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1、,亚光市场部 张天成,LPT制片技术及发展前瞻性,宫颈癌现状,宫颈癌发病率在全球女性恶性肿瘤中排第二位，全世界每年约有45万名妇女罹患宫颈癌。 在我国，每年新发病例约15万，约8万患者死于宫颈癌。,宫颈癌是一种可防可治的癌症,宫颈癌的发展是一个长期的过程，若能在病变早期进行筛查，就能阻止癌变的发生、发展。宫颈癌筛查的重点，是在无自觉症状时期，发现癌前病变，在非癌时期及早进行临床诊治，从而预防、阻止癌变的发生。,TCT产品发展的过程巴氏涂片 巴氏涂片指宫颈脱落细胞涂片 ，是指从子宫颈部取少量的细胞样品，放在载玻片上，然后在显微镜下研究是否异常。等级划分：分5级,自60多前问世以来，巴氏涂片使当时
2、宫颈癌病发率在世界范围 内下降了70%90%。,TCT产品发展的过程,TCT-新柏氏（ThinPrep 2000）于95年通过FDA认证，推出市场用于临床，1999年进入中国市场。在美国已逐步被替代。主要方法是将宫颈脱落细胞洗入放有细胞保存液的小瓶中，刮片毛刷在小瓶内搅拌数十钞钟，再通过高精密度过滤膜过滤后，将标本中的杂质分离，取滤后的上皮细胞制成直径为20mm薄层细胞于载玻片上，95%酒精固定，经巴氏染色、封片，由细胞学专家肉眼在显微镜下阅片，按TBS法作出诊断报告。该设备一次处理一份标本。,TCT产品发展的过程,随后，美国生产商三路影像公司（TriPath Imaging）正式推出LCT-
3、超柏（AutoCyte/PrepStain），即自动细胞学检测系统（autocyto prep cytologic test），又称液基细胞学检测系统（Liquid-based cytologic test, LCT）。它于99年通过FDA认证，正式推出美国市场，2001年底在我国注册，进入中国市场。它的基本方法是将收集的细胞保存液，通过比重液离心后，经自然沉淀法将标本中的黏液、血液和炎性细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径为13mm超薄层细胞于载玻片上。,制片类型,膜式离心沉降,TCT液基超薄制片技术,以美国新百氏机器为代表主要采用了物理震动和高速旋转技术首先将细胞和粘液打散分开；然后在附有
4、膜8微米孔的膜面的膜筒中，加一负气压，将细胞吸附在膜面上，小于8微米的杂质和无用的液体从膜筒中排掉；再在膜筒的膜面压在经过处理的玻片上，并在膜筒中加一正气压，将细胞转移到玻片上，形成薄层细胞玻片。,离心涂片法,以赛涂、利普，为代表。由人工进行操作，进行离心分离，人工操作进行细胞提取，人工操作进行离心制片，,自然沉降法,以美国LCT-超柏（AutoCyte/PrepStain） 为代表。首先利用专门的设备将取材后的保存液经过抽拉破粹后，在注入到事先注入有一定容量的分层液的上面。手工将其放到离心机上进行2次离心分层；然后人工除上清，再一次放到离心机上形成细胞团，再由人工放在振荡器上混匀。最后放到制
5、片染色机上进行自动制片和染色。,总目标,为了清晰的观察分析细胞的组织形态，必须在液基中将细胞大量提取，并将细胞薄层排列在组织玻片上，所谓细胞薄层制片，并经细胞染色后，供临床观测分析和诊断。其中关键性技术主要是：A 由于细胞与粘液等组织裹在一起，要得到比较清晰的细胞制片，就必须将细胞与其它不用的粘液等分离开来；并有效提取。B 制成薄片：为了有效的在显微镜下对细胞结构、形态进行观测和分析，细胞薄层不能厚，否则极大影响观测效果。C 自动化制片，最大限度排除人为干扰。,超柏制片机制片方法,1. 核对保存液标签与申请单信息.2.确认无误后将保存液置于标本架上；取已打印的条形码，一式三份；一份粘贴在申请单
6、上，一份粘贴在离心管上，第三份备用，将离心管置于标本架对应标本后面.3.将所有标本核对完毕，依次放到标本架上。,超柏制片机制片方法,4. 依次向离心管内加入梯度密度液；5.震荡标本小瓶，双手各握1只小瓶，在震荡器上震荡1520s，并相应变换小瓶震荡的角度；6.取注射器置于标本架对应标本前面。,超柏制片机制片方法,7.用标本转移机将小瓶中的保存液转移缓缓加至离心管内梯度密度液的上层 .,制片方法,8.将转移后的离心管从标本架上取下，依次放到离心盒内，待所有离心管置于离心盒内；9.将离心盒放到离心机内，配平，进行一次离心.,制片方法,10.将一次离心完的离心盒取出，利用真空泵用黄Tip头吸取离心管
7、上层的液体，注意不要吸到下层的液体 11.将离心盒放到离心机，进行二次离心 .,12.离心结束后，用手将离心管内的液体轻轻倒掉，注意不要将底部收集到的上皮细胞倒出 13.震荡器上震荡离心盒，使收集的上皮细胞充分分散为个体细胞，时间：1520s,14. 将载玻片平铺于制片板上，玻片磨砂面朝上，光滑面朝下。将制片舱依次拧到制片板上，将第三份条形码依次贴到玻片磨砂面上。,15.将薄片制片机中4根管束依次伸到相应的试剂瓶中.16.将震荡后的离心盒放到薄片制片机相应位置 .,制片方法,17.开启电脑、薄片制片机、压力泵，启动后，按照提示信息，进入程序主菜单，选择涂片和染色。,制片方法,18.薄片制片机运
8、行，首先向离心管中加入1ml的缓冲液，依次加入完毕。Z杆抓取白Tip头，在离心管内混合8次，移取标本至制片舱内，依次转移标本，待标本全部转移至制片舱内，静置10min，进行染色。,制片方法,19.每一板染色完毕，报警，将制片板从薄片制片机上取下，依次拧下制片舱，取出玻片，放在玻片架上（玻片架浸泡在无水乙醇、异丙醇等体积混合的液体中）,制片方法,20.将玻片架无水乙醇、异丙醇等体积混合的液体中取出，控去液体，置于二甲苯的染色缸内，依次取出每张玻片，在载玻片粘附细胞处，滴两滴中性树胶，盖上盖玻片（注意封片时不要有气泡），晾干玻片 .,产品介绍,1、 高检出：高度病变以上(HSIL+)的检出率比传统
9、涂片提高了64.4%，低度病变提高109%。2、取样有效率高： 采样刷的刷头与所采集的细胞一起放入保存液瓶中，经过震荡仪震荡，保证采样刷上的细胞100%落入保存液中。3、特制保存液瓶： 瓶内装10毫升保存液。有效期24个月。主要成分为低浓度乙醇(24%)。常温下保存样本3周。不灭活。制片过程无须开盖，不造成空气污染，无毒副作用。4、设备配置：自动完成全部制片过程，操作简便，无需多台设备，占用空间少。5、前期处理：标本不用开瓶，直接上机处理。无需前期复杂处理，提高工作效率。,产品介绍,6、制片原理先进： 变频技术与离心有机结合，使标本液分层，富集（浓缩）92%以上的有效诊断细胞。根据病变细胞核浆
10、比增大，比重增大的原理，按比重区分细胞。利用重力快速沉降法制片，诊断细胞自上而下落在载玻片上，增加捕捉病变细胞的机率，最完美的保留各类细胞，并保证细胞的自然形态。7、制片过程标准自动化：在制片过程中，液基细胞制片全自动完成无需人工干预，制片机设定程序，完成标本分散，标本液分层，细胞收集，制片，一键完成全过程。8.先进的制片技术： 采用重力快速沉降法制片。载玻片置于标本液底部，标本液最底层的细胞（主要是核浆比较大的病变细胞）粘附在玻片上。因为细胞自上而下地沉降，即使标本液细胞量特别少时，亦可保证载玻片上捕捉到足够的诊断细胞。 9、涂片直径大：制片的超薄层细胞直径为20毫米，收集更多的病变细胞，提
11、高检出率。,产品介绍,10、细胞数量范围广：对细胞要求的数量控制范围为5千至12万，同时可根据医生要求，通过计算机调节，控制上片的细胞总量，从而达到薄层制片的效果。 11、制片效率高：单片或大批量制片过程不需要人工值守。每批次可制片1-4片。快速制片每张紧需一分钟，平均每小时制片60张。每工作日可制片并染色约480张。 12、可重复制片：可根据科研和临床需要，为同一标本制做8张以上质量相同的薄片。 13、兼容性强：制片剩余标本可直接用于进行HPV检测。14、市场发展前景可持续：沉降制片是换代产品，是细胞病理学发展的主流方向。,亚光TCT-3000液基细胞薄层制片机,性能特点： 创新技术：三年研
12、发成果、五大亮点、七项专利保护 液基细胞制片全自动完成无需人工干预。 专利制片采样器，物理破碎，能保持细胞原形态，呈现丰富的细胞类型。 精确控制提取上片细胞总量。 使用过程中医务工作者对标本无直接接触，无污染。 （ 减少人工步骤，节省人力技术资源，适合大批量宫颈癌筛查） 变频控制快速沉降法。独一无二：外形设计、制片方法、自动化，体现特异性和产品差异化。,主要性能：,1.粘液破碎：自动2.细胞分层：自动*3.细胞转移：自动4.沉降制片：自动* 5.制片厚度：高、中、低可调6:滑盖工作模式:自动技术参数：1.分层离心转速：2000r/min2. 粘液破碎次数：7次（可自定义设置）3.沉降制片时间:
13、 1分钟/片*4. 标本转移量：0.81.5ml可控*5.自动制片：封闭式6.一次制片数量：4组*7.滑盖自动关闭时间：2min*8制片方式：变频控制快速沉降 *9.制片细胞可视面积：20*10.制片完成：蜂鸣提示11.机器尺寸：660mm*445mm*505mm12. 机器重量：30kg13.设备功率：150W,产品特点其优越性体现：一机操作、微处理器控制、全自动完成一机操作、微处理器控制、全自动完成；妇科宫颈样本无需任何前期预处理过程；工作前更有细胞采集量控制微调A/B/C三档可供选择，精密制片，力求完美。样本直接上机，由微处理器控制完成细胞均匀化、细胞采集、细胞转移的制片过程；样本无需多
14、次转移，不遗漏病变细胞。消耗材料无需实验室二次处理，如玻片需试剂涂膜处理等；自动将细胞转移到玻片上，自然快速沉降，形成清晰易读的单层细胞，；微处理器控制使细胞涂片含7万个以上细胞；系统可存储四套不同的程序，以满足用户对不同组织处理的工艺要求。大屏幕中文液晶显示，操作系统使用简便。,妇科取样指南,您的取材是提高阳性发现率的首要条件！取样对于整个制片过程中是非常重要的一个环节，最终制片效果和诊断的准确率需要您的支持和配合高抬贵手，一切将如此完美简单。【患者准备】病人在检查时应避开经期，取材前24小时停止性生活、停止外用药、不冲洗。【标本采集】2、 医生用窥阴器扩开阴道后先观察，如果宫颈表面分泌物与
15、血液较多时，应先用棉签轻轻粘去分泌物与血液，不可用力擦。3、 取材应在直接观察下进行，宫颈刷的尖端插入宫颈管内，两边紧贴宫颈管的外口，保证宫颈刷对所取部位有一定的压力，以取得足够的细胞成分。并按同一个时针方向转动扫帚状取样器5周整，切勿来回转动。4、将扫帚状取样器推入保存液小瓶中涮洗刷头，则要反复旋转迫使刷毛全部散开，共10次，最后在溶液中快速地转动扫帚状取样器以进一步将细胞标本漂洗下来。5、拧紧瓶盖，使瓶盖上的扭矩标志越过瓶上的扭矩标志线为止。6、将患者的名字和样本号码写在瓶上空白标签处。7、将患者的个人资料和病历填写在细胞学检验申请上，字迹工整，尽可能提供相关的临床信息。8、将样本保存瓶和
16、亚光申请单统一管理，送往检验科室.【标本保存】装有标本的保存液瓶在常温下（15-30）可保存1个月，如放入冰箱内（4-8）可保存时间更长。,温馨提示：临床取样常见问题处理原则Q：分泌物较多时，如何处理？A：分泌物较多时，可在取材前用棉签轻轻粘去，不可用力擦，否则会丢失宫颈上皮细胞。Q：宫颈糜烂病人如何处理？A：此类病人取样时容易出血，应用宫颈刷斜着滑向宫颈，不要直接用力，尽量避免出血。Q:对宫颈肥大且糜烂面积较大的病人如何处理？A: 请注意取材全面，刷丝尽量做到覆盖整个宫颈，特别是鳞柱交界处，必要时可用两个宫颈刷。Q：取样过程中宫颈出血如何处理？A：轻微出血，可继续取样；如果出血活跃，应立即停止。Q：重复取样的时间如何确定？A：在一般情况下，尽量避免短期内（小于3个月）重复取材，以免出现假阴性结果。,
