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1、352 中因药物与临床2011年3月第11卷第3期Chinese RemediesClinics，Mareh 2011,Vo111，No3 小板输注干扰了风险因素的筛查予以排除，余72例纳入研 究，统计术前血小板计数与出血事件的关系。 13统计学处理：率的比较采用Fisher精确概率法。数据处 理采用SAS 90统计学软件。 2结 果 血小板计数与 血率：各级血小板计数问出血率差异无 统计学意义(P=O312)。见表l。 表1 m小扳汁数与b【IL的哭系 3讨 论 在内科m液系统相关疾病，钊对严重的血小板减少症所 导致的 ，陶际卜-一般以lOxlOUL作为预防性血小板输注 的阈值标准 引。但外
2、科疾病合并的【l1l小板减少症有其自身特 点，以肝硬化静脉高压症尤为突fI本文即就此进行探讨。 埘不同数量级术前血小板计数与出血率的关系进行分级 比较，结果 示各数量级血小板组问 血率差异无统计学意 义( 005)。分级比较中血小板计数20xlOL的手术病例中各级血小板组 问出血率差异无统计学意义(Jp005)。对这一现象的解释为： 决定是否有术中术后出血渗血是由包括血小板因素在内的 多因素综合作用所致，首要的原因为肝功能损害致凝血因子 生成减少、消耗增多以及循环中存在抗凝物质有关，其次血 小板计数减低和血小板功能障碍亦与出血密切相关；而血小 板计数减低只是其中一个影响因素。资料表明肝硬化时往
3、往 合并血小板功能缺陷，血小板黏附牢、聚集率及促凝活性都 有降低。肝硬化门静脉高压症时血小板计数的显著降低不仅 为脾亢所致，资料表明肝脏和骨髓都对血小板有破坏作用。 正常情况下因肝脏血流速度较快，故对【ffl小板的破坏程度不 大。而肝硬化时血管受压迂曲血流减慢， 此血小板在肝脏 的破坏可能大大增加。临床J-发现部分门静脉高压症患者脾 切除后血小板并未明显回升或许与此有关。资料亦表明血小 板在肝或在肝脾两处破坏者脾切除疗效较差。冈此，在肝硬 化静脉高压症情况下，应综合肝功能状况、血小板计数及 血小板功能从而判断术中、术后出血渗血慨率 参考文献 f】手芳，贺冠强，孙汉英，等基于循证医学的血小板输注
4、指南 2007年美国ASH血小板输注指南介绍 内科急危重症杂志， 2008，14(2)：1091 12 2Strauss RGPretransfllsion trigger platelet CO1nts and dose for prophylactic platelet transfilsionsCnrr Opin Hematol，2005，12 (6)：499502 3Eikenboom JC，vart Wordragen R，Brand A Compliance with prophylactic platelet transfnsiorl triggm iFt haematologi
5、eal patientsTraFtsfus Med，2005，15(1)：4548 (收稿日期：2010一I112) 3种方法检测抗线粒体抗体型的 比较及临床意义 宋秀珍公惠萍王平张国杰王海香 抗线粒体抗体(AMA)II型义简称为AMAM2是原发胆 汁性盯硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)的早期特异性诊断 指标，其诊断PBC的敏感性和特异性分别超过90和95 为PBC最突 的免疫学异常指标，也是PBC最重要的诊断 手段，因此，被列为PBC的诊断标准之一 PBC Ahrens等1950年命名，是一种原冈未明的慢性 进行性朋汁淤 性肝脏疾病，其病理特点为：肝内胆管非
6、化 脓性炎症，伴有胆管破坏、门脉周同炎症及肝实质碎屑状坏 死，最终进展为肝硬化。PBC预后不良，激素和其他免疫抑制 作者单位：046000 K治医学院附属和平医院风湿免疫科(宋秀 珍、公惠萍、1 )消化科(张国杰)，感染科(：E海香) 剂疗效不确定，熊去氧胆酸是惟一可以长期使厢的有效治疗 药物，早期应用可延缓肝硬化和改善高胆红素血症，至晚期 则效果甚微，终末期惟一有效的治疗是肝移植 冈此，针对该病，最好的诊疗方案是早期诊断， 期治 疗，及早给药，改善预后。抗线粒体抗体型作为PBC的早期 特异性诊断指标，可在患者出现临床症状、生化指标和组织 学特缸变化之前几年甚至十儿年即现阳性，还有研究认 为：
7、AMAM2抗体阳性者，即使无相应的临床症状和生化指 标改变，也应考虑为PBC L ，因此，近些年米，关于AMAM2 用在易感人群，如PBC患者直系亲属6j及健康人群体榆中的 研究越来越多，结果表明：AMAM2的阳性枪出率远远高于 中国药物与临床2011年3月第11卷第3期Chinese RemediesClinics，March 2011，Vo111，No3 预期，约为03605这提示：PBC的潜在发病率可能并不 低，普遍筛查，及早检出，是最重要的预防手段 。 鉴于此，用于AMAM2初筛的检测方法也成为一个重要 的研究课题。目前，市场上已有多种检测抗线粒体抗体型 的商品试剂盒，如间接免疫荧光法
8、、免疫印迹法、酶联免疫吸 附法以及新出现的胶体金免疫层析法等。由于免疫印迹法常 采用相关指标组合的方法，导致特异性较低，检测费用高，因 而使用率低。本研究选择各临床实验室较常用的间接免疫荧 光法和酶联免疫吸附法，以及新出现的胶体金免疫层析法对 抗线粒体抗体型进行研究，通过对在确诊PBC患者中的敏 感性和特异性，实验室操作方便性，医疗机构普及性等进行 比较，以探究出最适合PBC普筛的检测方法。 1对象与方法 11对象：PBC组108例，均为2007年l2月至2010年7月 间经住院检查确诊的PBC患者。诊断标准：2000年美国肝脏 病学会(AASLD)推荐的PBC诊断指南：有胆汁淤积的生化改 变
9、主要指碱性磷酸酶(ALP)、 一谷氨酰转肽酶(GGT)升高 且无其他原因(B超检查胆道系统正常)，同时AMA1：40，则 诊断为PBC；其中女性96例，男性12例，男女比例为1：8，年 龄3572岁；200例健康对照均为本院的健康体检者，100例 其他肝病患者和100例自身免疫病患者(系统性红斑狼疮42 例类风湿关节炎37例，强直性脊柱炎21例，均符合国际诊 断标准)为疾病对照组 均为本院住院患者。 12检测方法：间接免疫荧光法：试剂盒购自北京欧蒙公 353 司，血清按1：100稀释，如抗AMA抗体阳性，继续血清倍比稀 释，最终稀释比例为浓度值，严格按说明书操作；酶联免疫 吸附法：试剂盒购自上
10、海富莼科芯生物技术股份有限公司 血清按1：200稀释，用四参数回归计算出待测样本浓度值，25 RUml及以上判定为阳性，严格按说明书操作；胶体金免疫 层析法：试剂购自上海富莼科芯生物技术股份有限公司，全 血离心后直接将血清滴加在金标板上。5 min后根据T线颜 色判读实验结果。 13统计学处理：采用 检验，以P005为差异有统计学意 义。 2结 果 21 3种检测方法学操作步骤主要指标比较：见表1。 表1 3种检测方法学操作步骤主要指标比较 22 3种检测方法在PBC组、疾病对照组和健康人群的敏感 性、特异性比较：见表2。 表2 PBC及疾病对照组中3种检测方法AMAM2的阳性率 注：PBC组
11、中AMAM2的阳性率与各组比较P均0O1 3讨 论 原发胆汁性肝硬化作为自身免疫性疾病，一直被划分为 自身免疫性肝病的一种，与自身免疫性肝炎、原发硬化性胆 管炎相提并论。并被认为是一种罕见病而淡出临床医生，尤 其是肝科医生的视线。 然而，随着这一两年来AMAM2检测的普及力度加大， PBC的新发病例大幅增加。从而提醒我们：PBC可能并非少 见病。尤其在病毒性肝炎患者及病毒感染人群的临床研究中 发现：伴发PBC的概率较高l8，因此在肝炎传染科中，此疾病 应受到关注与重视。来自北京佑安医院的数据显示，近半数 PBC患者伴有乙肝病毒感染，疾病还同时伴发各类型肝炎。 本院风湿科实验室自2006年12月
12、开展抗线粒体抗体 型的检测以来，坚持对全院医生，尤其是肝科与消化科医 生进行原发胆汁性肝硬化的临床宣传与推广，结果发现，随 着医生对PBC与M2了解的不断深入M2的检测基数不断 增加阳性检出率逐步上升，被确诊为PBC的患者也逐渐增 多。据本院2010年17月份M2抗体检测数据显示：521例 标本中，40例(77)阳性，l9例(36)中强阳性，21例 (41)弱阳性，其中肝病科中强阳性11例(占总数579)， 弱阳性7例：风湿科中强阳性2例(占总数105)，弱阳性4 例：胃肠道科中强阳性1例(53)，弱阳性2例；血液科中强 阳性2例(占总数105)，弱阳性1例；其他内科中强阳性3 例(158)，
13、弱阳性7例。 以上数据表明，原发胆汁陛肝硬化并非罕见病，而是临床医 生尤其是肝科医生缺乏应有的诊断意识导致PBC的发现率受 限，患者易被误诊漏诊，因此，对肝科医生展开PBC与其特异性 检测指标AMAM2的宣传，对PBC展开广泛的AMAM2筛查 是很有必要的而选择敏感性高、特异性强、简便易操作、易 354- 中国药物与临床2011年3月第11卷第3期Chinese RemedieSClinicsMarch 2011,Vo111,No3 普及的筛查工具就显得极其重要。 本研究结果表明，在现有的AMAM2实验室检测方法 中，问接免疫荧光法尽管是最常用的检测方法，但是其检测 总抗线粒体抗体，敏感性只有
14、683，特异性为945，较之 酶联免疫吸附法的敏感性935，特异性97和胶体金免疫 层析法的敏感性945，特异性965偏低，且酶联免疫吸附 法与胶体金免疫层析法符合性极高。这可能与本研究选用的 两种试剂盒抗原来源相同有关；从操作方法上来看，AMAM2 间接免疫荧光法需采用荧光显微镜并需要专业的操作经验 方能对结果进行分析和判读，中小医院较难开展，操作时间 较长，样本量大时_lr作量繁重，且难以精确定量：AMAM2酶 联免疫吸附法需采用酶标仪，由于该方法学较成熟，一般免 疫室工作人员均能操作，实验结果易判读，操作时问偏长，但 适合大样本量操作，可精确相对定量，对判读中强阳性与弱 阳性有明显优势，
15、但样本量少时，试剂成本偏高，不适合中小 医院开展；AMAM2胶体金免疫层析法无需任何实验室设备 与耗材，操作方法简便易学，全程操作只需5 rain，能满足随 到随检随取结果的检测要求，适合列为常规检测项目并可 在中小医院， 泛开展 因此，在中国这样一个肝病大周，PBC作为一种并不罕 见的肝硬化，其早期诊断、及时治疗便能大大改善预后的特 点使得大力加强对PBC的宣传广泛开展AMAM2的检测， 提高对PBC的诊疗意识非常有意义。而现有的AMAM2检 测方法中，AMAM2胶体金免疫层析法最为简便快捷，并具 有很高的敏感性、特异性，是最适合广泛开展在中小医院普 及的检测方法，值得大力推广。 参考文献
16、1姜小华，仲人前，孔宪涛，等原发性胆汁性肝硬化发病机制研 究进展中国免疫学杂志，2002，18(8)：586589 2张煊，林进，唐福林，等原发胆汁性肝硬化的临床及病理分析 中华风湿病学杂志，2001，5(2)：98103 3Metealf JV，Mitchison HC，Palmer J，et a1Natural history of early primary biliary cirrhosisLancet，1996，348：1399-1402 4Koizumi H，Onozuka Y，Shibata M，et a1Positive rate of antimi toehondrial antibody in Japanese corp
