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1、表 3 基础医学院 学院（系、所）神经生物学系 研究生课程简介课程名称：神经生物学基本技术与方法 课程代码：510.521英文名称：Basic Technology and Methods of Neurobiology课程类型：讲授课程 实践（实验、实习）课程 研讨课程 其它考核方式：平时成绩+考试 教学方式：讲授+实验适用专业： 临床医学、基础医学 适用层次： 硕士 博士 开课学期：第一学期 总学时/讲授学时：32 学分：2先修课程要求： 课程组教师姓名 职 称 专 业 年 龄学术专长施静 教授 神经生物学 54 脑血管病的神经机制田波 教授 神经生物学 38 分子神经生物学李熳 副教授
2、中西医结合基础 39 针刺镇痛机制孟宪芳 讲师 神经生物学 37 分子神经生物学孙宁 讲师 神经生物学 35 脑血管病的神经机制教学大纲：理论课：课程目的：向神经研究领域的研究生传授最适用神经生物学研究有关的实验方法和技术，并为选课者即将开展的毕业论文设计提供方法学咨询。课程特点：选课学员根据自己研究课题需要有针对性地选择适用的实验项目，有的放矢地进行实战培训，为进入科研提前做好技术准备。课程设计：注重层次分布（整体、器官、细胞水平） 、与相关学科实验方法的衔接（生化、组化、药理、分子生物学等） 。目录中的内容都是在神经生物学系的科研中运行良好的成熟技术。开课方式：全部实验均利用神经生物学系的
3、科研条件（师资、场地、仪器设备、药品试剂等） ，完全按正式的科研要求进行严格训练。选课要求：根据选修的实验人数进行分组，选课人根据自身研究方向（毕业论文）的需要，从目录中任选 3 个实验作为操作实验。操作实验要求在教师的指导下，必须自己动手，直到完全掌握，每个实验的时间为 1 整天（按 8 学时计算，允许延长） 。实验项目及相关内容简介序号 项目及内容简介 类别1 学习记忆机制研究思路概论内容简介：系统介绍学习记忆机制研究方法的发展史，以及如何根据自己研究课题的需要，正确选择实验方法，设计先进合理的观察指标。Morris 水迷宫在学习记忆中的应用 操作(大鼠)2内容简介：介绍 Morris 实
4、验系统由水迷宫装置、水迷宫图像自动采集和处理系统组成；常用的 Morris 水迷宫的训练的几种方法；结果处理：利用计算机建立图像自动采集和分析系统，这就能根据所采集的资料（如潜伏期、平台所在象限、停留的时间和运行轨迹图等）制成相应的直方图和运行轨迹图，对实验结果作进一步分析和讨论。神经病理痛模型制备 课堂讲授3内容简介：介绍目前在研究神经病理痛模型中常用的模型及其优缺点，引导学生在自己的科学研究正确选择实验方法，设计先进合理的观察指标。吗啡对福尔马林致痛大鼠的镇痛作用 操作(大鼠)4内容简介：腹腔注射吗啡或生理盐水，在大鼠右后肢脚掌皮下注射 5%福尔马林 50l, 立即进行行为观察。记录两组（
5、生理盐水组和吗啡组）大鼠致痛侧后肢每 5 分钟内的抬脚次数和抬脚时间，共记录 80 分钟。辣根过氧化物酶 HRP 追踪法实验 操作(大鼠)5内容简介：介绍常用的神经通路的追踪方法，如：利用神经元轴浆运输现像的追踪法；利用神经元胞体受损或轴突离断后远侧轴突的变性，或轴突切断后胞体的反应特性的变性追踪法利用某些荧光染料（DiI、DiA、DiO、DiS） （如羰花青 carbocyanine）在神经细胞质膜扩散的神经元质膜荧光追踪法，其中最常用的为轴浆运输示踪法。本实验利用 HRP 追踪法：HRP 法的基本操作步骤是麻醉动物，将 HRP 注射(导入)至中枢神经系统或周围器官、神经的一定部位，动物存活
6、一定时间，使 HRP 有足够时间运输至胞体或末稍， 然后灌注固定动物，取材制作冰冻切片，最后用过氧化氢及显色剂来显示 HRP 标记。原代星形胶质细胞的培养 操作6内容简介： 取材：用碘酒，75%酒精消毒动物头部皮肤后快速断头，在解剖显微镜下用眼科镊子仔细剥除脑膜及血管，剪取顶叶皮层。 酶消化； 分散细胞； 过滤； 种植； 培养； 换培养液；（8）倒置纤维镜下观察。原代神经元的培养 操作7内容简介： 取材：用碘酒，75%酒精消毒动物头部皮肤后快速断头，在解剖显微镜下用眼科镊子仔细剥除脑膜及血管，剪取顶叶皮层。 酶消化； 分散细胞； 过滤； 种植； 培养；（7）纯化： 将培养瓶放在恒温（37 oC）摇床上摇动 15-18h(250r/min)使附着在培养瓶壁底层的星形胶质细胞与其它细胞分离，然后更换培养液，以除去少突胶质细胞，神经细胞。继续培养 6 天可获得 92%以上的星形胶质细胞；（8） 传代。海马脑片膜片钳 观摩8内容简介：取新生大鼠，75%酒精消毒动物头部皮肤后快速断头，在解剖显微镜下取出海马，用眼科镊子仔细剥除血管，用震荡切片机切取 400 微米厚的脑片，种植于小培养皿中。使用盲插法封接细胞，记录电流，进行膜片钳实验。教材： 关新民主编 神经生物学实验技术与科学思维 华中科技大学出版社主要参考书：吕国蔚 主编 实验神经生物学 科学出版社
