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1、1蛋白质化学一、填空题1氨基酸的等电点 pI 是指 。2氨基酸在等电点时，主要以 离子形式存在，在 pHpI 的溶液中，大部分以 离子形式存在，在 pHK m 时， V 趋向于 Vmax，此时只有通过增加E来增加 V。（ ）18酶的最适 pH 值是一个常数，每一种酶只有一个确定的最适 pH 值。（ ）19酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。（ ）20金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。（ ）21增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。（ ）22酶反应的最适 pH 值只取决于酶蛋白本身的结构。四、问答题1简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的
2、共性及其特性？2在很多酶的活性中心均有 His 残基参与，请解释？3怎样证明酶是蛋白质？4对活细胞的实验测定表明，酶的底物浓度通常就在这种底物的 Km 值附近，请解释其生理意义？为什么底物浓度不是大大高于 Km 或大大低于 Km 呢？5为什么蚕豆必须煮熟后食用，否则容易引起不适？6新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了，因为 50糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理？7由酶总浓度特定的某一酶促反应SP 中，得到下表数据， S mol/L V(mol/L.min)6.2510
3、6 15.07.50105 56.31.00104 60.01.00103 74.91.00102 75.01.00101 75.01.00 75.0求：(1)Vmax和Km；(2)为什么当 S1.010-2mol/L时，V 为常数？(3) S0.1mol/L时,游离酶浓度E是多少？(4)当S=2.510 -5mol/L.min 时，求反应前5分钟内生成产物的总mol数。(5) 当E t增加一倍时，Vmax 与Km各是多少？8试述温度、pH 对酶促反应速度的影响及其影响机理。9什么是酶的专一性？酶的专一性分几类？举例说明。10比较酶的三种可逆抑制作用的作用特点。参考答案四、问答题1答：（1）共
4、性：用量少而催化效率高；仅能改变化学反应的速度，不改变化学反应的平衡点，酶本身在化学反应前后也不改变；可降低化学反应的活化能。（2）特性：酶作为生物催化剂的特点是催化效率更高，具有高度的专一性，因容易17失活而具有反应条件温和性，活力可调节控制并与辅助因子有关。2答：酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基 pK 值为 6.07.0,在生理条件下，一半解离，一半不解离，因此既可以作为质子供体（不解离部分） ，又可以作为质子受体（解离部分） ，既是酸，又是碱，可以作为广义酸碱共同催化反应，因此常参与构成酶的活性中心。3答：（1）酶能被酸、碱及蛋白酶水解，水解的最终产物都是氨基酸，证明酶是由氨基酸组成的。（
5、2）酶具有蛋白质所具有的颜色反应，如双缩脲反应、茚三酮反应、米伦反应、乙醛酸反应。（3）一切能使蛋白质变性的因素，如热、酸碱、紫外线等，同样可以使酶变性失活。（4）酶同样具有蛋白质所具有的大分子性质，如不能通过半透膜、可以电泳等。（5）酶同其他蛋白质一样是两性电解质，并有一定的等电点。总之，酶是由氨基酸组成的，与其他已知的蛋白质有着相同的理化性质，所以酶的化学本质是蛋白质。4答：据 VS的米氏曲线，当底物浓度大大低于 Km 值时，酶不能被底物饱和，从酶的利用角度而言，很不经济；当底物浓度大大高于 Km 值时，酶趋于被饱和，随底物浓度改变，反应速度变化不大，不利于反应速度的调节；当底物浓度在 K
6、m 值附近时，反应速度对底物浓度的变化较为敏感，有利于反应速度的调节。5蚕豆等某些植物种子含有胰蛋白酶抑制剂，煮熟后胰蛋白酶抑制剂被破坏，否则食用后抑制胰蛋白酶活性，影响消化，引起不适。6答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰箱中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。7答：(1)从表中数据呈现规律可以看出，该酶促反应动力学符合米氏方程。当S0.01mol/L，反应速度不随S的变化而变化，即达到最大反应速度：Vmax75.0(mol/L.min)根据米氏方程 VVmaxS /（Km+S ） ，将S6.2510 5 mol/L
7、，V15.0mol/L.min 代人方程，得：Km2.510 5 mol/L(2)当S1.010 -2mol/L，此时酶完全被底物结合并达到饱和，即E tES，增加S并不使 ES增加，酶促反应速度达到最大。(3) S0.1mol/L 时，游离酶浓度 EE tES=0 (4)当S=2.510 -5mol/L.min 时，反应初速度：V=752.5105 /(2.510-52.510 5 )37.5mol/L.min反应前 5 分钟生成的产物量为 37.55187.5mol/L(5)当Et增加一倍时， Vmax也增加一倍，即150mol/L.minKm与酶浓度无关，保持不变。8答：温度：酶促反应速
8、度存在着最适反应温度，当温度低于此温度，反应速度随温度的增加而增加；高于此温度，反应速度随温度的增加而降低。机理：低温下，温度升高，反应体系中的活化分子数增加，反应速度增加；当温度增加到一定程度时，引起酶变性失活，反应速度下降。pH：大多数酶促反应速度也存在最适反应 pH，在此 pH 下，酶促反应速度达到18最大。机理：pH 影响酶活性中心解离基团的解离状态，从而影响与底物的结合状态与反应活性；极端的 pH 下可导致酶变性失活。 S：在酶的总浓度一定时，较低浓度下反应速度随浓度的增加而增加，但增加的趋势越来越小，最后达到最大反应速度。机理：在酶浓度一定条件下，当底物浓度较低时，底物浓度增加，
9、ES也随之增加，V=k 3ES，速度增加；当底物浓度较高时， ES不再随底物浓度增加而增加，即酶被底物饱和，此时酶促反应速度达到最大。E：在底物充足时，酶促反应速度随酶浓度的增加而呈直线上升。机理：当S 远大于 E时， E增加， ES增加，速度增加。 激活剂与抑制剂：激活剂加快化学反应速度，抑制剂降低反应速度机理：激活剂通过激活酶或底物、抑制产物等方式加快正反应速度；抑制剂通过与酶可逆或不可逆结合改变酶的空间结构从而抑制酶的活性而达到降低反应速度。9、什么是酶的专一性？酶的专一性分几类？举例说明。答：酶的专一性：酶对所作用的底物的选择性，一种酶只作用于一种或一类底物。根据酶对底物的选择对象不同
10、，酶的专一性分为：绝对专一性：一种酶选择一种底物发生作用。如尿酶只水解尿素。相对专一性；一种酶选择一类底物发生作用，又分键的专一性和基团专一性。键的专一性：酶对所作用的底物的键具有选择性，如：酯酶只作用于酯键。基团专一性：酶对所作用的底物的键及其键一侧或两侧的基团具有选择性。如胰蛋白酶作用于肽键时选择肽键的羧基端氨基酸为赖氨酸或精氨酸。立体专一性：酶对所作用的底物的立体构型具有选择性。如：L氨基酸氧化酶只作用于 L氨基酸.几何专一性：酶对作用的底物的顺反异构体的选择性。如顺乌头酸只作用于顺式乌头酸。10比较酶的三种可逆抑制作用的作用特点。答：酶的可逆抑制分为三类：（1）竞争性抑制： A、抑制剂
11、 I 与底物 S 在化学结构上相似，能与底物 S 竞争酶 E 分子活性中心的结合基团. B、抑制程度取决于抑制剂与底物的浓度比、 ES和EI 的相对稳定性；C、加大底物浓度，可使抑制作用减弱甚至消除；D、此抑制剂存在下， Vmax 不变，Km 增加。（2）非竞争性抑制： A、I 和 S 在结构上一般无相似之处，I 常与酶分子上结合基团以外的化学基团结合，这种结合并不影响底物和酶的结合；B、Km 值不变，Vmax 值变小，增加底物浓度并不能减少 I 对酶的抑制。（3）反竞争性抑制 A、反竞争性抑制剂必须在酶结合了底物之后才能与酶与底物的中间产物结合，该抑制剂与单独的酶不结合；B、反竞争性抑制剂存
12、在下，Km、Vmax 都变小。1904 维生素与辅酶 一、填空题1维生素 B1 主要是以辅酶 形式，作为 和 的辅酶，转移二碳单位。2维生素 A 的活性形式是 ，可与视蛋白组成 ，后者是维持暗视觉所必需的。3维生素 D 在体内的主要作用是调节 代谢，与 生长有关。4维生素 K 的主要作用是作为 的辅酶，促进肝脏凝血酶原中 Glu 残基的 ，生成 ，修饰后的凝血酶原与 结合，才能被激活转化为凝血酶。5维生素 C 是 的辅酶，参与胶原蛋白中的 的羟化反应，另外还具有 作用等。6维生素 B2 的化学结构可以分为二部分，即二甲基异咯嗪基和核糖醇基，其中 原子上可以加氢，因此有氧化型和还原型之分。7维生
13、素 B3 由以辅酶 的形式，作为各种 的辅酶，在代谢中传递 。8维生素 B5 其辅酶形式是 与 ，作为 的辅酶，起递 作用。9生物素是 的辅酶，在 反应中起重要的作用。10维生素 B12 是唯一含 的维生素，它有多种辅酶形式。其中 是变位酶的辅酶， 是转甲基酶的辅酶。11辅助因子包括辅酶、辅基和金属离子等，其中 与酶蛋白结合紧密，需要 除去， 与酶蛋白结合疏松，可以用 除去。12叶酸以其 起辅酶的作用，它有 和 两种还原形式，后者的功能作为 载体。二、选择题1. 肠道细菌可以合成的维生素是：A. 维生素 K B. 维生素 D C. 维生素 E D.维生素 C2. 在人体内能转变为维生素 PP
14、的化合物是：A. 酪氨酸 B. 色氨酸 C. 苯丙氨酸 D。肾上腺皮质激素3. 下列叙述正确的是：A. 所有的辅酶都是维生素B. 绝大多数水溶性维生素都可作为辅酶或辅酶的前体C. 所有的辅酶都含有维生素D. 前列腺素是由脂溶性维生素衍生而来4. 转氨基反应要求的维生素是：A. 烟酸 B. 硫胺素 C. 磷酸吡哆醛 D. 核黄素5下列辅酶中的哪个不是由维生素构成的：ACoA BCoQ CFH 2 DFMN6下列叙述中哪一种是正确的：A所有的辅酶都包含维生素组分 B所有的维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分C所有的 B 族维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分D只有 B 族维生素可以作为辅酶或辅酶的组分207多食糖类需补充：A维生素 B1 B维生素 B2 C维生素 B5 D维生素 B6 E维生素 B78多食肉类，需补充：A维生素 B1 B维生素 B2 C维生素 B5 D维生素 B6 9以玉米为主食又缺乏合理副食，容易导致下列哪种维生素的缺乏：A维生素 B1 B维生素 B2 C维生素 B5 D维生素 B6 E维生素 B710下列化合物中哪个不含腺苷酸组分：ACoA BFMN CFAD DNAD + ENADP +11需要维生素 B6 作为辅酶的氨基酸反应有：A转氨和脱羧 B酰基转移 C糖基转移 D转
