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1、1湖湖 北北 民民 族族 学学 院院毕业论文（设计）开题报告书学生姓名： 专 业： 生物工程 班 级： 班 论文题目： 杨树MYB-TFPtrDDRF1亚细胞定位分析 指导教师： 2填表日期： 年 月 日注：本表可复印，可另加附页，正文宋体小 4 号1、论文选题的目的和意义论文选题的目的和意义杨树是具有重要生态效应的林木树种，其基因组学研究正在广受关注。杨树 成为研究林木生理和利用基因工程方法进行遗传改良的理想模式植物是因为它 生长迅速、木材产量高经济潜力很大、基因转化效率高且基因组较小。转基因 杨树培育的方法常用的有三种：根癌农杆菌介导法、基因枪法和 PEG 法i。杨 树繁殖能力极强，很容易
2、进行离体培养和实验研究、营养繁殖也很容易，可以 产生大量的克隆，杨树组织培养技术与再生体系现阶段都已经十分成熟；杨树 分布范围广泛，是当今世界上温带地区栽培最为广泛的经济林树种之一，实用 性强有较高经济价值，可用于人工造林、防风固沙、荒漠化治理、保持水土、 木材加工。2、国内外关于该论题的研究现状和发展趋势国内外关于该论题的研究现状和发展趋势杨树的研究起步很晚，但进步较快，取得了一些可喜成绩，1980 年才真正地利用植物基因工程技术、植物细胞工程、分子生物学和细胞生物学对杨树进行抗性育种的研究。林木基因工程的发展可以追溯到 1986 年 parson 等人发现杨树可以进行遗传转化以及外源基因在
3、高等植物细胞中的表达ii。因此我选择杨树作为我的毕业论文的研究材料。3、论文的主攻方向、主要内容、研究方法及技术路论文的主攻方向、主要内容、研究方法及技术路将分离到一个具有和抗逆响应的 MYB 转录因子，命名为 PtrDDR F1.，通过构建质粒将杨树 MYB-TF PtrDDRF1 基因和编码 GFP 绿色荧光蛋白的基因融合在一起，酶切鉴定分析，重组子克隆正确。将重组质粒 pDG-DDRF1 转入到土壤农杆菌（Agrobacte riumtume faciens）EHA105 细胞, 利用农杆菌介导的转3化方法对洋葱表皮细胞进行侵染，然后在荧光显微镜下观察 GFP 荧光信号。观察结果，目的基
4、因定位于的哪个位置。四、论文工作进度安排四、论文工作进度安排1、2015 年 2 月 1 日，查阅相关资料，确定论文的题目以及实验方案；2、2015 年 2 月 5 日，开始实验，将质粒转入大肠杆菌3、2015 年 3 月 5 日 pDG-DDRF1 质粒的提取4、2015 年 3 月 25 日 pDG-DDRF1 质粒的琼脂糖凝胶电泳检测5、2015 年 4 月 5 日将质粒转入土壤农杆菌6、2015 年 4 月 20 日通过土壤农杆菌将质粒转入到洋葱表皮细胞7、2015 年 4 月 30 日在荧光显微镜下观察9、2015 年 5 月 1 日，整理实验数据；10、2015 年 5 月 10
5、日，撰写毕业论文。 五、论文主要参考文献五、论文主要参考文献1 刘媛媛;张春庆;吴承来;LeJA2 基因沉默表达载体导入番茄转化系统的建立J;山东农业科学;20102 邢浩然,刘丽娟,刘国振.植物蛋白质的亚细胞定位研究进展J.华北农学报,2006,S2:1-6.3 张树波,赖剑煌.蛋白质亚细胞定位预测的机器学习方法J.计算机科学,2009,04:29-49.54 李立奇,万瑛.蛋白质的亚细胞定位预测研究进展J.免疫学杂志,2009,05:602-604.5 张松,黄波,夏学峰,孙之荣.蛋白质亚细胞定位的生物信息学研究J.生物化学与生物物理进展,2007,06:573-579.6 杨光,曹雪,房
6、经贵,黄振喜,陶建敏,王晨.葡萄花发育基因的亚细胞定位和表达分析J.中国农业科学,2011,03:641-650.7 宋毓峰,董连红,靳义荣,史素娟,张良,刘朝科,冯祥国,胡晓明,王倩,刘好宝.林烟草 KUP/HAK/KT 钾转运体基因 NsHAK11 的亚细胞定位与表达J;安徽农学报;2003 年 04 期8 赵文婷,魏建和,孟冬,刘晓东,高志晖.3 种瞬时表达体系研究 1 个白木香倍半萜合酶的亚细胞定位J.中草药,2013,23:3379-3385.9 陈婷婷,杨青川,丁旺,康俊梅,张铁军,张新全.紫花苜蓿 WRKY 转录因子基因的克隆与亚细胞定位J.草业学报,2012,04:159-16
7、7.10 赵丽,夏文强,蔡新忠.拟南芥 AGO2 的亚细胞定位分析J.浙江大学学报(农业与生命科学版),2013,01:1-10.11 袁维风;徐凯;徐德聪;钱玉梅;葡萄种质资源的 RAPD 分析J;安徽农业科学;2006 年12 廉利,车代弟,李静,杨明凯;花色基因工程研究进展J;北方园艺;2004 年 04期魏国芹;戴洪义;孙玉刚;梁美霞;安淼;榅桲离体培养繁殖的研究J;山东农业科学;2010 年 1 期13 刘媛媛;张春庆;吴承来;LeJA2 基因沉默表达载体导入番茄转化系统的建立J;山东农业科学;2010 年 02 期614 张宝琼;范眸天;屈云慧;于丽霞;李涵;利用卡那霉素筛选非洲菊转基因植株的技术研J究;安徽农学通报(上半月刊);2009 年 03 期15 夏珣;闫明旭;李名扬;眭顺照;Metallothionein 克隆载体及表达载体的构建及转化矮牵牛的初步研究;安徽农学通报(上半月刊);2009 年 07 期六、指导教师意见六、指导教师意见教师签名：教师签名：年年 月月 日日 1
