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1、氨基氮测定(酸度计法)一、原理利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,以氢氧化钠标准溶液滴定后定量(以酸度计测定终点) 。二、实验步骤精密吸取 1mL 样品,加水 79mL,开动磁力搅拌器(用前校准) ,用 C(NaOH)=0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定到 pH8.2,精密加入甲醛 10mL,混匀,再用C(NaOH )=0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液继续滴定至 pH9.2,记下加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积。同时取纯水 80mL,精密加入甲醛 10mL,用 C(NaOH )=0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定至 pH9.2,记录消耗氢氧化钠
2、标准溶液的体积,做实际空白实验。计算:104.2-110/ WV)(毫 克 )氨 基 氮 ( 以 氮 计 , 克V1-测定用样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,毫升V2-实际空白加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,毫升W-称取样品的量C -氢氧化钠标准溶液的浓度(mol/L)0.014-与 1ml 氢氧化钠标准溶液相当的以克表示氨基氮的质量总氮的测定一、原理样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白分解,其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再宜标准盐酸溶液滴定,根据盐酸消耗体积计算出蛋白质的含量。二、实
3、验步骤准确称样品 0.22g,小心移入干净洁净的消化瓶中,然后加入硫酸铜 0.5g,硫酸钾 9.5g 和浓硫酸 20ml,轻轻摇匀后置于电炉上小火加热,待内容物全部碳化,泡沫停止产生后,加大火力,保持瓶内液体微沸,至液体变蓝绿色透明后,再继续加热微沸12h。冷却后加入 200ml 纯水,移入蒸馏瓶中,加入 40%的氢氧化钠溶液 150ml,瓶口塞紧,冷凝管下端插入吸收瓶液面下,吸收瓶内盛有 4%硼酸溶液 50ml 及混合指示剂 23 滴。加热蒸馏,至氨全部蒸出(蒸馏液约 250ml 即可) ,蒸馏结束用少量水冲洗冷凝管下端的外部,取下接收瓶,以 0.1 mol/L 盐酸标准溶液滴定至灰色为终点,同时做空白实验。计算: 104.21%FWCV)()蛋 白 质 (V1-样品消耗盐酸标准溶液的体积,毫升V2-实际空白盐酸标准溶液的体积,毫升W-称取样品的量C -盐酸标准溶液的浓度(mol/L)0.014-与 1ml 盐酸标准溶液相当的以克表示氨基氮的质量F-氮换算为蛋白质的因数,氮乘以 6.25 即为蛋白质