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1、一、选择题、 1下列有关培养基的叙述正确的是( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( ) A碳源、磷酸盐和维生素 B氮源和维生素 C水、碳源、氮源和无机盐 D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素 3获得纯净培养物的关键是( ) A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B接种纯种细菌 C适宜环境条件下培养 D防止外来杂菌的入侵 4下列常用的无菌操作中错误的是( ) A用酒精擦拭双手 B用氯
2、气消毒水源 c实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿 (吸管、培养皿) 可用酒精擦拭 5制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板 6有关倒平板的操作错误的是( ) A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 7有关平板划线操作正确的是( ) A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 c将沾
3、有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可 D最后将平板倒置，放人培养箱中培养 8有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C再放在适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落 9涂布平板操作需要用到( ) A接种环、滴管、酒精灯 B接种环、移液管、酒精灯 C涂布器、移液管、酒精灯 D涂布器、接种环、酒精灯 10将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入 37恒温箱的目的是( ) A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染 C没必要放人未接种的培养基 D为了下次接种时
4、再使用 11 关微生物营养物质的叙述中，正确的是 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 12作为自养生物唯一碳源的是（ ） A 糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼 13大肠杆菌的代谢类型是（ ） A 自养需氧 B 异氧严格厌氧 C 异养需氧 D 异养兼性厌氧 14菌种保藏应控制的条件是（ ） （1）湿度 （2） 低温 （3） 干燥 （4） 有光 （5）隔绝空气 （6）适当有氧 A（1）（4）（6） B（2）（ 3）（6） C（1）（5）（6） D（2）（3 ）（5） 15下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（
5、） A 含碳有机物 B 蛋白胨 C 含碳无机物 D 花生粉饼等天然物质 16平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（ ） A 利于大肠杆菌的接种 B 防止杂菌污染 C 利于培养的冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基 17。含 C、H、O 、N 的大分子化合物可以作为（ ） A 异养微生物的氮源、能源 B 异养微生物的碳源、氮源 C 自养微生物的氮源、能源、碳源 D 自养微生物的氮源、能源、碳源 二、非选择题 18鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在 中保温 1-2 天看有无 ，如果没有 说明制作合格，反之则不合格。 19请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合
6、适的方法。 (1)培养细菌用的培养基与培养皿 (2)玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3)实验操作者的双手 (1) 、 (2) 、 (3) 2019 世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。 (1)根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是什么? (2)由此得出研究和应用微生物的前提是防止 21在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 22在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 参考答案： 一、1A 2C 3D 4D 5C 6C 7D 8D 9C
7、10B。 11D 12。C。13。D。14。B。15。C。16 。D。17 。B。 二、18 恒温箱 菌落生长，菌落生长 19(1)需要灭菌 (2)需要灭菌 (3)需要消毒 20(1)导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。(2)杂菌入侵，获得纯净的培养物。21不能 因空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 22因划线后线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，这样最终就能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 一：教学目标1 知识目标：了解培养基的用途和种类识记培养基制作中的一般成分掌握
8、培养基制作的一般的步骤掌握微生物分离中的划线法和涂布法2 能力目标掌握微生物的生活史，对接种的微生物进行鉴别学会一般的消毒、灭毒的方法学会实验的后期处理的方法3 情感目标培养学生环保的意识体验微生物与现代生物技术之间的密切的关系二：教学中的难重点重点：培养基的制备、微生物的培养的操作难点：培养基的制备和微生物的分离三：教学过程说明：本实验，我准备安排在选修一开始就进行。原因：如果开展选修一，我准备开设“腐乳的制作 ”，用到大量的根霉菌和毛霉菌。准备让技术比较好的两组同学接种创设情景，引入新课确定目标，引导自学展示几个问题，让学生整理什么叫培养基？有几种类型？培养基一般需要的营养成分？了解牛肉膏
9、蛋白胨培养基的营养成分无菌操作包括几部分？小组讨论，分别让不同小组展示“如何进行无菌操作”三：给出目标，动手实践大屏幕展示：马铃薯培养基：牛肉膏蛋白胨培养基：给出配方，将学生分组自主选择制作的培养基。具体步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。要求学生在课上完成计算、称量、溶化、灭菌操作，然后利用之前学生或教师已经完成灭菌的培养基倒平板。（2）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约 1020mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿
10、盖。等待平板冷却凝固，大约需 510min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。一二组完成根霉菌、毛霉菌（带上口罩操作） ，三四组完成大肠杆菌的操作课下思考课本上的思考课题目标临沭县实验中学 刘长明 2010 年 7 月 29 日 16:11（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神课题重点无菌技术的操作课题难点无菌技术的操作教学方法启发式教学教学工具
11、多媒体课件教学过程（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。（二）进行新课1基础知识11 培养基的种类包括 固体 培养基和 液体 培养基等。思考 1琼脂是从红藻中提取的 多糖 ，在配制培养基中用作为 凝固剂 。【补充】培养基的类型及其应用：标准 培养基类型 配制特点 主要应用固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离,鉴定,计数半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存物理性 质液体
12、培养基 不加入琼脂 工业生产，连续培 养化学组 合成培养基 由已知成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定成 天然培养基 由天然成分配制而成，培养基成分不明 确 工业生，产降低成 本鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别目的用途 选择培养基 添加（或缺少）某种化学成分 菌种的分离12 培养基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 四类营养成分。思考 2从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、P 、S 是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的 97以上。【补充】碳源：如 CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，
13、并提供能量。氮源：如 N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有 C、H、O、 N 的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。13 培养基除满足微生物生长的 pH 、 特殊营养物质 和 氧气 等要求。【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。思考 3牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 糖 、 维生素 和 有机氮 等营养物质。思考 4培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ，培养霉菌时需要将培养基 pH 调节为 酸性 ，培养细菌时需要将 pH 调节为 中性或微碱性 。活动 2：阅读“无菌技
14、术”，讨论回答下列问题：14 获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵 。15 无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。16 比较消毒和灭菌（填表）比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能灭菌 强烈 全部微生物 能思考 5无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是 防止感染实验操作者 。17 消毒方法：（1）日常生活经常
15、用到的是 煮沸 消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用 巴氏 消毒法（作简要介绍）；（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果，然后使用 紫外线 进行物理消毒。（4）实验操作者的双手使用 酒精 进行消毒；（5）饮水水源用 氯气 进行消毒。18 灭菌方法：（1）接种环、接种针、试管口等使用 灼烧 灭菌法；（2）玻璃器皿、金属用具等使用 干热 灭菌法，所用器械是 干热灭菌箱 ；（3）培养基、无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。（4）表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线 灭菌法，所用器械是 紫外灯 。思考 6对接种环灭菌时要用酒精灯的 充分燃烧 层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。思考 7利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是避免妨碍热空气流通。思考 8物
