《保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性国标测定方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性国标测定方法（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、国家标准以修改Marklund 方法和化学发光法测定食品中SOD 活性。前者SOD 最低的检测浓度为 1.17U/mL ，相当于 1.1*10-8mol/L ，方法灵敏，仪器廉价，易于推广；后者SOD 活性测定最低检出浓度为0.033U/mL, 灵敏度比前者提高约两个数量级。具有更加灵敏、快速和干扰少等优点，但是试剂比较贵。第一法修改的 Marklund 方法（一）定义： 25时抑制邻苯三酚紫阳花速率50%时所需要的SOD 量为一个活力单位。（二）原理：在碱性条件下，邻苯三酚会发生自氧化，可以根据SOD 抑制邻苯三酚自氧化能力测定SOD 活力。（ 三） A液： pH 8.20 0.1mol/L
2、三 羟 甲基 氨基甲烷（ Tris ）盐 酸缓冲溶液（内含1mol/LEDTA-Na2） 。称取 1.2114g Tris 和 37.2mgEDTA-Na2溶于 62.4mL0.1mol/LHCl溶液中，用蒸馏水定容至100mL. B 液： 4. 5 mmol/I. 邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚(A.R)56.7 mg 溶于少量10 mmol/I. 盐酸溶液，并定容至10D mL 。10mmol/L 盐酸溶液；0.200mg/mL 超氧化物歧化酶；蒸馏水；二重石英蒸馏水。（四）仪器设备紫外 -可见分光光度计；精密酸度计（精确度0.01pH）;离心机； 10mL 比色管； 10mL 离心管；玻
3、璃乳钵。（五）试样的制备1、固体样品 (茶、花粉等 )称取 1.00 g 样品置于玻璃乳钵中，加入 9. 0 mI.蒸馏水研磨5 min, 移入 10mL 离心管。 用少量蒸馏水冲洗乳钵，洗涤并入离心管中，加蒸馏水至刻度，经 4000 r/min 离心 15min，取上清液测定。2、澄清液体样品可取原液直接测定，浑浊液体样品经4000r/min 离心 15min, 再取上清液测定。（六）分析步骤1、邻苯三酚自氧化速率测定再 25左右，于10mL 比色管中依次加入A 液 2.35mL,蒸馏水 2.00 mL, B 液 0.15 mL。加入 B 液立即混合并倾人比色皿，分别测定在325 nm 波长条件下初始时和1 min 后吸光值，二者之差即邻苯三酚自氧化速率?A325（min-1） 。本试验确定?A325（min-1）为 0.060 。2、 样液和 SOD 酶液抑制邻苯三酚自氧化速率测定按1.步骤分别加人一定量样液或酶液使抑制邻苯三酚自氧化速率约为1/2?A325（min-1）即 ?A 325（ min-1）为 0.030 SOD 活性测定加样程序见表1 。（七）结果1、结果计算液体样品按式(1)计算：2、固体样品按式（2）计算：2、精密度 再重复性条件下的两次测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
