疫功能。由于现代医学、细胞生物学及分子生物学快速发展,人们对免疫系统的认识越来越深入。免疫系统紊乱,会导致人体衰老和多种疾病的发生。多糖的免疫调节作用主要是通过激活巨噬细胞、T 和 B 淋巴细胞、网状内皮系统、补体和促进干扰素、白细胞介素生成来完成的。研究显示,大枣多糖、竹叶多糖、绞股兰多糖、虫草多糖、黑豆粗多糖、无花果多糖、猴头菇多糖、中华猕猴桃多糖、白术多糖、防风多糖、地黄多糖、枸杞多糖、螺旋藻多糖、杜仲多糖、女贞子多糖等均有提高机体免疫力的功能。菌类植物多糖中云芝多糖、灵芝多糖、茯苓多糖、银耳多糖、香菇多糖
3、早已应用于临床,可增强细胞免疫功能。一些多糖对癌细胞具有很强的抑制作用,具有抗肿瘤活性。例如香菇多糖已作为原发性肝癌等恶性肿瘤的辅助治疗药物,金针菇多糖、云芝多糖、猪苓多糖、竹荪多糖、茯苓多糖等也都具有不同程度的抗癌活性。目前研究认为植物多糖主要是通过增强机体的免疫功能来达到杀伤肿瘤细胞的目的,即抗癌作用经过宿主中介作用,增强机体的非特异性和特异性免疫作用,而非直接杀死肿瘤细胞,同时也与多糖影响细胞生化代谢、抑制肿瘤细胞周期和抑制肿瘤组织中 SOD 活性有明显的关系。枸杞多糖能增强抗癌免疫监视系统的功能;海带多糖对荷瘤 H22 小鼠有明显的抑制作用,其抑瘤率高达 43.5%;灰树花多糖能明显抑
4、制肿瘤生长,并能增强小鼠的免疫功能。其他多糖如螺旋藻多糖、银耳多糖、人参多糖、香菇多糖、猪苓多糖、枸杞多糖、黄芪多糖、灵芝多糖、竹叶多糖、金针菇多糖、虫草多糖均有抗肿瘤作用。金针菇多糖、银耳多糖等可显著降低机体心肌组织的脂褐素的含量,增加脑和肝脏组织的 SOD 酶活力,从而起到延缓机体衰老的作用。在传统的中医延缓衰老的古方中,基本上是以植物药为主,含量较高的成分多为糖类。现代科学提出了衰老的自由基学说,其基本要点是:在正常情况下,机体内自由基的产生和消失处于动态平衡状态下,即自由基在不断产生,同时也不断被消除,以维持机体的正常代谢,但当机体衰老时,自由基产生的量比较多,同时机体清除自由基的能力
5、却降低了,过剩的自由基对机体组织进行攻击,机体的功能发生紊乱与障碍,而呈现衰老的症状。有研究显示,油柑多糖能影响自由基的活性,其活性的大小与多糖的量有关。肉苁蓉多糖能延缓皮肤衰老,增加胶原纤维含量,改善皮肤弹性,激活超氧化物歧化酶,降低体内脂褐质的堆积。黑木耳多糖具有清除超氧阴离子、抗氧化及保护线粒体的功能。而枸杞多糖的抗衰老作用更为突出,对机体多种生理、生化功能的促进与调节作用更为全面。另外,何首乌、人参、黄芪、女贞子的多糖都有一定程度的抗衰老作用。有些植物活性多糖具有降血糖活,降血脂作用。正常情况下,人体内脂质的合成与分解保持一个动态的平衡,一旦平衡遭到破坏,血脂含量的增高将使动脉内膜受到
6、损伤而导致动脉粥样硬化,从而诱发心脑血管疾病。降低血脂含量对于防治心血管疾病具有重要意义。据报道,南瓜多糖具有降低血糖和降血脂作用,对糖尿病的防治效果已获确认。动物实验表明,南瓜多糖是较理想的能改善脂类代谢的食疗剂。黑木耳多糖可使小鼠血液中的胆固醇显著降低;海带多糖能明显降低糖尿病小鼠的血糖和尿素氮,并对胰岛损伤有修复作用。银耳多糖、茶叶多糖、魔芋多糖既能降血糖又能降血脂。另外,具有降血糖作用的还有番石榴多糖、人参多糖、乌头多糖、知母多糖、苍术多糖、薏苡仁多糖、山药多糖、麻黄多糖、刺五加多糖、紫草多糖、桑白皮多糖、稻根多糖、米糠多糖、甘蔗多糖、黄芪多糖、灵芝多糖、紫菜多糖、昆布多糖、麦冬多糖、
7、灰树花多糖、黑木耳多糖在现实生活中,随着科学技术和人们生活的现代化,电子电器越来越普遍,人们越来越多的接触辐射,尤其是放疗的肿瘤患者、职业受照人员的辐射性损害日益受到重视。动物实验显示,黄芪多糖、人参多糖、当归多糖、柴胡多糖、灵芝多糖、枸杞多糖、黄精多糖、虫草多糖、芦荟多糖、黄蘑多糖、螺旋藻多糖、红毛五加多糖、云芝多糖、木耳多糖能保护小鼠免受辐射损伤。其实,不论是植物、动物或微生物来源的多糖,都具有一定的抗辐射作用,其机理一般是认为多糖通过强化造血系统和活化吞噬细胞的作用来提高机体对辐射的耐受性。 大量研究表明,许多多糖对细菌和病毒有抑制作用,如艾滋病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒、囊状胃炎病毒等
8、。实验证明,银杏胞外多糖与银杏叶多糖可显著抑制致炎剂引起小鼠耳肿胀和毛细血管通透性增加,表明它们具有抗炎作用;紫基多糖不仅能抑制如金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌,对革兰氏阴性菌如藤黄色八叠球菌也有抑制作用。大多数多糖的抗病毒机制是抑制病毒对细胞的吸附,这可能是多糖大分子机械性或化学性竞争病毒与细胞的结合位点有关。因此,利用植物多糖的抑菌作用,把植物多糖作为食品中的一种成分,既可以防腐,有可以为产品增加附加值。在国内,已有利用植物多糖进行抗艾滋病的研究,在某种程度上为开发可替代传统的价格昂贵且副作用较大的抗病毒药物指明了一个方向。有研究表明,北五味子粗多糖有保肝作用,能降低小鼠的肝损伤;枸杞多糖可
9、降低肝组织丙二醛的含量,这两种多糖都能提高肝糖原含量,从而提高机体的能量储备,有利于抵抗有害物质对肝脏的损害。多糖的分离纯化是指多糖研究中获取研究对象的过程。一般这一过程包括分离、纯化和纯度鉴定 3 步。其中分离纯化是多糖研究的关键,其成功与否、效果的好坏都会直接影响后续研究的可行性与可信度。所谓分离就是将存在于生物体中的多糖解离出来的过程。从植物中提取多糖,一般先用石油醚、乙醚等有机溶剂提取除去脂溶性杂质,然后根据不同的溶解度选择一种溶剂进行萃取。大多数多糖可采用一定温度的水或稀碱溶液提取,要尽量避免酸性条件,这会引起多糖中糖苷键断裂。而有些生物材料,在分离多糖前,还需进行脱脂或脱色处理。分
10、离沉淀后获得的多糖提取物中,常会有无机盐、醇不溶的低分子有机物,大分子蛋白质等杂质。而多糖的纯化就是指将粗多糖中的杂质去除而获得的单一的多糖组分。一般是先脱除非多糖组分,再对多糖组分进行分级;而脱除非多糖组分则一般是先脱除蛋白质后再去除小分子杂质。 多糖脱蛋白常用的方法有 Sevag 法、三氯乙酸法;而除去小分子物质最常用 DEAE 纤维素层析、,Sephadex 凝胶过滤、季铵盐沉淀、盐析、亲和层析、超滤和电泳等方法。在获得单一多糖组分后,必须对其纯度进行鉴定。近年来发现,多糖的糖链在分子生物学中具有决定性的作用,但要测定完整的结构很困难。同时也发现,多糖的活性与分子量、溶解度、粘度有关。所
11、以多糖的鉴定一般包括纯度、分子量以及组成多糖的各个单糖的鉴定。 需要说明的是:多糖的纯度不能用通常化合物的纯度标准来衡量,因为即便是多糖纯品,其微观也并不均一,仅代表相似链长的多糖分子的平均分布,通常所谓的多糖纯品实际上也只是一定相对分子质量范围的多糖的均一组分。科研工作者曾采用经水或甲醇等有机溶剂水溶液浸泡,低温减压浓缩、流水透析、乙醇沉淀、再经凝胶柱层析、冷冻干燥等途径得到较单一多糖成分,再经高效液相色谱或凝胶层析测定其纯度、分子量,酸水解气-液相层析或纸层析测定其单糖组成。目前常用于多糖纯度鉴定的方法有凝胶过滤法、高压电泳法、超离心法、旋光测定法、毛细管电泳法等。其中应用最多的是凝胶层析
12、法,该法的准确度高。多糖的生物大分子结构比蛋白质更为复杂,这不仅因为组成多糖的单糖品种繁多,而且只有一种单糖组成的多糖,其连接方式的不同以及可能存在支链也可造成多糖的结构测定非常困难。多糖的结构有 4 级的概念:一级包括糖基的组成、排列顺序、相邻糖基的连接方式、异头物构型及糖链有无分支,分支位置与长短;二级包括多糖骨架链间以氢键结合所形成的各种聚合体;三级包括多糖一级结构的重复顺序,由于糖单元的羟基、羧基、氨基以及硫酸基之间的非共价相互作用,导致有序的二级结构在空间形成规则而粗大的构象;四级包括多聚链问非共价链结合形成的聚集体。例如,木聚糖是植物体中最常见的一种半纤维素,最近 Mazeau 等
13、对木聚糖的构象进行研究,发现其中的羟基被月桂酸酯化后,酯基对两边的糖苷键的构象有很大的影响。简单地说,多糖的结构分析包括糖基的组成以及这些糖基的连接方式。糖基的成分测定首先要了解它是由哪些单糖组成、各种单糖的比例如何,通常采用将苷键用酸、酶、甲醇水解或选择性降解,由此将大分子裂解成各种小片段,各自分析小片段的结构后,拼凑成整个化合物的结构。多糖含量的测定常采用比色或滴定法。比色法使用历史悠久且已被广泛使用,该法须用从植物中提取、纯化后的多糖进行显色、比色测定,方法中采用葡萄糖代替标准品,测定样品多糖的相对含量。滴定法主要是采用 Fehling 还原滴定法,此法是多糖水解成还原性的单糖后,以次甲
14、基兰作指示剂,用标定过的碱性酒石酸酮溶液直接进行还原滴定,根据样液消耗的体积计算其含量。本法快速简便,不需精密仪器,对所有多糖均适用近年来,高效液相色谱法越来越多地用于测量植物中的多糖。它分析速度快,可以直接进样,不必制备成衍生物,而且有较高的分辨率。此外还有气相色谱法(GC)、薄层扫描法(TLCS)、高效毛细管电泳法(HPCE)等,可根据药材所含多糖及其化学成分的性质进行选择。用高效液相色谱法(HPIC)分析芦荟多糖方法简单,一般在常温下操作,经色谱柱分离的组分可收集,进一步与质谱、红外光谱、核磁共振等仪器联用进行分析鉴定。为了提高灵敏度,也可采用衍生化的方法将样品组分制备成具有紫外吸收或能
15、发出荧光的衍生物,用紫外检测器、二极管阵列检测器或荧光检测器进行检测,虽然样品制备操作复杂,但分析灵敏度可大大提高。用高效液相色谱法测定芦荟凝胶样品,可得到一个“E”峰(排序第五而得名),已鉴别为 L 一苹果酸,是芦荟中的一种有机酸。孙达远等人用高效液相色谱法对芦荟冷冻粉中多糖和甙进行测定,并应用高速逆流色谱对 100:1 全叶芦荟冷冻干燥粉进行分离,一次分离出芦荟多糖和纯度为w=97.93%的芦荟甙,再应用液相制备柱将芦荟多糖进行高效分离,从而达到定量测定芦荟多糖的目的。除此之外,还可用高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量大小。用反相色谱法分离肽聚糖及某些寡糖,并用寡糖的部分降解法测定寡糖分子结
16、构中单糖的排列顺序。用氨旅烷柱液相色谱法分离硫酸软骨素、硫酸皮肤索、硫酸肝素的酶水解产物中还原性不饱和二糖物质。用高效离子效换色潜法分离寡糖的硫酸、唾液酸和糟醛酸衍生物等。李静等还报道用水溶性凝胶渗透色谱测定芸芝多糖各组分的分子量及相对含量。HPLC 对多糖的分离纯化、组成分析(定量分析、分广量的测定等作出很大贡献,大大推动了多糖研究的进展。总之,植物多糖的合理运用,将给人类的发展和疾病控制带来巨大的益处,植物多糖就像一座宝库,等着人类的开发利用。PolysaccharidePolysaccharide, also called plant polysaccharides, plant cell metabolism is the degree of polymerization more than 10 chitosan.Is made up of many of the same or different monosaccharide by alpha or beta a glycosidic bond of compounds, ar