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1、项 目 高密度胆固醇（HDL ）方 法 直接测定法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录 A: 参数1. 检测原理1. 试剂 1 使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。胆固醇酯酶 胆固醇酯 + H2O - 胆固醇 + 脂肪酸 胆固醇氧化酶 胆固醇 + O2 - 胆淄烯酮+ H2O2 过氧
2、化氢酶H2O2 - O2+H2O 2. 试剂 2 中的变性剂释放出高密度脂蛋白后，对 HDL 进行测量。胆固醇酯酶 胆固醇酯 + H2O - 胆固醇 + 脂肪酸 胆固醇氧化酶 胆固醇 + O2 - 胆淄烯酮+ H2O2 过氧化物酶 H2O2 + 4-氨基安替比林 + HDAOS - 醌染料 + 4H2O 在 600nm 醌染料的吸光度的与胆固醇的含量相关。 2标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹 12h，不饮酒 24h 后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后 3 个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血
3、脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前 24 小时内不做剧烈运动。2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐 5 分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过 1 分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3 抗凝剂：肝素或 EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。2.4 标本处理：血标本室温放置 30min45min 后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试
4、管加盖 2-8保存。3试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司 HDL 试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组 成 初 始 浓 度R1：缓冲液 100mmol/L PH 7.04-氨基安替比林 1mmol/LMgCl2 100mMR2：缓冲液 100mmol/L PH 7.0HDAOS 1mM胆固醇脂酶 1KU/L胆固醇氧化酶 1KU/L过氧化物酶 4KU/L3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的 40 项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的 2SD 范围，需要全点定标。3.3 试剂与校准血清的稳定性：
5、原包装试剂储存在 2-8至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存 30 天。试剂储存在 18-22稳定 28 天，试剂应避免污染。试剂 R1 和 R2 颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。HDL/LDL 标准液在 2-8储存至标签所示失效日期，复溶后 -20保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。4仪器KONELAB 30 型号仪器。性能：波长 600nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到 0.001ABS 以上。5操作样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录 A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6计算A 测定C = C0A
6、 标准式中：c 测定血清高密度胆固醇浓度，mmol/L；A 测定 标本管吸光度；A 标准 标准管吸光度；CO 校准血清中高密度胆固醇浓度，mmol/L；A A2 A17操作性能7.1 精密度：批内 CV1.78%，批间 CV 3.89%。7.2 准确度：检测结果的相对不准确度10%。7.3 灵敏度：高密度胆固醇浓度为：2.0mmol/L 时，显色吸光度 A600nm 约 0.2190.261。7.4 可报告范围：血清与试剂用量之比为 1:90:30 时，测定上限为 3.9mmol/L。7.5 特异性：测量值在给定值的 90%-110范围内。7.6 干扰：内源性干扰物溶血为 1000mg/ml、脂血 2000mg/ml、黄疸 30mg/ml、抗坏血酸 300mg/ml 对测试结果无明显影响。8参考值大于 1.15mmol/L9临床意义高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒用于定量测定血清中高密度脂蛋白的含量。HDL 的作用是将胆固醇运输到肝脏。HDL 的含量是评价冠心病的危险度的一个重要因素。血清中 HDL C 水平与冠心病发病率呈负相关，HDLC 或 HDLC/TC 比值能更好地预测心脑动脉粥样硬化的危险性。HDL C 降低见于以下疾病：（1）脑血管粥样硬化，冠心病。（2）急、慢性肝病，心肌梗死、外科手术、损伤等应激反应，糖尿病，甲状腺功能亢进或甲低，慢性贫血。附录 A: 参数
