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1、第一章:1.生物技术的特点（八高一低）高水平，高综合，高投入，高竞争，高风险，高水平；高智力，高控性，低污染。2.生物工程有时也称生物技术,主要包含四个研究领域即以基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等为主要研究内容的技术体系。 转基因食品是利用分子生物学手段，将某些生物的基因转移到其它生物物种中去，使其出现原物种不具有的性状或产物，以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。产量高，营养丰富和抗病能力强是转基因食品的优势。1.利用基因工程对食品进行改良，以提高食品产量和质量，改善风味，使人们吃到更多、更好的食品。2.食品品质的改善2.1.1 营养品质的改良，如使得食物蛋白质.油脂.碳水化
2、合物含量更加丰富。2.1.2 保鲜性能用基因工程的方法将 ACC 还原酶和 ACC 氧化酶的反义基因和外源的 ACC 脱氨酶基因导入正常植株中，获得乙烯缺陷型植株，达到控制果实成熟的目的，已在番茄中实现。把鱼中抗冻蛋白基因整合植入蔬菜和水果中时，可明显改善果蔬食品冷冻后的品质2.2 提高产量。将大白鼠的生长激素基因注射到小白鼠的受精卵内，成功地培育出“超级鼠” ，体重比一般小白鼠增加 2 倍2.3 改善工艺。一般牛乳的酪蛋白分子含丝氨酸，已被磷酸化从而使酪蛋白表面带有大量阴离子，易结合钙离子而沉淀。用丙氨酸代替丝氨酸，降低磷酸化，使蛋白不易与钙离子结合，从而提高牛奶的热稳定性，防止牛奶消毒中有
3、沉淀现象2.4 保健食品和食品疫苗通过重组 DNA 技术选育出具有抗肝炎功能的西红柿被人食用后，可以产生类似乙肝疫苗的预防效果3 现状 1983 年世界上第一例转基因植物问世以来，植物基因工程研究进入了蓬勃发展阶段。全世界已分离目的基因几百个，获得转基因植物近 200 种1、生物技术定义？是指人们以现代生命科学为基础，结合其他基础学科的科学原理，采用先进工程技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。2、生物技术(生物工程)及其主要研究领域(发酵工程、生化反应工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程)。3、生物技术的特点 八高一低第二章：PPPP
4、ACTG 1234 5 6789101 2 3 4 5 6 7 89 10胞嘧啶（C） 腺嘌呤（A ）鸟嘌呤（G） 胸腺嘧啶（T）脱氧核糖 磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸 8.碱基对9.氢键 10.一条脱氧核苷酸链的片段1. 真核细胞基因结构和原核细胞的有何相同点和不同点？相同点：都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成。不同点：原核细胞基因的编码区是连续的，真核细胞基因的编码区是间隔的，不连续的。2.真核细胞基因组中的基因常有内含子存在，能否在原核细胞中表达？能，为什么？不能，为什么？不能，因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。原核生物必须有相应的原核 RNA
5、 聚合酶可识别原核细胞的启动子, 以催化 RNA 的合成。 基因表达是以操纵子为单位，操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。因此在构建原核表达载体时必须有 1 个强的原核启动子及其两侧的调控序列。3. PUC 质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件 ( A B C D ) A.AmPr B.ori 复制子 C.LacZ 标记 D.多克隆位点在含某个基因的载体中，将目的基因 DNA 片段插入该基因，导致该基因的功能失活如：抗性基因的插入失活筛选，含 Tetr 和 Ampr 基因的载体，若将目的基因插入 Tetr 基因，导致 Tetr 基因失活，形成重组质粒 Tets 和 Ampr4
6、.利用 PCR 技术扩增目的基因 概念：PCR 全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术 原理：_ DNA复制_条件：已知基因的核苷酸序列、四种脱氧核苷酸、一对引物、DNA聚合酶前提条件：方式：以_指数_方式扩增，即_2 n_（n为扩增循环的次数）结果：使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增5.PCR技术扩增过程a、DNA变性（90-95）：双链DNA模板在热作用下， 氢键 断裂，形成_单链DNA_ b、复性（55-60）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部_双链_c、延伸（70-75）：在Taq酶的作用下，从引物的5端3端延伸，合成与模板互补的_
7、DNA链_。 6.1.用一定的_限制酶_切割质粒，使其出现一个切口，露出_黏性末端_2.用_同一种限制酶切断目的基因，使其产生_相同的黏性末端3.将切下的目的基因片段插入质粒的_切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）7. 1.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是c2、下列属于获取目的基因的方法的是( d )利用mRNA反转录形成从基因组文库中提取从受体细胞中提取 利用PCR技术 利用DNA转录 人工合成A. B. C. D.3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是b A提高受体细胞在自然环境中的耐药性
8、B有利于对目的基因是否导入进行检测C增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接4. 有关基因工程的叙述正确的是dA限制酶只在获得目的基因时才用B重组质粒的形成是在细胞内完成的C质粒都可作为运载体 D蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料5.哪项不是基因表达载体的组成部分( b )A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( b ) A基因枪法 B显微注射法 C.农杆菌转化法 D花粉管通道法1）以下说法正确的是 c A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以
9、便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 dA、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ a ）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶4）有关基因工程的叙述正确的是 （ d ）A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中
10、，不进行碱基互补配对的步骤是 （ c ）A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达下列获取目的基因的方法中需要模板链是（ b ）A.从基因文库中获取目的基因B.利用PCR技术扩增目的基因C.反转录法 D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成下列有关基因工程的叙述中，错误的是啊 a、cA 、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料第二章基因工程复习题一、选择题1. 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意
11、义是 （D）A 修复自身的遗传缺陷 B 促进自身的基因重组C 强化自身的核酸代谢 D 提高自身的防御能力2.生物工程的上游技术是（D）A 基因工程及分离工程 B 基因工程及发酵工程C 基因工程及细胞工程 D 基因工程及蛋白质工程3. 基因工程操作的三大基本元件是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体) （A）A. I + II + III B. I + III + IV C. II + III + IV D. II + IV + V4. 多聚接头（ Polylinker ）指的是（A）A. 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工 DNA 片段B. 含有多种复制起始区的人
12、工 DNA 片段C. 含有多种 SD 顺序的人工 DNA 片段D. 含有多种启动基因的人工 DNA 片段5.下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是（D）A. GAAACTGCTTTGAC B. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAG D. GAAACTGCAGTTTC6. 若将含有 5 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3 末端 4 碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是（D）I T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶A. III B. I +
13、 III C. II + III D. I + II + III7.下列有关连接反应的叙述，错误的是（A）A. 连接反应的最佳温度为 37 B. 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%C. 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD. 连接酶通常应过量 2-5 倍8. T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）A. 2 -OH 和 5 P B. 2 -OH 和 3 -PC. 3 -OH 和 5 P D. 5 -OH 和 3 -P9. 载体的功能是(I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基
14、因提供整合能力) （D）A. I B. I + III C. II + III D. I + II + III10.克隆菌扩增的目的是 (I 增殖外源基因拷贝 II 表达标记基因 III 表达外源基因) （D）A. I + II B. I + III C. II + III D. I + II + III11 下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是（C）A. 大肠杆菌繁殖迅速 B. 枯草杆菌分泌机制健全C. 链霉菌遗传稳定 D. 酵母菌表达产物具有真核性12.考斯质粒（cosmid）是一种（B）A. 天然质粒载体B. 由 -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体C. 具有溶原性质的载体D. 能在受体细胞内复制并包装的载体13. 某一重组 DNA （ 6.2 kb ） 的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI 酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共
