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1、第 1 页 共 3 页江苏师范大学生物本科函授生物分离工程考试试卷命题人： 沈洁 审核人： 一、名词解释(每题 2 分，共 20 分)1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。2.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。3.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的4.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。5.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，
2、依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。6.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点临界点后的流体。7.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。8.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。9.超滤：凡是能截留相对分子量在 500 以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。10.色谱技术：是一组相关分离方法的总
3、称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异） ，经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸） ，达到分离的目的。二、选择(每题 1 分，共 20 分。)1HPLC 是哪种色谱的简称（ C ） 。A离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱2针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ） 。A.凝胶过滤 B.离子交换层析C.亲和层析 D.纸层析3盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液 pH 到等电点4适合小量细胞破碎的方法是（ B ）高
4、压匀浆法 B.超声破碎法 C.高速珠磨法 D.高压挤压法5基因工程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（ C ）A盐析 B.超声波 C.膜过滤 D.层析6氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（ A ）性质。A.溶解度和等电点 B.分子量 C.酸碱性 D.生产方式7人血清清蛋白的等电点为 4.64，在 PH 为 7 的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）A.正极移动；B.负极移动；C.不移动；D.不确定。8凝胶色谱分离的依据是（ B ） 。A.固定相对各物质的吸附力不同 B.各物质分子大小不同C.各物质在流动相和固定相中的分配系数不同 D.各物质与专一分子的亲和力不同9用来提取产物的溶
5、剂称（ C ） 。A.料液 B.萃取液 C.萃取剂 D.萃余液。系科班级学号姓名密封线装订线装订线第 2 页 共 3 页10.分配层析中的载体（ C ） 。A.对分离有影响 B.是固定相 C.能吸附溶剂构成固定相 D.是流动相11.结晶过程中，溶质过饱和度大小（ A ）A.不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B.只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C.不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D.不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度12.供生产生物药物的生物资源不包括（ D ）A.动物 B 植物 C.微生物 D.矿物质13.发酵液的预处理方法不包括（
6、 C ）A.加热 B 絮凝 C.离心 D. 调 pH14.其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（ B ）A.离心分离 B 过滤 C. 沉降 D.超滤15.那种细胞破碎方法适用工业生产（ A ）A.高压匀浆 B 超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法16.物理萃取即溶质根据（ B ）的原理进行分离的A.吸附 B.相似相溶 C 分子筛 D 亲和17.纳米过滤的滤膜孔径（ D ）A 0.0210m B 0.0010.02m C 2nm D 1nm18.下列哪个不属于高度纯化：( B )A.层析 B.吸附法 C.亲和层析 D.凝胶层析19.高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱
7、仪，基本上由（ D ）组成。A.高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分B.进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分C.高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分D.高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分20.影响电泳分离的主要因素（ B ）A.光照 B.待分离生物大分子的性质 C.湿度 D.电泳时间三、填空(每空 1 分，共 20 分)1.发酵液常用的固液分离方法有（ 离心 ）和（ 过滤 ）等。2.常用的蛋白质沉析方法有（等电点沉淀） ， （盐析）和（ 有机溶剂沉淀 ） 。3.膜分离过程中所使用的
8、膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 （微滤膜） ， （超滤膜） ，（纳滤膜）和（反渗透膜） 。4.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pI） ）的不同；5.典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过滤机） 。6.分配色谱的基本构成要素有（载体） 、 （固定相）和（流动相） 。7.过饱和溶液的形成方法有（饱和溶液冷却） 、 （部分溶剂蒸发） 、 （解析）和（化学反应结晶） 。四、问答题（每题 10 分，共 40 分）1.简述生物分离过程的特点?答: 1.产品丰富：产品的多样性导致分离方法的多样性2.绝大多数生物分离方法来源于化学分离3.生物分离一般比化工分离难度大（1）成分
9、复杂（2）悬液中的目标产物浓度低（3）生物活性，条件相对温和（4）生物产品要求高质量（5）获得高纯度的干燥产品（6）卫生2. 膜分离技术的类型和定义？答：膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的，故而可以按分离粒子大小进行分类：第 3 页 共 3 页（1）微滤：以多孔细小薄膜为过滤介质，压力为推动力，使不溶性物质得以分离的操作，孔径分布范围在 0.02514m 之间；（2）超滤：分离介质同上，但孔径更小，为 0.0010.02 m，分离推动力仍为压力差，适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质；（3）反渗透：是一种以压力差为推动力，从溶液中
10、分离出溶剂的膜分离操作，孔径范围在0.00010.001 m 之间；（由于分离的溶剂分子往往很小，不能忽略渗透压的作用，故而成为反渗透） ；（4）纳滤：以压力差为推动力，从溶液中分离 3001000 小分子量的膜分离过程，孔径分布在平均 2nm；（5）电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作；3. 液一液萃取时溶剂的选择要注意以下几点哪些问题？（1）选用的溶剂必须具有较高选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差异愈大愈好。（2）选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易分离与回收。（3）两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分离，选用溶剂时应注意。（4）要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。4试述柱层析的基本操作过程。答：1.装柱：干法装柱湿法装柱注意：湿法装柱中柱内预留一部分水，防止气泡的产生，装柱过程要连贯。平衡。2.加样：干法加样湿法加样注意：加样过程中，要防止产生飞溅，量要适中。3.洗脱：以设定好的流速加入洗脱剂，可以是单一溶剂，也可以梯度洗脱。注意：不使柱表面的溶液流干，柱上端保留一层溶液。4.收集：每隔 10mL 收集一试管，使用层析的手段或紫外检测器进行实时的检测，合并具有相同物质的流份。
