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1、医学微生物学实验考核试卷姓名： 学号： 学院： 班级： 。一、培养物及镜下形态观察（ 二、油镜使用（ 三、操作（ 2分）1、 写出细菌形态、染色 1、细菌接种2、 排列方式 2、染色3、 . 3、倍比稀释4、 . 5、 镜下观（图片）：选 3 实物（选 2）： 1、三种葡萄球菌色素 2 、血平板 ： 、 溶血 3、 双糖铁 4、动力实验 5 、生化反应 油镜使用（必考）：写出细菌形态、染色、排列方式 操作（选 1）： 1、细菌接种：分区划线、液体、斜面、半固体2、革兰 染色 /抗酸染色3、倍比稀释镜下观（图片）：选 3肠杆菌G+ 葡萄球菌镜下观（图片）：选 3白色念珠菌 钩端螺旋体镜下观（图片
2、）：选 3鞭毛 肺炎球菌荚膜镜下观（图片）：选 3结核杆菌 枯草芽孢杆菌镜下观（图片）：选 3链球菌 破伤风杆菌芽孢镜下观（图片）：选 3金黄色，白色，柠檬色葡萄球菌实物（选 2）三种葡萄球菌色素不完全溶血 完全溶血实物（选 2）血平板 ： 、 溶血肠道致病菌 肠道非致病菌（半乳糖分解变红）实物（选 2） 双糖铁实物（选 2） 双糖铁上 红下黄为肠道致病菌，另一种全黄的为非致病菌以观察细菌的动力及对葡萄糖的分解能力；上层为含有乳糖的亚铁固体斜面培养基，主要观察细菌对乳糖的分解能力及是否产生硫化氢。培养基的上层和下层的指示剂均为酚磺酞，遇碱变红色，遇酸变黄色。若细菌分解双糖而产酸产气，则培养基均
3、呈黄色，且有气泡产生。细菌产生硫化氢时，遇硫酸亚铁，生成黑色硫化亚铁。固体斜面（含乳糖）半固体（含葡萄糖）实物（选 2）动力实验左侧为无鞭毛，右侧有鞭毛生化反应实物（选 2）三种糖黄色硫化氢黑色尿素红色“黄黑红”为阳性注：只有第二个有红的为阳性葡萄球菌：球形，革兰染色阳性（紫色），葡萄状排列大肠杆菌：柱状，革兰染色阴性（红色），不规则排列油镜使用（必考）：写出细菌形态、染色、排列方式1区4区3区2区烧接种环烧接种环烧接种环平板分区划线接种目的：分离细菌实验方法：1区接种2区接种3区接种4区接种标记，37 ， 24h。液体接种目的：增殖细菌实验方法：1、接种环烧灼灭菌，取菌；2、培养管去塞，倾斜
4、；3、接种环在上液面靠近管壁处研磨；4、塞上塞子，标记， 37 培养 24h。目的：增殖细菌和保存细菌斜面接种实验结果：均匀一致的菌苔实验方法：1、接种环烧灼灭菌，取菌；2、培养管去塞，倾斜；3、接种环从斜面底部向上划直线；4、围绕直线从下向上划蛇形曲线；5、塞上塞子，标记， 37 培养 24h。目的：鉴定细菌有无鞭毛（动力实验）半固体接种实验结果：动力实验阳性（向穿刺线外扩散）动力实验阴性（仅沿穿刺线生长）实验方法：1、接种针烧灼灭菌，取菌；2、培养管去塞；3、接种针从培养基表面中央垂直插入，离管底 1、接种针原路返回；5、塞上塞子，标记， 37 培养 24h。4、半固体穿刺：接种针、大 /
5、痢 二选一 （单、双组）垂直刺入培养基、沿原路返回革兰染色法 实验方法1、制片（涂片，干燥，固定）2、初染（革兰 液 1 洗） 结晶紫3、媒染（革兰 液 1 洗） 卢戈碘液4、脱色（革兰 液 30s ， 2次，水洗）95%酒精5、复染（革兰 液 30 s，水洗） 稀释石炭酸复红6、滤纸吸干玻片水分7、镜检（油镜）方法1. 制片， 干燥，固定。2. 初染 :石碳酸复红覆盖 标本，加热 5 (注 :至蒸汽产生 , 勿煮沸 , 及时添加染料 )冷却后细水流冲洗。3. 脱色 : 3% 盐酸酒精 30 s(15 细水流冲洗。4. 复染：碱性美蓝 1水流冲洗。5. 吸水纸吸干，油镜镜检。抗酸染色使用滴管加样操作（选 1）倍比稀释
