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1、1罗哌卡因对外周血 CD3 CD4 CD8 CD20 IL-2 INF- 影响的研究作者：徐明清黄燕虹张志张伟平刘文粤 【关键词】 罗哌卡因摘要：目的：观察硬膜外麻醉下行腰间盘突出髓核摘除术病人外周血免疫相关因子 CD3、CD4、CD8、CD20 、IL-2、INF- 的含量变化，探讨罗哌卡因对淋巴免疫的影响，从而指导围术期麻醉用药及管理。方法：收集 30 例运用罗哌卡因进行硬膜外麻醉实施腰间盘突出髓核摘除术患者麻醉用药前 1h、术后 24h 及术后 48h外周血，利用流式细胞仪测不同时相CD3、CD4、CD8 、CD20、IL-2、INF- 的含量。结果：术后患者CD3 无明显变化，CD4、
2、CD20、IL-2、INF- 含量升高，CD8 含量降低。结论：运用罗哌卡因麻醉的术后患者 T 淋巴细胞及 B 淋巴细胞增多，细胞因子分泌增加，无明显免疫抑制。关键词：罗哌卡因；免疫；麻醉The Effects of Ropivacaine on the Content of CD3 CD4 CD8 CD20 IL-2 INF-2Abstract： Objective: To study the effect of ropivacaine on lymphocyte immunity. Method: 30 patients undergoing lumbar diskectomy suffe
3、r epidural anesthesia with ropivacaine. Venous blood samples were collected to measure the contents of CD3, CD4, CD8, CD20, IL-2, and INF-. Result： After operation, the contents of CD4, CD20, IL-2 and INF- were increased, that of CD3 was constant and that of CD8 was decreased. Conclusion： Ropivacati
4、ne has not marked influence on lymphocyte immunity.Key words：Ropivacaine; Immunity; Anesthesia罗哌卡因是一种较新的长效酰胺类局麻药1 ，目前主要用于硬膜外麻醉和手术镇痛，运用范围较广。目前的研究表明麻醉药物及疼痛应激反应对手术病人细胞免疫、体液免疫及细胞因子存在一定的影响2,而围手术期患者免疫功能的状态对术后病人的感染、肿瘤扩散及预后具有重大意义。本研究分析了运用罗哌卡因进行硬膜外麻醉实施腰间盘突出髓核摘除术前、术后病人外周血免疫相关因子 CD3、CD4、CD8、CD20、IL-2、INF- 的含量变
5、化，为罗哌卡因更好的运用提供参考。31 材料与方法1.1 一般资料：择期行实施腰间盘突出髓核摘除术病人 30例,ASA III 级，男 22 例，女 8 例，年龄 1848 岁。1.2 麻醉：病人于 T12L1 或 L12 硬膜外穿刺，成功后，向头侧置入导管 34cm，注入 0.75%罗哌卡因，麻醉平面控制在T105，术中监测 ECG、SpO2 和 BP。病人术中输注林格液，未用止血药物、代血浆或输血，控制输液量及输液速度，维持血液动力学平稳。1.3 流式测定：分别于麻醉用药前 1h（T1） 、术后24h（T2）和术后 48h（T3）抽取静脉血 2ml，加入 EDTA-2Na 抗凝管中，24h
6、 内进行流式细胞仪检测。采用美国 BD 公司 FACScan型流式细胞仪检测，所用流式试剂为 BD 公司提供。CD3、CD4、CD8 及 CD20 测定方法为：取 200 l 抗凝血，加相应荧光标记单抗 20 l，放置 30 min，加红细胞溶解液 1 ml，待其透明后 3 min 离心（ 2000 r/min，4 min） ，弃去上清，荧光洗液（PBS0.1NaN3 叠氮钠5 小牛血清）或 Hanks 液 1ml 洗 2遍，0.5 ml 洗液悬起，上机，测定。IL-2 和 INF- 的测定方法为：淋巴细胞活化以后才分泌细胞因子且迅速分泌到细胞外。因此先利用刺激剂 PMA 体外激活淋巴细胞，然
7、后用 Monensin 蛋白转运抑4制剂阻止细胞因子分泌到细胞外，使细胞因子在细胞内滞留到一定的量，再采用流式细胞术细胞内抗原标记进行检测。1.4 结果统计：计量资料以均数标准差表示，计数资料应用 X2 检验， P0.05 为有显著性差异。2 结果术后患者 CD3 无明显变化，CD4、CD20、IL-2、INF- 含量升高，CD8 含量降低。具体统计结果见表 1、2。表 1 CD3、CD4、CD8 含量变化表 略表 2 CD20、IL-2、INF- 含量变化表略3 讨论手术期间，病人的免疫状况受诸多因素影响，情绪焦虑、疼痛、麻醉、手术应激和感染等因素都会影响病人的免疫状况，引发不同组分淋巴细胞
8、在外周血循环中的分布，改变细胞内因子的分泌。目前有研究表明麻醉存在一定的免疫抑制作用，影响病人术后的恢复3，4 。5T 淋巴细胞是机体免疫的重要成分，T 细胞与其他细胞及细胞因子间的相互作用共同完成免疫识别、活化及杀伤等功能，Th 细胞可刺激 B 细胞产生抗体并辅助其它 T 细胞完成免疫反应。 Ts 细胞则具有免疫抑制的功能，Th 与 Ts 细胞相互协调，保证体内免疫功能的正常。B 细胞介导机体内体液免疫应答，B 淋巴细胞与 T 淋巴细胞相互作用并在 Th2 细胞辅助下被激活，细胞增殖，成熟并产生抗体，参与体液免疫应答5 。白细胞介素 2(IL-2)是机体内重要的 T 细胞生长因子，是保障机体
9、正常免疫功能的关键，具有多种生物学功能。如：能够维持活性 T 细胞增生，诱生 LAK 细胞，促进 B 细胞分泌抗体，促进 NK 细胞产生干扰素，能提高 TH 细胞数与功能来增强机体的免疫功能等. 与其他的细胞因子，如：sIL2R，IL-6，IL-1，IL-4，TNF 等形成动态免疫调节网络，维持机体正常的免疫调节功能。INF- 是重要的生长负调节因子，兼有抗病毒复制，抑制肿瘤细胞增殖，调节淋巴系统的功能，增强自身免疫力，INF- 是主要的巨噬细胞活化因子（macrophage-activating factor，MAF） ，促进巨噬细胞吞噬能力和炎症反应，并可直接促进 T、B 细胞分化和 CT
10、L 成熟，刺激 B 细胞分泌抗体，从而增强机体免疫机能。诱导巨噬细胞生成 NO 的功能。在 TNF 与脂多糖的适宜刺激下，INF-可作为 NO 生成的合适诱导剂，对抑制肿瘤组织增殖与心血管重塑6具有重要意义。同时 INF- 对维持机体自身免疫的稳态具有作用。在本研究中，术后病人 CD4、CD20 显著升高，而 CD8 呈下降趋势，具免疫抑制功能的 Ts 细胞浓度下降， Th 细胞增多，B细胞增加，这表明患者的 T 细胞及 B 细胞反应明显增强， 同时还观察到细胞因子 IL-2 和 INF- 呈逐渐上升的趋势，这与 CD4 的变化是相符和的，表明病人体内出现较多的 Th0 细胞向 Th1 细胞分
11、化，Th1 细胞分泌大量的 IL-2 和 INF- 增强体内的细胞免疫。通过本研究表明罗哌卡因对病人的 T 淋巴细胞及 B 淋巴细胞无明显抑制作用。参考文献：1Concepeion M，Arthur GR，Steele SM，et al. A new local aneathetic, ropivacaine, its epidural effects in human . Anesth Analg, 1990, 70: 80-85.2焦志华，马君志. 麻醉、手术对肿瘤患者细胞免疫的影响. 国外医学，麻醉学与复苏分册,2002,23：303-305.3薛静波, 吴虹 ,鲁迎年,等. 大肠癌患者
12、手术前后外周血 T 淋巴细胞亚群和血 TNF 水平的检测及意义J.中国肛肠病杂志,71999,19(6): 12-13.4侯建民, 陈克能 ,王社军,等. 全麻下经胸食管癌切除前后病人外周血 TNF、T 淋巴细胞及亚群的改变J.中华麻醉学杂志,1998,18(5): 283-285.5Suni MA, Ghanekar SA, Houck DW, et al. CD4 + CD8 low T lymphocytes exhibit enhanced cytokine expression, proliferation and cytotoxic activity in response to HCMV and HIV-1 antigens J. Eur Immunol, 2001, 31: 512-2520.
