葡萄、香蕉的组织培养

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1、葡葡萄萄、 、香香蕉蕉的的组组织织培培养养1 香香妃妃葡葡萄萄的的快快繁繁(1)材料与方法供试材料于秋季在田间采集,沙藏后于春季在温室内水培,新梢长 2 3cm时剪取茎尖和带芽茎段,在流水中冲洗 2 3 小时后,用 70%酒精浸泡 30秒,再用 0. 1%升汞处理 78 分钟,然后用无菌水冲洗 34 次,每次间隔 5分钟左右,以洗净残留的升汞。在无菌条件下将材料接种到培养基中。初代诱导培养用 MS 做基本培养基。继代增殖和生根培养以 1 /2MS 为基本培养基。上述培养基中均加 0. 5%琼脂。初代培养基中蔗糖为 3%,继代培养基中为2%(以白砂糖替代蔗糖)。pH 均调至 5. 8。温度 22

2、 25,光强 2000 lx光照 12/d。瓶苗根长 35cm 时进行炼苗移栽。(2)结果诱导培养:接种 1 周左右即有芽萌发。40 天后在基本培养基中添加 1. 0mg/LBA、不加 IAA 时萌芽数最多,萌芽数达 15 个,芽长 5.1cm。继代增殖和生根:诱导出的芽接入 1 /2MS 附加 IBA0. 2mg/L 时,生根率和增殖系数最高 ,1 个月后平均生根数 47 条、平均生根率 94%、增殖系数5.2、平均根长 3. 5 cm。移栽:苗根长 35cm 时,将瓶移至温室,不揭瓶盖,1 周后打开瓶口, 3 天后用清水洗去根部培养基,将苗移至用 0. 1%高锰酸钾消过毒的蛭石中,放入温室

3、,其上再搭一塑料小拱棚,少浇水,天晴时适当搭帘遮荫,棚内相对湿度保持在 85%左右,其间每隔 10 天左右浇 1 次营养液,并逐渐揭帘揭棚,增加光照和通风。1 个月后,当苗长出新根时,移至草炭沙土= 112 的花盆内。室外气候适宜时进行大田移栽,移栽成活率达 70%以上。2 美美人人指指葡葡萄萄组组培培(1)材料与方法试材品种为美人指葡萄,9 月中旬至 10 月初采取美人指葡萄带有冬芽的夏芽副梢,剪取距顶端 35 节的茎段,采后立即去掉叶片,用自来水冲洗12 h 再用洗洁精稀释液洗涤枝条 46 次,在无菌条件下用 70 %酒精浸泡 30 s ,用 0. 1 %升汞溶液浸泡 1618 min ,

4、再用无菌水冲洗 56 次,将枝条剪成带 1 个冬芽的茎段, 长约 12 cm ,接入初始诱导培养基中。当萌发的苗长到 12 cm 时,接入增殖生根培养基中进行继代培养,当长到34 cm 时,再次进行继代或移栽。初始诱导、增殖生根基本培养基为 B5 。培养基中均加入 3 %蔗糖,0. 6 %琼脂,pH 6. 0 。培养条件为光照强度 2 500 lx ,16 h /d,温度 2527 。试管苗移栽前要练苗。苗高达瓶口,当试管苗根长达 34 cm ,有 34 枚正常叶片时,连同培养瓶转入日光温室内,开瓶在温室中自然光下炼苗 37 d ,当从瓶口伸出油亮的叶片且幼茎呈淡红色时即可出瓶,然后在能调节温

5、度的沙床上炼苗,阴天或傍晚,将培养瓶内的幼苗倒出,洗去根上附着的培养基,栽入沙床后,盖好临时塑料小拱棚。最初3 d ,小拱棚内温度保持的 25 2 ,最高不超过 30 ,最低不低于 20 ,相对湿度保持在 90 %95 %。光照为 71031 104 lx ,夜间或阴天要人工补充光照,3 d 后,降低棚内湿度到 70 %80 % ,光强逐渐增加到 4 104 lx。67 d 后完全拆除临时小拱棚。最后进行温室营养钵炼苗,经沙培的合格苗,小心挖出,在空气湿度不低于 70 % ,温度不高于 2025 ,无直射光下,栽入肥沙腐熟有机肥 110. 2 的营养钵中。栽于营养钵中的苗,扣小拱棚的最初几天,

6、温度、湿度、光照的要求和管理同沙培苗。大田苗圃移栽。选疏松肥沃、排灌水方便、距温室较近、日照良好的地块做为苗圃地。按一般营养钵苗进行移栽及管理即可。移栽于苗圃地的幼苗应保证有 3 个月的生长期,并及时打顶去副梢,促进枝芽成熟。(2)结果 最佳启动萌芽培养基:B5 + 6-BA 2. 0 mg/ L + IBA 0. 5 mg/ L + 3 %蔗糖+ 0. 6 %琼脂,pH 5. 86. 0 ,3d 开始萌芽,平均 3 芽,10d 后芽长1.8cm最佳增殖生根培养基:B5 + IBA 0. 5 mg/ L + 3 %蔗糖+ 0. 6 %琼脂,pH 5. 86. 0,增殖率 5.5,生根率达 98

7、 %。香香蕉蕉的的组组织织培培养养1 香香蕉蕉的的组组织织培培养养(1)材料方法台湾引入的香蕉品种。选果梳整齐、果实大小均匀、产量高、无病虫害症状的健康母株的吸芽(注:吸芽苗是从地下球茎上萌发、生长成苗的各类苗的总称,可以分为:褛衣芽,秋后春前发生的吸芽,是传统无性繁殖春植最好的种苗;红笋,春暖后露出地面的吸芽,因其色泽嫩红而得名,是 3 月至 5 月定植的常用种苗;隔山飞,收获后植株球茎上长出的吸芽;大叶芽,收获后的隔年旧球茎上抽出的吸芽,通常不宜用作种苗,。挖取吸芽时,宜稍靠近母株,在早春与秋季干旱季节采芽。从蕉园采取的吸芽用自来水冲洗干净,用不锈钢解剖刀切去吸芽的根和顶端,剥去外层,切成

8、高 3cm 的圆柱体,在超净工作台上,用 75%的酒精消毒 2 min,再用 0.1%的高汞消毒 1520 min。消毒液应浸没圆柱体,并经常翻动圆柱体,以便充分灭菌。消毒后,立即用无菌水漂洗 5 次,冲净消毒液。初代培养:用解剖刀剥除外层叶鞘,留 34cm 的基座,将基座十字形切成 4 块,每块带有 12 个芽原基,接入诱导培养基中进行初代培养,基本培养基 MS+糖 30g/L+琼脂 6.0g/L,pH 调至 5.8。继代培养:在继代繁殖中,为减弱顶端优势,促进基盘腋芽生长,转接时将丛生苗的大部分假茎叶切除,并将基部切成含有 2-4 个芽的芽丛,转接到继代培养基中,基本培养基MS+糖 30g

9、/l+琼脂 6.0g/L,pH 调至 5.8,温度 2528,光照 1 0002 000lx,12 h/d,30 d 后统计增殖率。壮苗生根培养:培养基为MS,经过 3040 天的壮苗培养,然后转入生根培养基中,即 MS +NAA0.1mg/l+糖 25.0g/l +琼脂 6.0g/L,培养 2030 天即可转入营养杯或苗床进行炼苗。(2)结果MS+6-BA4.0mgL+NAA0.2mg/L+糖 30g/L+琼脂 6.0g/L 是最佳诱导培养基MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.1-mg/L 或 MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.2mg/L 都是适宜的增殖培养基,30 d 后,增殖

10、4-7 倍,继代培养不应超过 10 次,继代次数过多,常出现畸形苗和组培苗发生变异。2 红红蕉蕉组组培培快快繁繁 选用生势强健,挂果整齐,产量高的母株,挖取其刚露出地面的吸芽作为诱导外植体材料。剥除吸芽外面的叶鞘,用水冲洗干净,在无菌条件下用 75 %酒精消毒 30 s,再用 0.17 %氯化汞消毒 1520min,然后用无菌水冲洗7 8 次, 逐层剥去外层的叶鞘, 最后切成 1cm 0.5cm 0.5cm 大小的茎尖块,放在改良的 MS + 6-BA4-6mg/L+ NAA 0.2mg/L + 3 %糖+ 卡拉胶 3.8g/L 的诱导培养基中,于 2830 培养室中培养 40-50d 即可出

11、芽。丛芽的继代增殖:用改良的 MS + 6-BA 3-4mg/L+ 卡拉胶 3.8g/L 的培养基进行继代增殖,在 2830 、光照 2 000lx 培养 2025 天,即可继代增殖 1 次,并可获得 22.3 倍的增殖率。培养过程中光照应充分,每天光照时间不少于 10 h,如无光照或光照不足,其假茎和叶柄的颜色会退淡、转绿,甚至变成白色,影响增殖率。一般继代培养不要超过 12 代。生根培养:经一段时间继代增殖,当芽长至有 3-4 片叶、高约 3cm 时,可转入改良的 1/2 MS + IBA1mg/L+ AC(活性炭) 0.1 % + 3 %糖+卡拉胶 3.8g/L 的生根培养基中,在 28

12、-30 、光照 2500lx 条件下培养 25-30 天即可出瓶假植。组培假植: 假植苗采用拱形薄膜大棚栽培,大棚四周覆盖防虫网,里层为薄膜,外层为遮阳网,基质用肥土即可。种植前应先将基质淋透水,将苗根平展移栽,压实,浇足定根水。假植苗对水分要求较高,种植后 10 天内每天浇水一次。之后采用干湿交替控制基质水分,高温、干燥时应开门通风,喷水降温、增湿。假植苗生长后期要适当控制水分。假植苗生长前期苗势较弱,对肥料要求不高,故可采用薄肥勤施、叶面追肥等,如喷施 0.2 %磷酸二氢钾等,同时注意定期防病治虫,如每隔 10-15 天喷施氧乐果 1000 倍液或百菌清 1 000 倍液一次。小苗长至 5

13、-7 片新叶、假茎高 20cm 时,即可出圃定植。出圃前掀开薄膜和遮阳网炼苗 15-20 天,有利于大田种植成活。3 龙龙溪溪米米蕉蕉组组培培(1)材料与方法取田间无病虫害母株的吸芽苗, 用自来水冲洗干净, 切取 1cm3 大小的茎尖, 先用 70% 酒精浸泡 30s, 再用 0. 1% 升汞消毒 10 15m in, 取出用无菌水冲洗 5 6 次, 再切取 0. 4 0. 6cm3大小的茎尖, 纵剖成二等份, 接入诱导培养基, 在弱光条件下, 291培养 30d, 然后转入增殖培养基。以 1/2M S 为基本培养基, 根据不同培养目的添加不同的激素成分(6 - BA、NAA ) , 蔗糖浓度

14、为 30g/L , 琼脂 6g/L , pH5. 8。(2)结果6- BA 浓度对不定芽诱导:6- BA 对外植体萌动起决定性作用,以 6- BA 3mg/L的浓度较为理想,萌动时间 30d,出芽率 80。不同激素配比对增殖率的影响:一定浓度范围内 6- BA 和增殖率呈正相关。NAA 对芽的增殖没有促进作用,以 6- BA 4 5mg/L 的浓度增殖率高,达 2.38 倍生根培养与假植:增殖培养 30d 左右, 芽高约 3cm , 转入 1/2M S+ NAA 0. 5mg/L + 活性炭 0. 5 g/L 的生根培养基,温度 271培养 10 15d 就能长出 2 3 条根,20d 左右将

15、苗移至光照强度2000lx、自然光线充足的炼苗棚炼苗 15 20d, 即可移入大棚营养袋假植。假植基质用去表层后的红土+ 10% 草木灰。假植时洗去培养基, 用千分之一的高锰酸钾浸根, 种完后浇透定根水, 大棚内保持适宜的温度和湿度, 成活率达 95% 以上。4 香香蕉蕉花花序序组组培培(1)材料方法取台湾 8 号香蕉花序顶端 8cm,在超净工作台用 75酒精 3min,用无菌水洗 2 次,去一端花端和苞叶,再用 75酒精 2min,用无菌水洗 3 次,两端各去 4mm,余下部分纵切 4 块再横切成 4mm4mm 小块接入培养基,温度 253,弱光培养,生根用光培养。(2)结果芽诱导:将花轴小

16、块接入 MSBA4mg/LIBA0.5mg/L白沙糖4卡拉胶 0.4,pH5.8-6.0,13d 萌动,40d 出芽。污染率、出芽率与增殖倍数:出芽后第一次继代,污染率 9%,出芽率80%。在一个继代周期内平均增殖 1.83 倍生根培养:将 7-10cm 以上的芽转接至 MSIBA0.2-1.0mg/L(或1/2MS 大量元素IBA0.2-1.0mg/L)白沙糖 4卡拉胶0.4,pH5.8-6.0,253,3 周,均可生根成苗,平均达到 6.1 条根、3.2片叶/苗。生根培养 3 周后就可炼苗 2-3d 移植于营养土中。室温度士 , 两种外植体接种至芽光培养, 把培养基上培养时, 采用光培养, 经巧一天便长成健壮的完整植株5 讨讨论论香蕉属于芭蕉科(Musaceae) 芭蕉属(Musa) , 是世界第二大宗水果, 全世界有一百多个国家生产香蕉, 世界年产量约 9.5 亿吨,

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