《CLC-3和AQP-1在大鼠半乳糖性白内障晶状体中表达的变化（毕业设计-免疫学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《CLC-3和AQP-1在大鼠半乳糖性白内障晶状体中表达的变化（毕业设计-免疫学专业）（46页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、三 峡 大 学硕 士 学 位 论 文CLC-3 和 AQP-1 在 大 鼠 半 乳 糖 性 白 内 障 晶 状 体 中 表 达 的 变 化姓 名 ： 丁 熊申 请 学 位 级 别 ： 硕 士专 业 ： 免 疫 学指 导 教 师 ： 王 平20080501内 容 摘 要目 的 ： 建 立 D-半 乳 糖 性 白 内 障 大 鼠 模 型 ， 利 用 实 时 荧 光 定 量 PCR 方 法 检 测 氯 通道 蛋 白 -3(chloride channel protein-3, CLC-3)和 水 通 道 蛋 白 -1 (aquaporin-1, AQP-1)在D-半 乳 糖 性 白 内 障 大 鼠
2、晶 状 体 和 正 常 大 鼠 晶 状 体 中 含 量 的 变 化 ， 探 讨 CLC-3 和 AQP-1与 白 内 障 发 病 的 关 系 ， 为 白 内 障 病 因 学 研 究 提 供 新 的 理 论 基 础 。实 验 方 法 ： （ 1）建立 D-半乳糖性白内障大鼠动物模型。( 2）采用实时荧光定量PCR 方 法 检 测 CLC-3mRNA 和 AQP-1mRNA 在 D-半 乳 糖 性 白 内 障 大 鼠 晶 状 体 中 含 量 的 变化 。结果：（ 1）成功建立 D-半乳糖性白内障大鼠动物模型，并进行相应分期分组。(2） 实 时 荧 光 定 量 PCR 方 法 检 测 CLC-3mR
3、NA 结 果 ： 1） 空 白 组 、 生 理 盐 水 对 照 组 和 半乳 糖 组 晶 状 体 中 都 有 CLC-3mRNA 的 表 达 ， 生 理 盐 水 对 照 组 大 鼠 在 球 后 注 射 期 间 晶 状 体内 CLC-3mRNA 的 表 达 含 量 无 明 显 变 化 。 2） 第 一 次 给 药 后 的 第 3、 7 和 14 天 时 ， 实 验组 晶 状 体 中 CLC-3mRNA 的 表 达 含 量 逐 渐 增 高 ， 且 均 高 于 同 期 的 对 照 组 ， 第 14 天 时 达最 高 峰 ， 14 天 后 又 开 始 下 降 ， 至 21 天 时 实 验 组 CLC-
4、3mRNA 已 低 于 同 期 对 照 组 晶 状 体中 CLC-3mRNA 表 达 的 含 量 。 3） 、 和 期 晶 状 体 中 CLC-3mRNA 的 表 达 均 高 于 透 明晶 状 体 ， 且 三 期 晶 状 体 中 CLC-3mRNA 的 含 量 呈 逐 渐 增 多 趋 势 ， 期 晶 状 体 中 CLC-3mRNA的 含 量 最 高 ， 期 和 期 时 其 含 量 又 低 于 正 常 晶 状 体 水 平 。 (3） 实 时 荧 光 定 量 PCR方 法 检 测 AQP-1mRNA 结 果 ： 1） 空 白 组 、 生 理 盐 水 对 照 组 和 半 乳 糖 组 晶 状 体 中
5、都 有AQP-1mRNA 的 表 达 ， 生 理 盐 水 对 照 组 大 鼠 在 球 后 注 射 期 间 晶 状 体 内 AQP-1mRNA 的 表 达含 量 有 下 降 趋 势 ， 但 差 异 无 显 著 性 。 2)第 一 次 给 药 后 的 第 3 天 开 始 ， 半 乳 糖 组 晶 状 体中 AQP-1mRNA 的 表 达 含 量 即 开 始 下 降 ， 到 30 天 时 已 降 至 极 低 水 平 。 且 均 低 于 同 期 的对 照 组 晶 状 体 中 AQP-1mRNA 表 达 的 含 量 。 3) 期 晶 状 体 AQP-1mRNA 的 含 量 已 开 始 下 降 ，随 着 白
6、 内 障 的 发 展 ， 进 一 步 呈 下 降 趋 势 ， 到 期 时 降 至 极 低 水 平 。结 论 ： 1） CLC-3mRNA 在 早 期 D-半 乳 糖 性 白 内 障 大 鼠 晶 状 体 中 表 达 增 加 ， 提 示 CLC-3可能在白内障的早期形成过程中发挥作用。2 ） CLC-3mRNA 在晶状体囊泡初期时表达已 开 始 增 加 ， 皮 质 性 白 内 障 时 期 时 表 达 最 多 ， 而 随 着 白 内 障 的 进 一 步 发 展 ， 含 量 又 开始下降。提示 CLC-3 可能参与了白内障的发生发展，尤其是皮质性白内障，为白内障的 形 成 机 制 提 供 一 个 新
7、的 理 论 基 础 。 3） AQP-1mRNA 在 早 期 D-半 乳 糖 性 白 内 障 大 鼠 晶 状体 中 表 达 即 降 低 ， 且 随 着 白 内 障 的 进 一 步 发 生 发 展 ， 到 晶 状 体 完 全 混 浊 时 其 含 量 已 降至 极 低 水 平 。 提 示 AQP-1 与 白 内 障 的 发 生 发 展 有 着 密 切 的 联 系 。 4） 半 乳 糖 性 白 内 障 动物 模 型 是 一 种 比 较 成 熟 、 已 经 得 到 公 认 的 实 验 动 物 模 型 ， 本 实 验 改 良 的 D-半 乳 糖 大 鼠球 后 注 射 的 造 模 方 法 ， 操 作 简
8、便 ， 经 济 实 用 ， 显 效 快 ， 且 致 死 率 低 ， 是 一 种 安 全 有 效II的 造 模 方 法 。关键词： 氯通道蛋白 -3 水通道蛋白-1 实时荧光定量 PCR 白内障 晶状体D-半乳糖 动物模型IIIAbstractObjective： To establish D-galactose cataractous rats model and investigate theexpression of chloride channel protein-3(CLC-3) and aquaporin-1(AQP-1) gene ingalactose-induced catar
9、act and normal lens of rats, to determine whether CLC-3 andAQP-1 expression was related to the occus and progression of cataract.Methods ： (1) Establishing the D-galactose cataractous rats model bysingle-retrobulbar injection of galactose in six-week-old rats. (2)Expression ofCLC-3mRNA and AQP-1mRNA
10、 in lens during different cataract phases was determinedby real-time quantitative PCR.Results： (1)The D-galactose cataractous rats model was successfully established, andcarried on correspondingly division of stages and groups. (2)CLC-3mRNA andAQP-1mRNA were expressed in both lens of normal rats and
11、 cataract rats. During ourexperiment, the expression of CLC-3mRNA and AQP-1mRNA in lens of control groupwas not changeable obviously. (3)CLC-3mRNA began to increase at 3 days after injectionof D-galactose and reached 7-fold that of normal level at 14 days. CLC-3mRNA leveldecreased gradually 14 days
12、later and was less than the normal level at 30 days.(4)CLC-3mRNA in lens increased at stages 、 and of galactose induced cataract by3-、 5-and 7-fold respectively. Subsequently, it decreased with the prolongation of cataractup to 30 days. (5)AQP-1mRNA level decreased gradually during the occus and pro
13、gressionof cataract.Conclusion： (1)There is an overexpression of CLC-3mRNA in early stages ofgalactose induced cataract, which may play an importment role in the gataractgenesis.(2)There is a downexpression of AQP-1mRNA in the lens of cataractous rats, which mayplay an importment role in the gatarac
14、tgenesis. (3)The improved method bysingle-retrobulbar injection of galactose to establish D-galactose cataractous rats model is asafe and valid approach.Key words: CLC-3 AQP-1 Real-Time quantitative PCR Cataract LensD-galactose Animal modelIV三峡大学学位论文原创性声明本 人 郑 重 声 明 ： 所 呈 交 的 学 位 论 文 ， 是 本 人 在 导 师 的
15、 指 导 下 ， 独 立 进 行 研 究 工 作所 取 得 的 成 果 ， 除 文 中 已 经 注 明 引 用 的 内 容 外 ， 本 论 文 不 含 任 何 其 他 个 人 或 集 体 已 经发 表 或 撰 写 过 的 作 品 成 果 。 对 本 文 的 研 究 做 出 重 要 贡 献 的 个 人 和 集 体 均 已 在 文 中 以 明确 方 式 标 明 ， 本 人 完 全 意 识 到 本 声 明 的 法 律 后 果 由 本 人 承 担 。学 位 论 文 作 者 签 名 ：日 期：I引 言白内障( cataract)是 世 界 首 要 的 致 盲 和 视 力 残 疾 的 原 因 ,全 世 界
16、 约 有 16,000,000人 因 白 内 障 丧 失 视 力 1。我国 60 岁 以 上 白 内 障 的 患 病 率 为 46.8%,并 随 着 年 龄 的 增 长 ,发 病 率 呈 增 加 的 趋 势 ， 80 岁 以 上 老 年 人 患 病 率 高 达 100%2。 且 随 着 全 球 人 口 的 老 龄化 ， 白 内 障 的 发 病 率 以 及 患 者 的 总 数 都 将 继 续 不 断 增 加 。 联 合 国 测 算 从 1980 年 至 2028年 ， 55 岁 以 上 的 人 白 内 障 的 患 病 率 将 增 加 4 倍 。 因 此 白 内 障 的 发 生 机 制 一 直 以 来 受到 了 广 大 研 究 学 者 们 的 极 大 重 视 。晶状体是一个透明、屈光性无血管器官，其主要功能是屈光、会聚光线、在视网膜上成像。受不断增长的年龄及某些外部因素的影响，晶状体的透明性逐渐下降甚至
