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1、中文名称：营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)英译名称：Nutrient Agar品种编号：022020营养琼脂规格：250g 干粉培养基营养琼脂用途：用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定。营养琼脂使用原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。微生物图册：营养琼脂配方(每升)：蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g琼脂 15g最终 pH 7.30.2营养琼脂使用方法：1、称取本品 33g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121高压灭菌 15min，备用。2、(食品)以无菌操作称取检样
2、25 克(或 25mL)，放入含有 225mL 灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为 1：10 的均匀稀释液。依次做 1：100，1：1000稀释液。3、根据对样品污染情况的估计，选择 23 个合适的稀释度，分别在做 10倍稀释的同时，吸取 1mL 稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做 2 个平皿。4、稀释液移入平皿后应及时将凉至 46左右的培养基注入平皿约 15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有 1mL 稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于 361温箱中培养 482h。5、观察结果。6、菌落计数方法：做平板菌落计数
3、时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。7、菌落计数的报告：选取菌落数在 30-300 之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2 以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计。营养琼脂质量控制：本营养琼脂接种下列菌株，置于 361温箱中培养 482h，结果如下：菌 名菌 号 生长状况 菌落特征大肠埃希氏菌ATCC25922良好白色灰白色，圆形，边缘整齐，表面光滑，湿润。金黄色葡萄球菌ATCC6538 良好 黄色，圆形，边缘整齐，表面光滑、湿润，不透明。贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
