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1、名词解释:名词解释: 1.酶工程酶工程:利用酶的催化作用在一定的生物反应器中,将相应的原料转化成所需的产品的 生物技术。 2.酶活力酶活力:在一定条件下,酶所催化的反应初速度。在外界条件相同的情况下,反应速度 越大,意味着酶活力越高。 3.酶酶:是具有生物催化功能的生物大分子,按照其化学组成,可以分为蛋白类酶(P 酶) 和核酸类酶(R 酶) 。 固体培养发酵、液体培养发酵、固定化细胞发酵、固定化原生质发酵 4.抗体酶抗体酶:是由抗原诱导产生的能与抗原特异结合的具有催化功能的抗体分子。 5.酶生物合成的反馈阻遏酶生物合成的反馈阻遏:指酶催化的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到 阻遏的现
2、象。 6:酶发酵动力学酶发酵动力学:研究细胞生长和发酵产酶的动力学。 7.固定化细胞固定化细胞:采用各种方法固定在载体上,在一定的空间范围进行生长、繁殖和新陈代 谢的细胞。 8.诱导物诱导物:酶的作用底物、酶的反应产物、酶作用底物的类似物 9 膜分离技术膜分离技术:借助于一定孔径的高分子薄膜,将不同大小、不同形状和不同特性的物质 颗粒或分子进行分离的技术。 1*.超临界萃取超临界萃取:是利用欲分离物质与杂质在超临界流体中的溶解不同而达到分离的一种萃 取技术. 11.反胶束萃取反胶束萃取:是利用反胶束将酶或其他蛋白质从混合液中萃取出来的一种分离技术。 12.盐溶盐溶:一般在低盐溶度的情况下,蛋白
3、质的溶解度随盐溶度的升高而增加的现象。 13. .酶分子修饰酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功 能的技术过程。 14. .固定化酶固定化酶:指固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶. 15.传感器传感器:由固定化酶与能量转换器密切结合而成的传感器装置。 16.酶电极酶电极:固定化酶与各种电极密切结合的传感装置 38.酶的非水相催化:酶在非水介质 中进行的催化作用。非水相介质包括:有机溶剂介质、超临界流体介质、气相介质、离子 液介质。 17.酶在有机介质中的特性有哪些酶在有机介质中的特性有哪些:1 底物选择性 2 立体选择性 3 位置选择性和化
4、学选择性 4 其他特性。问答: 1.核酸类酶(R 酶)的分类: 1 酶催化反反应的类型:剪切酶。剪接酶。多功能酶 2 酶的结构特点:锤头型 R 酶。发夹型 R 酶。含 I 型 IVs 的 R 酶;3 酶催化的底物不同:分 子内催化的 R 酶。分子间 3.催化的 R 酶: 2.终酶反应的方法:加热。加酶変性剂(三氯醋酸) 。加酸碱。降至 10C 以下终止反应. 3.酶的生产方法: 生物合成法、提取分离法、化学合成法 4.产酶微生物具备的条件: 1 产量高 2 产酶稳定 3 易培养管理 4 利于分离纯化 5 安全、无毒 5.微生物发酵产酶的培养方式: 6.超临界流体的选定 作为萃取剂的超临界流体必
5、须具备以下条件: 萃取剂需具有化学稳定性,对设备没有腐蚀性; 临界温度不能太低或太高,最好在室温附近或操作温度附近; 操作温度应低于被萃 取溶质的分解温度或变质温度 临界压力不能太高,可节约压缩动力; 选择性要好, 容易得到高纯度制品; 溶解度要高,可以减少溶剂的循环量; 萃取剂要容易获取, 价格要便宜; 萃取剂必须对人体没有任何毒性。 (在医药、食品上使用) 7:发酵工艺条件及其控制 a 细胞的活化与扩大培养 b 培养基的配制 cpH 值的调节与控制 d 温度的调节与控制 e 溶解 氧的调节控制 f 提高酶产量的方法 8:调节溶解氧的方法主要有a 调节通气量 b 调节氧的分压 c 调节气液接
6、触时间 d 调节气液接触面积 e 改变培养液的性 质 9.固定化细胞发酵产酶的特点(生产胞外酶时) a 产酶率高 b 可在高稀释率条件下连续发酵 c 稳定性好 d 可以反复使用或连续使用较长时 间 e 工程菌的质粒不易丢失,质粒的结构稳定性和分裂稳定性都显著提高 f 产品易分离纯 化,纯度和质量提高。 10.提高酶产量的措施 a 添加诱导物 b 控制阻遏的浓度 c 添加活性剂 d 添加产酶促进剂 11.细胞破碎的方法:机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法、酶促破碎法。 12.提取酶时的主要因素:1)温度 2)PH 值 3)提取液体积 4)保护剂 13.酶分离纯化的原则:1 酶的分离提纯包括三个基
7、本环节(1 抽提 2 纯化 3 制剂)2 注意 防止酶的变形失活 3 在不破坏所需酶的条件下,可使用各种“激烈”的手段 3 检测酶活性, 跟踪酶的来龙去脉,为选择适当方法和条件提供直接依据。 14.膜分离技术可分为三类:1 加压膜分离 2 电场膜分离 3 扩散.膜分离膜分离技术:借助 于一定孔径的高分子薄膜,将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离 的技术。 15 超临界萃取:是利用欲分离物质与杂质在超临界流体中的溶解不同而达到分离的一种萃 取技术. 超临界萃取的分离工艺:等压分离、等温分离、吸附分离。 16.亲和层析的方式:1 共价亲和层析 2 疏水层析 3 金属离子亲和层析
8、4 免疫亲和层析 5 染 料亲和层析 6 凝集素亲和层析 17.酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功 能的技术过程。 18.酶分子修饰的目的:提高酶的活力增强酶的稳定性降低或消除酶的抗原性。同时通过酶 的修饰研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空 间构象的影响。酶分子修饰的主要方式:金属离子置换修饰、大分子结合修饰、侧链基团 修饰、肽链有限水解修饰、氨基酸置换修饰、酶分子的物理修饰。19 固定化酶的目的:增加酶的稳定性、提高酶的利用效率、简化下游分离技术。方法: 吸附法、包埋法、结合法、交联法和热处理法等。 20.有机相
9、催化的特性:1 有储存稳定性比在水中有明显提高 3 可催化不能在水相发生的反 应 4 酶分子构象表现出比在水溶液中更有刚性的特点,因而可以通过选择不同性质的溶剂 来调控酶的某些选择性 5 产物的分离与纯化比在水中容易另外酶不溶于有机溶剂因此有利 于酶的回收与再利用等。 21 酶反应器的分类与特点:1 搅拌罐式反应器(设备简单,操作容易,反应比较完全,反 应条件容易调节控制)2 填充床式反应器(比较普遍设备简单,操作方便,密度大,可以提高酶催化反应的速率)3 流化床式反应器(混合均匀传质和传热效果好,温度和 pH 的调 节控制比较简单,不容易堵塞)4 鼓泡式反应器(结构简单,操作容易,剪切力小,
10、混合 效果好,传质和传热效率高)5 膜反应器(结果紧凑,利于连续化生产,清洗比较困难)6 喷射式反应器(体积小,混合均匀,催化反应速度快) 22 膜反应器:将酶催化反应与半透膜的分离作用组合在一起而成的反应器。 23.酶反应器的选型:1 根据酶的应用形式选择 2 根据酶反应动力学性质选择 3 根据底物或 产物的理化性质选择 4 根据酶催化反应的多样性选择 5 根据生产的实际要求选择 24 酶的转换数与催化周期:Kp=底物转变的摩尔数/(酶摩尔数 *分钟)=酶活力(IU)/酶微摩尔数 6.固定化酶: 酶结合效率=总酶活力-未结合的酶活力/总酶活力*100% 酶活力回收=固定化酶总活力/用于固定化的总酶活*100%