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7、胃癌中的表达及其与微血 管密度的相关性J肿瘤学杂志，201l，17(4)：241_244 Deobea C，Renalier MH，Bergalet J，et a1MiR-29a downregulation in ALK-positive anaplastic large-cell lymphomas contributes to apoptosis blockade through MCL一1 overexpmssionJBlood，201 1， l17(24)：6627-6637 靶向肿瘤腺病毒介导IL一24抑制人胃癌细胞增殖 曹亚玲，黄茂涛，黄一，季代金，冯早明，李学成，陈 陵 (收稿
8、日期：2013-07-22) 摘要 目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子特异驱动IL一24的重组腺病毒(AdphTERTIL24)对人胃癌 SGC-7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将AdphTERTIL-24感染人胃癌SGC一7901细胞，采用荧光实时定量PCR及 Western blot检测IL24表达；采用CCK一8方法检测细胞生长曲线；采用Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与 以PBS代替病毒液处理的SGC一7901细胞相比，感染AdphTERTIL一24的SGC一7901细胞内IL一24表达明显升高(P005)。 A lI -24 图1 Western
9、blot检测各组细胞内IL一24的表达 22 Western blot检测各组细胞内IL-24的表达 采用AdphTERTIL-24感染hTERT阳性的人胃腺癌 SGC-7901细胞后，借助Image J软件进行定量分析 可见，与PBS空白对照组相比，AdphTERTIL-24组 IL24表达显著上调(036 4-005 VS006 4-002， P005)，见图1。 23 AdphTERTIL-24抑制SGC-7901细胞增殖 将AdphTERTIL-24及阴性对照Ad-Laz感染SGC一 7901细胞24 h后，采用CCK8检测细胞生长曲线 (图2)。结果表明，与PBS空白对照组相比，感染
10、了 AdphTERTIL-24的SGC-7901实验组细胞增殖受到 明显抑制。在第5、6 d，实验组吸光度显著减少 (P 005)。 3讨论 已有文献报道IL24是一个抑瘤基因，对多种 肿瘤有抑制作用，包括肺癌 、骨肉瘤细胞 J、胶质 瘤 J、肝癌 。和胃癌等 。IL24发挥抑瘤作用的 机制，包括抑制增殖、诱导凋亡，增加肿瘤细胞对化 疗的敏感性，抑制肿瘤转移等 。肿瘤的基因治疗 一方面需要选择强效广谱的治疗基因，另一方面要 尽量选择具有肿瘤靶向性的载体 。人端粒酶逆 转录酶(human telomerase reverse transcriptase， hTERT)在几乎所有胃癌组织中强阳性表
11、达，而在正 常组织中不表达或低表达 。以hTERT启动子特 异驱动治疗基因是实现肿瘤靶向基因治疗的较佳策 略_l 。目前利用hTERT启动子靶向肿瘤表达IL-24 的重组腺病毒对胃癌的作用尚不明确。本研究采用 在前期实验中成功包装的hTERT启动子特异驱动 IL-24重组腺病毒(AdphTERTIL24)，感染hTERT 阳性的人胃腺癌SGC7901细胞株，发现与PBS空白 对照组相比，AdphTERTIL24可显著上调SGC 7901细胞内IL一24的表达水平(P005)，表明Ad phTERT-IL-24上调SGC-7901细胞IL一24的表达，是 由于其携带的靶基因IL一24所致，而非腺
12、病毒感染 引起。 进一步采用CCK8方法检测IL一24对SGC-7901 细胞的增殖情况，发现与PBS组相比，感染Ad phTERT-IL一24后，SGC-7901细胞增殖能力在第1 4 d抑制不明显，但第5、6 d受到明显抑制；而感染 AdLacZ组始终与PBS组无明显差异。表明采用 AdphTERTIL一24上调SGC-7901细胞内IL一24表达 水平，即可明显抑制SGC-7901细胞增殖能力。在第 14 d时，SGC一7901细胞未受到抑制，可能是因为 腺病毒感染后，从DNA转录IL24 mRNA进而翻译 IL一24蛋白，需要24 d的时间，并且，也需要IL-24 表达达到一定强度才能
13、发挥抑制肿瘤细胞增殖的作 用。为进一步观察IL_24对SGC-7901胃癌细胞侵 袭能力的影响，本课题进行了Transwell小室侵袭实 验。结果发现，感染AdphTERTIL24的SGC-7901 细胞的侵袭能力只有PBS组的一半(P005)。表明 具有肿瘤靶向性同时负载IL一24的重组腺病毒Ad一 0 O O 0 0 0 0 O 0 0 言 0”毫 量王。盥 l2 西南国防医药2014年1月第24卷第1期 phTERTIL-24，可显著抑制胃癌细胞的增殖及侵袭 能力，在胃癌的基因靶向治疗中具有潜在应用价值。 【参考文献】 2 3 4 5 6 7 8 Shi YZhou YThe role
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