分子生物复习宝典

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1、分子生物学葵花宝典分子生物学葵花宝典编者按:以下内容几乎包含了分子生物学的所有重点,但肯定要大于考试范围,望各位同学在周四课结编者按:以下内容几乎包含了分子生物学的所有重点,但肯定要大于考试范围,望各位同学在周四课结 束后,根据老师的重点复习。束后,根据老师的重点复习。 1、基因:能够表达和产生蛋白质和 RNA 的 DNA 序列,是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组 DNA 末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段 DNA 序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子:是指

2、数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动 子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的 RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异 DNA 序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活 性的蛋白质因子。在反式作用因子中,可直接或间接结合 RNA 聚合酶的,称为转录因子。 转录调节因子结构转录调节因子结构 TF DNA 结合域结合域酸性活域酸性活域 转录

3、激活域转录激活域脯氨酸富含域脯氨酸富含域谷氨酰胺富含域谷氨酰胺富含域 蛋白质蛋白质-蛋白质结合域蛋白质结合域(二聚化结构域)(二聚化结构域) 7、启动子:是 RNA 聚合酶特异性识别和结合的 DNA 序列。 8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊 DNA 序列。它可位于 被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的 蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称

4、为细 胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。 11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的 特殊蛋白质。 12、分子克隆:在体外对 DNA 分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其 在宿主中扩增和繁殖,以获得该 DNA 分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对 应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 1

5、5、基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。 16、 载体:能在连接酶的作用下和外源 DNA 片段连接并运送 DNA 分子进入受体细胞的 DNA 分子。 17、转化:指质粒 DNA 或以它为载体构建的重组 DNA 导入细菌的过程。 18、感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组 DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能 力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。 19、转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移 DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒 转移和获得细胞 DNA 的过程。 20、转染:指病毒或以它为载体

6、构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、DNA 变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条 DNA 链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共 价键则不受影响。 22、DNA 复性:当促使变性的因素解除后,两条 DNA 链又可以通过碱基互补配对结合形成 DNA 双螺旋分子生物学葵花宝典分子生物学葵花宝典结构。 23、退火:指将温度降至引物的 TM 值左右或以下,引物与 DNA 摸板互补区域结合形成杂交链。 24、筑巢 PCR:先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段,再用内侧引物以大片段为摸板扩增获取目的 基因。可以提高 PCR 的效率和特异性。 25、原位 PCR:以组织固定处理细胞内的 DNA 或

7、 RNA 作为靶序列,进行 PCR 反应的过程。 26、定量 PCR:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对 mRNA 进行定量测定,对此采用的 PCR 技术就 叫定量 PCR。 27、基因打靶:是指通过 DNA 定点同源重组,改变基因组中的某一特定基因,从而在生物活体内研究此 基因的功能。 28、DNA 芯片:DNA 芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的 DNA 探针以显 微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交,通过对杂交信号的检测分析,即可获 得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为 DNA 芯片。 29、错义突变:DNA 分子中

8、碱基对的取代,使得 mRNA 的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸就 变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。 30、无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变。 31、同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止,有时虽然有碱基被取代,但在蛋白质水 平上没有引起变化,氨基酸没有被取代,这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的 突变。 32、移码突变:在编码序列中,单个碱基、数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变 位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质的突变。 33、

9、癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。当癌基因结构或表达 发生异常时,其产物可使细胞无限制增殖,导致肿瘤的发生。包括病毒癌基因和细胞癌基因。 34、细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长、增殖、 分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结 构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化。 35、病毒癌基因:存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因。它不编码 病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。 36、基因诊

10、断:以 DNA 或 RNA 为诊断材料,通过检查基因的存在、结构缺陷或表达异常,对人体的状 态和疾病作出诊断的方法和过程。 37、RFLP:即限制性片段长度多态性,个体之间 DNA 的核苷酸序列存在差异,称为 DNA 多态性。若因 此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为 RFLP。 38、基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态 为目的治疗方法。 39、反义 RNA:碱基序列正好与有意义的 mRNA 互补的 RNA 称为反义 RNA。可以作为一种调控特定基 因表达的手段。 40、核酶:是一种可以催化 R

11、NA 切割和 RNA 剪接反应的由 RNA 组成的酶,可以作为基因表达和病毒复 制的抑制剂。 41、三链 DNA:当某一 DNA 或 RNA 寡核苷酸与 DNA 高嘌呤区可结合形成三链,能特异地结合在 DNA 的大沟中,并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键。 42、SSCP:单链构象多态性检测是一种基于 DNA 构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链 DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,这样就形成了单链构象多态性。 43、管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因。44、基因表达就是基因的转录及翻译,也包括 RNA 基因的转录。分子生物学葵花

12、宝典分子生物学葵花宝典基因表达的规律性包含时间特异性和空间特异性。 基因表达的方式有组成性表达及可诱导或可阻遏表达。 诱导和阻遏表达:可诱导基因在特定环境中表达增强的过程,称为诱导(induction)。 如果基因对环境信号应答是被抑制,这种基因是可阻遏基因。可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为 阻遏(repression)。 基因表达的调控(control of gene expression)是指对基因组中某一个基因或一些功能相近的基因表达的 开启、关闭和表达强度的直接调节。它是生物在进化过程中逐渐形成的精确而灵敏的生存和应变能力。 原核生物基因表达转录激活调控通常通过操纵子模式实现,并且

13、以负性调节为主。 而真核生物基因表达调控则更复杂,多是通过反式作用因子(转录调节因子)与顺式反应元件(启动子、 增强子、沉默子)的相互作用而实现的,大多数是正性调节。 45、SD 序列:转录出的 mRNA 要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌 16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点。 46、反义核酸技术:是通过合成一种短链且与 DNA 或 RNA 互补的,以 DNA 或 RNA 为目标抑制翻译的 反义分子,干扰目的基因的转录、剪接、转运、翻译等过程的技术。 47、核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的

14、生物大 分子。核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段 DNA 或 RNA 分子。 48、周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达、累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共 同影响细胞周期的运行。 49、CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白,这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子,使细 菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。 50、顺反子(cistron)在反式构型中不能互补的各突变型所占有的那部分 DNA 片断(见互补测验) 。 51、结构域 是指超二级结构在空间上进一步聚集形成的紧密稳定的在蛋白质分子上明显可分的类似球 状的结构。 52、分子生物学(molecular bi

15、ology)是在分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的学 科。 53、医学分子生物学 从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律,从分子水平开 展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。 53、抑癌基因 是指存在于正常细胞内的一大类可抑制细胞生长并具有潜在抑癌作用的基因,当这类基 因在发生突变、缺失或失活时可引起细胞恶性转化而导致肿瘤的发生。 54、基因文库(gene library,gene bank) 利用限制性内切酶将基因组 DNA 切成片段,每一 DNA 片段 都与一个载体分子拼接成重组 DNA。将所有的重组 DNA 分子都引入到宿主细胞并进行扩增,得到分

16、子 克隆的混合体,这样一个混合体称为基因文库。 55、cDNA 文库 将 cDNA 的混合体与载体进行连接,使每一个 cDNA 分子都与一个载体分子拼接成重 组 DNA。将所有的重组 DNA 分子都引入宿主细胞并进行扩增,得到分子克隆的混合体,这样一个混合 体就称为 cDNA 文库。 56、表达载体(expressing vector)是用来在受体细胞中表达(转录和翻译)外源基因的载体。这类载体 除具有克隆载体所具备的性质以外,还带有表达构件转录和翻译所必需的 DNA 序列。 真核细胞病毒做载体;原核细胞质粒、噬菌体做载体 57、重组 DNA 技术 采用载体基因与某目的基因在体外重组的方法克隆 DNA 的技术,称为重组 DNA 技术。过程包括:目的基因的获取、基因载体的选择与构建、目的基因与载体的拼接、重组 DNA 分子 导入受体细胞、筛选并无性繁殖含重组体分子的受体细胞以及阳性克隆的表达。 二、 问答题 (一) 、病毒、原核、真核基因组的特点? 答: 分子生物学葵花宝典分子生物学葵花宝典病毒基因组的结构特点 1、病毒基因组小,结构简单 2、不同病毒基因组可以是不同

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