《蒽和苯并芘单独及联合作用对米氏凯伦藻的生态毒理学效应》由会员分享,可在线阅读,更多相关《蒽和苯并芘单独及联合作用对米氏凯伦藻的生态毒理学效应(64页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、分 类 号 : Q945 学 校 单 位 代 码 : 10446硕士学位论文论文题目:蒽和苯并芘单独及联合作用对米氏凯伦藻的生态毒理学效应研 究 生 姓 名 : 李 香 芝学 科 、 专 业 : 动 物 学研 究 方 向:动物生态与管理学导 师 姓 名 、 职 称 : 王 仁 君 副 教 授论 文 完 成 时 间 : 2013 年 4 月曲 阜 师 范 大 学 2010 级 硕 士 学 位 论 文曲 阜 师 范 大 学 研 究 生 学 位 论 文 原 创 性 说 明(根据学位论文类型相应地在 划 )本人郑重声明:此处所提交的博士 /硕士 论文蒽和苯并芘单独及联合 作 用 对 米 氏 凯 伦 藻
2、 的 生 态 毒 理 学 效 应 , 是 本 人 在 导 师 指 导 下 , 在 曲 阜 师范大学攻读博士 /硕士 学 位 期 间 独 立 进 行 研 究 工 作 所 取 得 的 成 果 。 论 文 中除 注 明 部 分 外 不 包 含 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 的 研 究 成 果 。 对 本 文 的 研 究 工 作 做出 重 要 贡 献 的 个 人 和 集 体 , 均 已 在 文 中 以 明 确 的 方 式 注 明 。 本 声 明 的 法 律 结果将完全由本人承担。作者签名: 日期:曲 阜 师 范 大 学 研 究 生 学 位 论 文 使 用 授 权 书(根据学位论文类型相应地在 划
3、 )蒽和苯并芘单独及联合作用对米氏凯伦藻的生态毒理学效应系本人在曲阜师范大学攻读博士 /硕士 学位期间,在导师指导下完成的博士 /硕士学 位 论 文 。 本 论 文 的 研 究 成 果 归 曲 阜 师 范 大 学 所 有 , 本 论 文 的 研 究 内 容 不得 以 其 他 单 位 的 名 义 发 表 。 本 人 完 全 了 解 曲 阜 师 范 大 学 关 于 保 存 、 使 用 学 位论 文 的 规 定 , 同 意 学 校 保 留 并 向 有 关 部 门 送 交 论 文 的 复 印 件 和 电 子 版 本 , 允许 论 文 被 查 阅 和 借 阅 。 本 人 授 权 曲 阜 师 范 大 学
4、, 可 以 采 用 影 印 或 其 他 复 制 手段保存论文,可以公开发表论文的全部或部分内容。作者签名: 日期:导师签名: 日期:曲 阜 师 范 大 学 2010 级 硕 士 学 位 论 文英 汉 缩 落 语 与 名 词 对 照Bap: benzo()pyrene, 苯 并 ()芘 ;PAHs: polycyclic aromatic hydrocarbons,多环芳烃;SOD: superoxide dismutase, 超 氧 化 物 歧 化 酶 ;POD: peroxidase,过氧化物酶;CAT: catalase,过氧化氢酶;GSH: glutathione oxidase,谷胱甘
5、肽酶;Met: methionine,甲硫氨酸;NBT: Nitrotetrazolium blue chloride , 氯 化硝基四氮唑蓝 ;EDTA-Na: ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt dehydrate,乙二胺四乙酸二钠;TCA: trichloroaceticacid, 三 氯 乙 酸 ;DTNB: 5, 5-dithiobis (2-nitrobenzoic acid), 5,5-二 硫 对 二 硝 基 苯 甲 酸 ;I曲 阜 师 范 大 学 2010 级 硕 士 学 位 论 文摘 要多 环 芳 烃 (polycycl
6、ic aromatic hydrocarbons ,PAHs)是海洋中普遍存在重要环境污染物质 , 是 石 油 的 主 要 成 分 , 具 有 强 致 癌 。 随 着 近 年 来 越 来 越 多 的 石 油 泄 漏 事 件 的 发 生 ,PAHs的污染现象越来越引起了人们的高度重视,P AHs 的 污 染 势 必 影 响 到 海 洋 生 物 和 海 洋 生 态环 境 。 蒽 和 苯 并 芘 是 多 环 芳 烃 中 最 简 单 的 一 种 , 是 其 他 复 杂 多 环 芳 烃 的 母 体 , 探 讨 蒽 对 海洋 生 物 的 致 毒 机 理 , 可 为 进 一 步 研 究 其 它 复 杂 的
7、PAHs 对 海 洋 生 物 伤 害 机 理 提 供 有 利 的 证据 。 米 氏 凯 伦 藻 是 海 洋 中 常 见 的 单 细 胞 藻 类 , 已 成 为 我 国 主 要 赤 潮 优 势 藻 种 1, 同 时 也 是海 洋 的 初 级 生 产 者 , 通 过 食 物 链 的 富 集 作 用 可 以 影 响 其 它 海 洋 生 物 。 本 文 运 用 实 验 生 态 学和 生 物 化 学 的 方 法 研 究 了 多 环 芳 烃 ( PAHs) 蒽和苯并芘单独及联合作用对米氏凯伦藻从 种 群 到 个 体 到 分 子 水 平 的 影 响 , 得 到 研 究 结 果 如 下 :1、 蒽 和 苯 并
8、 芘 单 独 及 联 合 作 用 对 米 氏 凯 伦 藻 生 长 量 的 影 响( 1) 两 者 都 表 现 出 了 较 好 的 剂 量 效 应 关 系 , 不 同 的 是 单 一 作 用 的 蒽 表 现 出 了 抑 制 , 而苯 并 芘 则 是 低 促 高 抑 。( 2) 经 回 归 分 析 分 别 求 的 其 EC50 后 定 义 0.5EC50(蒽 )+0.5EC50(苯 并 芘 )=1 个 毒 性 单 位( TU) ,按 照 此 比 例 混 合 后 进 行 联 合 毒 性 试 验 , 表 现 为 拮 抗 作 用 。2、 蒽 和 苯 并 芘 单 独 及 联 合 作 用 对 米 氏 凯 伦
9、 藻 抗 氧 化 系 统 的 影 响( 1) 米 氏 凯 伦 藻 的 SOD、 POD 和 CAT 在 单 独 及 联 合 作 用 胁 迫 下 均 呈 现 出 一 定 的 应 激活 性 , 以 降 低 毒 物 对 藻 细 胞 自 身 的 伤 害 。 SOD、 POD 和 CAT 均 表 现 比 对 照 组 高 的 趋 势 ,但是升高的程度不同,甚至有的酶活升高后又下降,G SH 无 明 显 变 化 。( 2) 首 先 , 在 单 独 及 混 合 作 用 下 SOD 都 呈 现 出 升 高 的 趋 势 , 但 是 苯 并 芘 升 高 幅 度 最 大 ,蒽 次 之 , 混 合 作 用 下 最 小
10、。 其 次 , CAT 在 蒽 胁 迫 下 呈 现 出 升 高 的 趋 势 , 在 苯 并 芘 胁 迫 下 则表 现 出 降 低 的 趋 势 , 联 合 作 用 下 亦 表 现 出 降 低 趋 势 , 但 是 都 比 对 照 组 高 。 POD 在 蒽 胁 迫 下表现不明显,但是在苯并芘作用下则表现出先升高后降低的趋势,混合作用下亦是如此。GSH 在 单 独 及 联 合 作 用 下 变 化 不 大 , 总 的 结 果 说 明 , 蒽 与 苯 并 芘 单 独 作 用 是 差 异 显 著 , 其联 合 作 用 也 并 非 是 简 单 的 相 加 , 其 机 制 相 当 复 杂 。( 3) 各 种
11、酶 活 的 基 础 酶 活 不 同 , 从 对 照 组 测 定 的 结 果 可 以 看 出 , 即 使 在 不 受 外 界 胁 迫的 情 况 下 , 各 种 酶 的 活 性 大 小 也 不 同 , 由 此 说 明 基 础 酶 活 不 同 。3、 蒽 和 苯 并 芘 单 独 及 联 合 作 用 对 米 氏 凯 伦 藻 亚 显 微 结 构 的 影 响(1) EC50(蒽 )、 EC50(苯 并 芘 )及 EC50(混 合 )三者都使米氏凯伦藻的外形发生异常,其发 生 频 率 及 严 重 程 度 依 次 是 苯 并 芘 联 合 作 用 蒽 。(2) 细胞器结构排列紊乱,发生质壁分离现象且细胞壁发生不
12、同程度的溶解破坏, 有 的线 粒 体 膜 、 质 体 外 膜 也 发 生 了 不 同 程 度 的 溶 解 。(3)处理后细胞内的脂滴比对照细胞内的含量增多,液泡内的物质却变少,淀粉等其他细 胞 器 未 发 现 明 显 的 变 化 。II曲 阜 师 范 大 学 2010 级 硕 士 学 位 论 文(4)在大多数细胞壁被破坏严重或者已经死亡的细胞中发现,其在拟核附近形成了一个孢 子 , 根 据 拍 摄 到 的 不 同 时 期 孢 子 的 形 态 , 即 由 不 闭 合 到 闭 合 的 过 程 , 推 测 孢 子 的 形 成过 程 大 致 是 : 细 胞 遭 受 侵 害 , 细 胞 壁 溶 解 ,拟
13、 核 周 围 的 线 粒 体 等 主 要 细 胞 器 流 入 未 闭 合 的孢 圈 ,孢 子 闭 合 , 内 部 物 质 变 得 均 匀 。4、 蒽 和 苯 并 芘 单 独 及 联 合 作 用 对 米 氏 凯 伦 藻 DNA 损 伤 的 影 响(1)用丙酮处理后米氏凯伦藻的 DNA 电泳图与对照组相比无明显变化;(2)用蒽或苯并芘处理后细胞 DNA 的 电 泳 图 与 对 照 相 比 条 带 信 号 弱 且 模 糊 , 推 测 可 能 是由 于 DNA 受损造成的。关键词:蒽 ; 苯 并 芘 ; 米 氏 凯 伦 藻 ; 生 长 量 ; 抗 氧 化 酶 ; 亚 显 微 结 构 ;DNA 损伤II
14、I曲 阜 师 范 大 学 2010 级 硕 士 学 位 论 文The Eco-toxicological effects of Anthracene andbenzoapyrene separate and combinedeffects on Karenia mikimotoiAbstractPolycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) is important environmental pollutants widespreadin the oceans, the main component of the oil, has a strong carci
15、nogen. As in recent years, moreand more oil spoil occurred, PAHs pollution phenomenon increasingly attracted peoplesattention, and the PAHs pollution is bound to affect the marine life and the marine environment.Anthracene and benzopyrene are the simplest one of polycyclic aromatic hydrocarbons, the
16、parent of other complex polycyclic aromatic hydrocarbons, the mechanism of toxicity ofanthracene on marine life, can provide favorable evidence for the further study of other complexPAHs to marine biological damage mechanism. The Karenina mikimotoi is an commonsingle-celled algae in the ocean, has become Chinas major red tide dominant species 1 , is alsothe primary producers of the ocean,