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1、 锰生物氧化论文：锰氧化蛋白的研究锰生物氧化论文：锰氧化蛋白的研究【中文摘要】生物除锰是通过锰氧化菌的生物氧化作用完成的。因此生物滤池中的锰氧化细菌在生物除锰工艺中起着至关重要的作用。本课题研究内容包括对生物除锰滤池中的细菌进行分离纯化鉴定,并用定性和定量分析法筛选出锰氧化优势菌株;对锰氧化能力较强的菌株进行锰氧化酶影响因素的研究以及锰细菌酶分离纯化的研究。通过对生物除锰滤池中的细菌进行分离纯化,得到的 284 株细菌分属 26 个属,共 53 种,其中假单胞菌属的种数最多。利用 LBB 指示剂法对 59 种细菌进行定性检测得出:具有锰氧化活性的菌株分属 6个属、14 个种;通过定量检测的方法
2、对具有锰氧化能力的 10 株细菌进行优势菌株的筛选得出 5 种有较强锰氧化能力的菌株,选假单胞菌属 Mn-Fe-118 作为后续试验研究的对象。对优势菌株 Mn-Fe-118 进行生理特性、锰氧化酶活的影响因素方面的试验研究结果表明:随着培养时间的增加,菌液的 OD600 值先增后减,而 pH 值一直增长最后趋于稳定;铁、锰、铜、钙四种金属在一定的浓度范围内对锰氧化酶活都有一定的促进作用,可一旦超出这个范围酶的活性就会下降甚至会失活,其中铁离子是影响锰酶活的最主要的因素,其次是锰离子和铜离子,影响最小的是钙离子。.【英文摘要】Manganese was removed through the
3、bio-oxidation of manganese-oxidizing bacteria in Mn biological-removal. Therefore, manganese-oxidizing bacteria in the bio-filter played a central role in the process of manganese biological removal. The contents about this research had included: isolation and identification of the bacteria in the m
4、anganese removal bio-filter, qualitative and quantitative detection screening the manganese bio-oxidation predominant strains; choosing one strain which has the most strong bio-o.【关键词】锰生物氧化 锰氧化细菌 锰氧化酶【英文关键词】manganese bio-oxidation manganese-oxidizing bacteria manganese oxidase【目录】锰氧化蛋白的研究 摘要 4-5 Abs
5、tract 5 第 1 章 绪论 10-20 1.1 研究背景 10-12 1.1.1 地下水中的锰污染 10-11 1.1.2 地下水除锰技术的发展 11-12 1.2 锰氧化酶的研究现状 12-16 1.2.1 锰氧化微生物的分类 12 1.2.2 锰氧化酶的种类 12-13 1.2.3 锰氧化酶的分子生物学研究 13-15 1.2.4 锰氧化酶活性的影响因素 15-16 1.2.5 锰氧化酶的氧化产物 16 1.3 课题提出、研究意义及主要内容 16-20 1.3.1 课题提出 16-17 1.3.2 研究意义 17 1.3.3 主要研究内容 17-20 第 2 章 锰氧化细菌的分离、鉴
6、定和保存 20-28 2.1 锰氧化细菌的分离、纯化 20-21 2.1.1 种源采集 20 2.1.2 材料和方法 20-21 2.1.3 结果与分析 21 2.2 锰氧化细菌的鉴定 21-26 2.2.1 微生物学常用的细菌鉴定方法 21-22 2.2.2 试验仪器与材料 22-23 2.2.3 鉴定方法 23-24 2.2.4 鉴定结果与分析 24-26 2.3 细菌的保存 26-27 2.4 本章小结 27-28 第 3 章 锰氧化优势菌株的筛选 28-34 3.1 前言 28 3.2 试验材料和方法 28-30 3.2.1 试验材料 28 3.2.2 试验方法 28-30 3.3 试
7、验内容 30 3.3.1 定性检测的步骤 30 3.3.2 定量检测的步骤 30 3.4 试验结果和分析 30-32 3.4.1 定性检测的结果与分析 30-31 3.4.2 定量检测的结果与分析 31-32 3.5 本章小结 32-34 第 4 章 锰氧化酶影响因素的研究 34-44 4.1 试验材料和方法 34 4.1.1 试验材料 34 4.1.2 试验菌株的选择 34 4.2 试验材料和方法 34 4.2.1 细菌浓度的检测方法 34 4.2.2 锰氧化酶活性的检测方法 34 4.3 试验内容 34-36 4.3.1 Mn-Fe-118 生长特性曲线的测定 34-35 4.3.2 粗酶
8、的获取 35 4.3.3 温度对锰氧化酶活性的影响 35 4.3.4 pH 对锰氧化酶活性的影响 35 4.3.5 Mn(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 35 4.3.6 Fe(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 35 4.3.7 Cu(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 35 4.3.8 Ca(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 35-36 4.3.9 正交试验 36 4.4 试验结果与分析 36-42 4.4.1 Mn-Fe-118 生长特性曲线 36-37 4.4.2 温度对锰氧化酶活性的影响 37-38 4.4.3 pH 对锰氧化酶活性的影响 38 4.4.4 Mn(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响
9、 38-39 4.4.5 Fe(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 39-40 4.4.6 Cu(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 40 4.4.7 Ca(2+)浓度对锰氧化酶活性的影响 40-41 4.4.8 正交试验 41-42 4.5 本章小结 42-44 第5 章 锰氧化酶的分离纯化 44-50 5.1 试验材料与方法 44-45 5.1.1 试验药品和仪器 44 5.1.2 锰氧化酶活性的检测方法 44-45 5.1.3 锰氧化酶的提取方法 45 5.1.4 锰氧化酶的分离纯化方法 45 5.1.5 SDS-PAGE 电泳 45 5.2 试验内容 45-46 5.2.1 锰氧化酶的提取 45-46 5.2.2 盐析范围的确定 46 5.2.3 SDS-PAGE 电泳 46 5.3 试验结果 46-48 5.3.1 盐析范围的确定 46-47 5.3.2 SDS-PAGE 电泳 47-48 5.4 本章小结 48-50 结论 50-52 参考文献 52-58 攻读硕士学位期间的主要成果 58-60 致谢 60
