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1、植物体内全氮、磷、钾的测定一、 实验原理作物体中的氮、磷、钾通过硫酸和 H2O2消化，使有机氮化物转化成铵态氮，各种形态磷化物转化成磷酸，N、P、K 均转变成可测的离子态（氮转化为 NH4+，磷转化为 H3PO4，钾为 K+）。然后采用相应的方法分别测定。磷的测定原理（钒钼黄比色法）：在酸性条件下，溶液中的磷酸根与偏钒酸盐和钼酸盐作用形成黄色的钒钼酸盐。黄色深浅与溶液中磷浓度呈正比。此法要求酸度 0.041.6N（以 0.51.0N 最好）；测磷浓度范围 020mg/kg，比色波长 460490nm，磷浓度低时选用较短的波长，反之可选较长的波长。钾的测定原理（火焰光度法）：含钾溶液雾化后与可燃
2、气体（如：汽化的汽油等）混合燃烧，其中的钾离子（基态）接受能量后，外层电子发生能级跃迁，呈激发态，由激发态变成基态过程中发射出特定波长的光线（称特征谱线）。单色器或滤光片将其分离出来，由光电池或光电管将特征谱线具有的光能转变为电流。用检流计测出光电流的强度。光电流大小与溶液中钾的浓度呈正比，通过与标准溶液光电流强度的比较求出待测液中钾的浓度。二、仪器与试剂仪器：分析天平（0.0001）、分光光度计、容量瓶（50ml）移液管（5、10、20ml）测 P、K 试剂：1钒钼酸试剂：25.0 克钼酸铵（NH 4） 2Mo7O2 4H2O溶于 400ml 水中，另取 1.25 克偏钒酸铵（NH 4VO3
3、）溶于 300ml 沸水中，冷却后加入 250ml 浓 HNO3，冷却后，将钼酸铵溶液慢慢地混入偏钒酸铵溶液中，边混边搅拌，用水稀释至 1 升。22，4二硝基酚指示剂：0.25 克 2，4二硝基酚溶于 100ml 乙醇中。3磷标准液：准确称取 KH2PO4（110 0C 烘两小时）2.1968g 溶于水，定容至 1000ml，此为含磷 500mg/L 的磷标准液。取上液准确稀释 10 倍得到磷为 50 mg/L 标准液，用于制作标准曲线。三、测定步骤植物样品的消化：称取磨细干样品 0.10.2 克(精确到 0.0001 克)放入 100 毫升消煮管内,加浓 H2SO45毫升,使样品和浓 H2S
4、O4 混匀，放入消化炉上加热，文火微沸 5 分钟，取出消煮管，冷却，加 30%H2O25 滴，温度升至 200 度再煮，30 分钟后取下冷却再加 30% H2O25 滴，温度升至 300度继续消煮（不能超过 320 度），至消化液清亮透明为止。如消化液未清亮，再加 2 滴 H2O2煮沸 5 分钟，并除去多余 H2O2。消煮完毕后，取出消煮管冷却，用少量蒸馏水，少量多次地将全部消化液洗入 50 毫升容量瓶内，冷却后，定容，同时作二个空白。此为待测液。 磷的测定：吸取待测液 20ml，放入 50ml 容量瓶中，加 2，4二硝酚指示剂 2 滴，用 6N NaOH 中和至刚现淡黄色，准确加入钒钼酸铵试
5、剂 10ml，摇匀用水定容，摇匀 15 分钟后比色，波长450nm，以空白液调节消光度为零。标准曲线绘制：先取 7 只 50 毫升容量瓶，用 50mg/L 磷标准溶液配制工作曲作。按下表吸取标准液，定容到 50 毫升容量瓶中，按上述步骤显色，即得 0、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0 mg /L P 的标准色阶曲线，然后进行比色。瓶号 1 2 3 4 5 6 750mg/L 磷标准液（ml）0 1.0 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0磷浓度（mg /L） 0 1.0 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0式中：待测液 P 浓度 mg/l：从标准曲线上查得磷浓度 mg/l显色液体积：50ml分取倍数：消煮液体积/吸取消煮液体积W：植株样品烘干重（mg）106：由 mg/l 换算成 g
