《肺痨康对小鼠结核病模型的免疫指标观察》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肺痨康对小鼠结核病模型的免疫指标观察（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1肺痨康对小鼠结核病模型的免疫指标观察作者：申金贵叶品良王帅卢润生魏座英【摘要 】 通过肺痨康(FLK)对实验性结核小鼠免疫指标的观察，研究肺痨康的免疫调节抗结核作用，为肺痨康治疗肺结核提供实验依据。 方法动物造模后，随机分为 FLK 高剂量组、FLK 中剂量组、利福平组，另设空白对照组，分别给予肺痨康、利福平、生理盐水灌胃 28 天，观察实验小鼠胸腺指数、T 淋巴细胞亚群、IFNr、IgG 改变情况。 结果FLK 高剂量组能明显增加小鼠胸腺指数（P0.05） ；FLK 高剂量组 CD4+T 细胞数显著升高(P0.01，P0.05） ；模型组 CD4+/CD8+比值显著降低，其差异有显著性(P
2、0.01)，FLK 高剂量组明显减轻 CD4+/CD8+比值下降，其差异有显著性(P0.01)；FLK 高剂量组增加小鼠结核模型血浆IFNr和 IgG 水平(P0.05) 。 结论肺痨康具有明显免疫调节抗结核的作用。 【关键词】 肺痨康；结核病；免疫功能Abstract: Objective To study the function of Feilaokang(FLK) in immune regulation and antituberculosis 2by observing the experimental mice immune indexes, offer experimental
3、 base for its treating lung tuberculosis. Method Randomly divide mice into groups of FLK in high dosage, middle dosage and Lifuping group, set another blank control group, respectively give them FLK, Lifuping and normal saline for 28 days, observe their thymus index, Tsublymphocyte, IFNr and IgG. Re
4、sult The highdosage group can markedly increase thymus index, as well as CD4+ and Tcell；theres no marked difference among all groups on CD8+; the CD4+/ CD8+ ratio is much lower with marked difference, highdosage of FLK can markedly relieve the decrease with obvious difference; FLK in high dosage can
5、 increase the level of IFNr and IgG. Conclusion FLK has marked function of immune regulation and anti tuberculosis.Key words: Feilaokang; tuberculosis; immune function肺痨康由蒸百部、白及、天冬、川贝、紫河车等十一味中药组成，它对肺结核，尤其对耐药性肺结核有较好的疗效1 。前期实验显示肺痨康对 H37RV 耐 RFP、耐 RFPINF 有较好的抗结核作用2 。现就肺痨康对实验性结核病小鼠免疫调节的作用观察如下。31 材料与方法1.
6、1 实验材料（1）实验动物：昆明种小鼠，雌性，体重 1822g，一级。四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所，合格证号：SCXK（川）200815 。 （2）实验药物：肺痨康水煎液，药品用常规方法煎煮，制备成含生药 1g/ml。所需药品均购自同仁堂药店成都分店。对照药物：利福平(成都锦华药业有限公司，批号：071101。配制方法：RFP 先用二甲基甲酰胺一滴溶解后，再用蒸馏水稀释。)。 （3）实验用菌：H37RV 标准菌（ATCC：27294 ） ，由中国疾病预防控制中心临床分中心提供。 （4）试剂：T 细胞亚群试剂盒(CD3 bs0765R,CD4 bs0647R，CD8 bs0648
7、R)均购自北京博奥森生物技术有限公司。IFNr 试剂盒、IgG 试剂盒均购自美国 ADL 公司。 （5）实验仪器：生化仪 VARIOSKAN 52510010，离心机 LcgendRT230V，光学显微镜 BX41。1.2 实验方法1.2.1 动物造模参照文献固定小鼠，尾部用 75酒精消毒，每只小鼠尾静脉注射 1mgml 的结核杆菌悬液 0.2ml，注射后穿4刺部位压迫止血 1min。1.2.2 动物分组动物造模后观察 1d，选用符合要求的 68 只小鼠按随机化原则分为 4 组：肺痨康高剂量、肺痨康中剂量、模型组、空白组、利福平组共 5 组，模型组 20 只，其余每组 12 只。1.2.3 给
8、药方法自由取水、饮食。造模后第二天给药，以临床用药剂量为标准，按小鼠与人的体表面积折算(0.0026)，空白对照组与模型组每日灌胃生理盐水 0.2ml10mg，连续灌胃 28d；利福平组、肺痨康高剂量组、肺痨康中剂量组按小鼠与人的体表面积折算，等剂量灌饲相应药液 0.2ml10mg，每日 1 次，连续灌胃 28d。1.2.4 标本采集与检测各组小鼠均于末次给药测量体重后，在清醒状态下，摘眼球取血，装人肝素抗凝的 EP 管中。并分离胸腺、脾、肝、肺。免疫组化方法测 T 细胞亚群，具体按照操作说明进行；胸腺重量指数检测参考文献3进行； ELISA 法检测小鼠血浆 IFNr及 IgG 水平严格按说明
9、书操作进行。51.2.5 统计方法计量资料结果以 xs 表示。统计学处理组间差异采用 t 检验。2 结果(1)实验小鼠 T 淋巴细胞亚群改变,见表 1。表 1 实验小鼠 T 淋巴细胞亚群改变(略) 与模型组比较， P0.01，P0.05;与正常组比较，P0.01;与利福平组，P0.05(2)肺痨康对小鼠胸腺重量指数的影响 实验结果,见表 2。 （3）对小鼠血清 IgG 及lFNY的影响，见表 2。表 2 肺痨康对小鼠胸腺重量指数、血清IgG 及（略）与正常组比较P0.01 ， P0.05P0.05；与模型组比较,P0.01,P0.053 讨论机体的免疫系统是个复杂精细的平衡系统,结核菌感染后,
10、机体的免疫状态是个动态过程。肺结核的发病和转归与机体的免疫功能有关已为公识。提高机体免疫功能主要体现在特异性 CD4T 细胞，CD4CD8的比值反应机体免疫内环境是否稳定的一个重要指标，两者平衡决定了免疫反应的总效应，若比值偏离正常值，说明机体免疫功能失调。6实验表明肺痨康有明显增加胸腺重量指数，以促进细胞免疫应答加强对结核分枝杆菌的消除；改善实验小鼠 CD4亚群比例及CD4/CD8比值的作用，明显提高实验小鼠 CD4T 细胞数量，说明肺痨康是通过 CD4T 细胞细胞毒性作用直接杀灭结核杆菌且通过其介导的免疫提高了巨噬细胞的杀菌效应，以达到治疗结核病的目的。由于 CD8T 细胞多在疾病晚期数量增加，所以本实验中CD8T 细胞各组间变化无显著性差异。肺痨康所具有的增加IFNr水平、IgG 水平的作用，进一步调整了结核小鼠的细胞免疫功能和体液免疫功能。通过本实验说明肺痨康治疗肺结核具有免疫调节的作用。【参考文献】1叶品良，卢润生，黄秀深,等. 肺痨康治疗肺结核 69 例J.江西中医药,2009，40（2 ）：33.2刘婷婷, 叶品良 ,王帅,等.“ 肺痨康”对耐多药结核分枝杆菌抑菌效力的体外研究J.光明中医，2008,（10）：1453.3徐书显, 赵进沛 ,刘卫,等. 复方中药对小鼠免疫器官和体质量的影响J.现代中西医结台杂志，2001,（4 ）：710.
