玉米产量性状QTL定位与株型性状相关基因克隆

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1、目录 摘要1第一章文献综述31 玉米产量及株型相关性状研究意义:31 1 玉米产量相关性状研究意义41 2 玉米株型相关性状研究意义42 玉米产量相关性状的研究进展52 1 玉米产量相关性状经典遗传学研究52 2 玉米产量相关性状Q T L 定位研究63 分子标记技术在植物研究中的应用63 1 遗传标记的发展63 1 1 形态标记73 L2 细胞学标记73 1 3 蛋白质标记73 1 4D N A 标记83 2 分子标记技术在植物遗传育种中的应用1 03 2 1 分子遗传图谱的发展1 03 2 2 品种D N A 指纹鉴定与遗传多样性1 13 2 3 农艺性状相关基因的定位1 l3 2 4 分

2、子标记辅助选择育种1 14Q T L 定位原理与方法及研究概况1 24 1 作图群体1 24 Ll 初级作图群体1 24 1 2 次级作图群体1 34 1 3 高级作图群体1 44 2Q T L 定位的方法1 54 2 1 单区间作图法1 54 2 2 复合区间作图法1 64 2 3 多区间作图法1 64 2 4 基于混合线性模型的复合区间作图法1 7I4 2 5 条件Q T L 分析和Q T L 的动态定位1 74 2 6 上位性及与环境互作分析1 84 2 7Q T L 精细定位1 94 2 8Q T L 的克隆1 9厂 5 玉米株型相关性状经典遗传学研究进展2 06 玉米株型相关性状Q

3、T L 定位研究进展一2 l7 植物株型建成相关途径及其作用基因的研究进展2 27 1 生长素( I 从) 生物合成调控植物株型建成研究概况2 37 2 赤霉素( G A ) 生物合成调控植物株型建成研究概况2 47 3 油菜素内酯( B R ) 生物合成调控植物株型建成研究概况2 58 植物基因克隆技术的研究进展2 58 1 功能克隆2 68 2 表型克隆2 68 2 1 差异筛选法2 68 2 2m R N A 差异显示技术2 78 2 3 抑制性缩减杂交技术2 78 3 图位克隆2 88 4 转座子标签和T - D N A 插入标签技术2 88 5 同源性克隆技术2 88 6 电子克隆2

4、 99 实时荧光定量P C R 技术2 91 0 亚细胞定位研究3 0l l 植物转基因方法研究概况3 11 1 1 农杆菌介导法3 11 1 2 基因枪法一3 21 1 3 花粉管通道法3 21 2 本研究的目的和意义3 3第二章玉米产量相关性状的Q T L 定位3 4引言3 41 材料与方法3 5I I1 1 试验材料及田间试验设计3 51 1 i 供试材料3 51 1 2 田间试验设计3 51 2 性状调查3 51 3 统计分析3 61 3 。1 描述性统计分析3 61 3 2 方差分析、相关分析与遗传力分析3 61 4 基因型分析及分子标记遗传连锁图谱构建3 61 4 1D N A 提

5、取和与纯化3 61 4 2S S R 分析3 71 4 3 遗传连锁图谱的构建3 81 5Q T L 定位及效应分析3 82 结果与分析3 92 1 双亲、F 。及F 2 :。家系表型分析3 92 2 产量相关性状的遗传力及相关分析4 02 3F 2 :。家系遗传连锁图谱的构建4 i2 4 玉米产量相关性状Q T L 及其效应分析4 33 结论与讨论4 63 1O T L 定位的准确性4 63 2Q T L 定位的一致性4 73 3 调控出籽率、籽深、百粒重的重要区域4 73 4 结论4 8第三章玉米株型性状相关基因Z m L I C 的克隆及功能分析4 9引言4 91 材料与方法5 01 1

6、 试验材料5 01 2 田间试验5 01 3 试剂、仪器及相关软件5 01 4 实验方法5 l1 4 1 总R N A 的提取与纯化5 lT I I1 4 2c D N A 第一链的合成5 lI 4 3 玉米Z m L I C 基因片段的克隆5 21 4 4 分析测序结果5 31 4 5 染色体定位初步分析5 31 4 6 荧光定量P C R 引物的设计5 41 4 7 标准品的制备和标准曲线的建立5 41 4 8 样品检测与数据处理5 41 4 9 亚细胞定位实验方法5 41 4 1 0 拟南芥过量表达实验6 02 结果与分析6 22 1R N A 提取、纯化、第一链合成及检测6 22 2

7、玉米Z m L I C 基因序列分析6 32 2 1 玉米Z m L I C 基因P C R 扩增6 32 2 2 豫8 2 和沈1 3 7Z m L I C 基因c D N A 序列比较分析6 32 2 3 基因Z 砒形开放阅读框及氨基酸序列分析6 52 3 基因Z m L I C 染色体初步定位6 72 4 基因表达标准曲线的建立6 82 4 1R N A 提取、纯化、第一链合成及检测6 82 4 2 荧光定量P C R 引物的优化和确定6 82 4 3 标准曲线鉴定6 82 4 2 标准曲线建立6 82 5 基因Z m L I C 实时荧光定量表达分析7 02 5 1 基因Z m L I

8、 C 在豫8 2 中m R N A 转录水平表达分析7 02 5 2 基因Z m L I C 在沈1 3 7 中m R N A 转录水平表达分析7 02 5 3 基因Z m L I C 在豫8 2 、沈1 3 7 不同器官中m R N A 转录水平表达分析7 l2 6 融合表达载体的构建7 22 7 洋葱表皮瞬时表达结果7 52 8 植物超表达载体的构建。7 52 9 重组质粒1 3 9 卜砒乃的农杆菌转化结果7 82 1 0 转基因拟南芥实验结果7 8l V2 1 0 1 转基因植株筛选7 83 结论与讨论7 93 1 玉米Z m L I C 基因是O s L I C 基因的同源基因7 93 2 玉米Z m L I C 基因的染色体初步定位一7 93 3 基因Z m L I C 时空表达分析8 03 4 玉米Z m L I C 基因具有质、核定位功能8 03 5 玉米Z m L I C 基因的功能预测及下一步研究8 0第四章玉米株型性状相关基因Z m D w a r f 2 的克隆及功能分析8 2引言8 2l 材料与方法8 31 1 试验材料8 31 2 田间试验8 31 3 试剂、仪器及相应软件8 31 4 试验方法8 31 4 1 总R N A 的提取与纯化一8 31 4 2c D N A 第一链的合成8 31 4 3 玉米Z m D

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