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1、11 酶反应器：酶催化反应的容器或设备2 微水相：只含有微量水的反引发体系常指非水相反应体系中酶由于自身所带水而形成的微量水环境。3 亲和标签：在基因工程中结合蛋白与目标蛋白融合表达得到的产物，通过亲和层析得到分离与固定所加入的结合蛋白，即为基因工程中的亲和标签。4 亲和标签优点：使微量的目标蛋白得到分离， 利于纯化目标蛋白 使母白蛋白得到固定5 酶的不足：酶的稳定性较差酶的一次性使用 产物的分离纯化比较困难6 固定化：把酶限制在一定的空间中。作用： 酶的再利用，可反复或者连续使用较长时间，提高酶的利用价值，降低生产成本易于分离不需要进行纯化 提高酶在单位体积的含量，增加酶的稳定和活性。7 分
2、离纯化的方式/依据：盐析、盐溶（蛋白质溶解度） 、亲和层析（亲和力不同） 、HPLC（分子极性） 、凝胶过滤（蛋白质的大小） 、分子交换树脂（蛋白质的电荷大小） 。8 亲和标签涉及到生物技术：固定化技术、基因工程技术、亲和分离技术。9 血糖的测定：葡萄糖氧化酶是一种催化葡萄糖和氧的反应，生成葡萄糖酸和双氧水的氧化还原酶，测定时取一定量的血样或尿液样本，加入适量的葡萄糖氧化酶，在一定条件下反应一段时间，然后测定反应生成葡萄糖酸的量，从而作为糖尿病临床诊断的依据；也可以用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的联合作用，检测葡萄糖的含量，诊断糖尿病（葡萄糖）葡萄糖氧化酶和过氧化物酶还可以与邻联甲苯胺一起进行固定
3、化，在滤纸条上制定酶试纸，将酶试纸与样品接触 1060 秒即可定色，从颜色的深浅判断葡萄糖的含量10 工业上广泛应用脂肪酶的原因： 可用于多种物质的合成与水解（底物广泛性）脂肪酶作用具有位置选择，手性选择，并且可形成两相（位置异构性、立体异构性）可用于催化合成和水解产物为两相（脂肪酸溶于水，脂不溶于水）在有机溶剂中非常稳定，脂肪酶可用于脂化，转脂，聚合，内脂化11 脂肪酶的影响因素：长链和中长链脂肪酸对酶的影响酶对脂肪酸立体结构的选择性不一样乙醇、香叶醇的抑制作用醇和酸的比例，乙酸对反应同样存在抑制作用。12LGP 对脂肪酶活性的影响：在 1gp 小于 2 的极性溶液中，由于强的极性溶剂容易多
4、去酶蛋白周围的必须水，酶容易失活，因此不宜做酶促反应的介质；酶在 24的非极性有机溶剂中具有较高的酶活力，所以一般认为酶在疏水性的介质中反应活性高，酶催化在非极性疏水性有机溶剂中更容易进行。13 固定化和非水体系可以提高酶活性因为其减少了酶分子的接触机会，使其聚合概率减小。有机溶剂优点：获得高产量 可使用非极性底物 有机溶剂可防止许多副反应 在热力学上有助于合成而不是水解在很多反应中化学稳定性比在水中好14 酶除了在水中还可以在离子液有机溶剂、超临界流体中催化有机反应青霉素酰化酶的改造目的：更好抵抗胃酸降解，更好抵抗青霉素酶选择性15 测定生物样品中的胆固醇：以胆固醇氧化酶为基础的生物传导器的
5、生物酶细胞中包含固定化的胆固醇酯酶，分别用于测定样品中的胆固醇，如：将胆固醇氧化酶和胆固醇酯酶连接到胶原蛋白式传到多聚物巨阵上氧化还原反应发生在酶分层排列的薄膜上16 葡萄糖氧化酶的应用： 用于测定葡萄糖用于食品杀菌用于生产低醇葡萄酒是面包松软17 纺织造纸中用双氧水漂白处理的好处： 减少漂白，节约劳动力减少亚硫酸钠、高锰酸钾等漂白剂的应用，保护环境。18 青霉素酰化酶生产：批次生产 厌氧搅拌用于降温过程，种子培养对数生长期，降低温度，提供 15%氧分压，解除抑制。19 提高青霉素酰化酶产量的方法： 经典突变和选择基因工程重组填空1 酶联免疫反应检测灵敏度高于 色谱检测技术，是因为前者用了 酶
6、催化的放大效应。2 水解酶催化分解反应，但在一定条件下可以催化该反应的逆反应，因此理论上任何上可以用来催化的相应的分解酶可以用来催化相应的合成反应3 加酶洗衣粉中经常添加蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶，从而提高洗衣效果。4 谷丙转氨酶常用于肝炎的诊断，谷草转氨酶常用于心脏病的诊断。5 酶的有机相催化通常不能用如乙醇，丙酮的有机溶剂作为反应体系，这是因为这种反应溶剂会使酶失活。如2果必须使用该类溶剂体系需要对酶进行固定化处理，可以提高酶在溶剂中的稳定性。6 酶反应器设计大致分为三步，第一部选择反应器类型，第二步计算反应器大小再根据酶反应条件设计反应器的辅助设施。7 酶反应的调节因子：反应体系中所有对反
7、应动力学产生影响的因子8 的对应体选择性：酶对立体结构互为对应体的两种异构体化合物的选择性9 生物催化：用酶或固定化细胞催化化学反应10 酶的交联技术：用戊二醛等交联剂将酶聚合成一定粒径的聚合体的过程11 酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及附属设备12ELISA：酶联免疫吸附分析13 酶制剂：酶及其制品14 酶的固定化：用物理和化学的方法将酶固定在固体表面的方法15 离子液体系：highly polar solvents composed usually by a rather simple anion and a complex organic cation1.淀粉酶为目前产量最高、用途最
8、广的酶，说出它四种以上的应用发酵前的淀粉糖化；糖浆制备；织物退浆；果汁饮料的制备；面包及糕点的制作等2.举例说明理想的酶制剂是如何获得的？基因工程微生物生产凝乳酶可以作为理想酶制剂获得的典型，最早的凝乳生产用酶是最简单地从牛胃中获取，微生物酶的筛选并发酵生产的凝乳酶效果较牛胃凝乳酶差很远，现代基因工程技术的发展，实现了品质和质量的统一，通过转基因技术，现用凝乳酶大多利用基因工程菌生产。3.何为微水相体系？如何构建？酶脱水后与疏水溶剂组成的体系可以通过酶冷冻干燥或粗酶液经丙酮沉淀获得脱酶，加入正己烷等疏水有机溶剂构建4.说出目前市场几种主要的酶制剂及用途淀粉酶，用在制糖、淀粉糖化、纺织品去浆等方
9、面；纤维素酶：用在牛仔布水洗、丝光棉丝、羊毛的制造等方面；蛋白酶：用在皮革处理；果胶酶：用在果汁澄清5 说出目前获得理想工业用酶的几个途径简单的从自然界动植物中获取；微生物酶的筛选并发酵生产；酶分子设计；利用基因工程菌生产6 为什么水解酶是理想的工业化用酶？酶活高、不需辅酶、容易获得7 说出常用的葡萄糖测定的几种方法？你认为哪种方法能专一性的测定葡萄糖，因而有较好的选择性？请说出该测定的基本原理，测定的基本步骤。葡萄糖氧化酶法，斐林试剂等利用葡萄糖的还原性测定。葡萄糖氧化酶法能专一性的测定葡萄糖，因而有较好的选择性。原理：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下与氧反应生成葡萄糖和双氧水，可以通过氧电极测
10、定氧的消耗量，而得出葡萄糖的量；也可以再利用过氧化氢酶催化双氧水生成水和原子氧，原子氧将无色的氧受体 4氨基安替吡啉生成红色化合物，红色化合物的颜色与葡萄糖浓度成正比。在 500nm 波长测定光密度，参照葡萄糖标准液的 OD500 即可计算样品中葡萄糖量。具体步骤为： 1、去一定体积的样品。2、加入适量的葡萄糖氧化酶。3、加入 4氨基安替吡啉。4、在 500nm 波长测定光密度。5、参照葡萄糖标准液的 OD500 即可，计算样品中葡萄糖量。综合设计题：青霉素 G 酰化酶催化青霉素 G 到 6氨基青霉素烷酸和苄基乙酸，前者为酶的非竞争抑制剂，后者为酶的竞争抑制剂；青霉素 G 酰化酶对 ph 特敏感，其最适 ph 为 7.5-8.5，请根据上述条件，从下图选择合适的酶反应器，并说出理由，选择反应器 B，因为酶的产物为酶的非竞争抑制剂和酶的竞争抑制剂，因此在反应进行到一定程度必须将产物从反应体系中移走。图示反应器均满足上述条件，因青霉素 G 酰化酶对 PH 特敏感，其最适 PH 为 7.5-8.5，酶反应必须进行 PH 调节，B/D/E/F 比较适合，因连续反应的动力学上不适合酶反应，因此 B 为合适的反应器。
