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1、羊肚菌菌种制作技术羊肚菌菌种制作技术 羊肚菌是世界上珍贵的稀有食用菌之一，属高级营养品。它富含蛋白质、碳水化合物、多种 维生素及 20 多种氨基酸，特别是有机锗含量高，具有补肾、壮阳、补脑、提神的功能；主 治精肾亏损、阳痿不举、性欲冷淡 ； 对头晕失眠、肠胃炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不 振有良好的辅助治疗作用 ； 还可以防癌抗癌、预防感冒、增强人体免疫力，在医学上有重要 的开发价值。由于它功能齐全，香味独特，食疗效果显著，目前国内每千克售价 8001000 元，尤其在西欧国家供应十分紧俏，价格更昂贵。 因羊肚菌与其它食用菌不同，栽培适应性较差，特别是在异地栽培稳定性差。因此，利 用当地的羊
2、肚菌品种分离制出的菌种， 能适应当地环境， 可避免异地购种的地区性差异和邮 寄途中的影响，建议种植户最好分离当地的品种。它能适应当地环境，但也要注意羊肚菌的 菌种隔年使用效果不好，有变异现象。这就给大面积栽培和推广带来了困难。所以羊肚菌的 菌种最好每年分离、驯化。这是迄今尚未实现商品化栽培的原因之一，加上栽培管理或环境 达不到要求就会不出菇。这就是羊肚菌人工栽培困难的奥秘。 一、制种注意事项 羊肚菌的菌种性能与其它食用菌不同，菌种分离方法和育种手段及栽培管理技术与其它 食用菌也有很大差异。最大的缺点就是容易退化、变异、生霉。这对栽培羊肚菌带来很大困 难。对此，首先要控制菌种传代，无论母种、原种
3、、栽培种，若违反技术要求，多传一代就 会出现上述不良反应或不长子实体。 母种只能经过原种栽培种， 到栽培中的一次流程和 3 次 破菌愈合才能保住质量 ； 若超过 3 次菌丝断裂而重新萌发的新菌丝，会失去或降低酶的分解 作用，以致抗病力差，易生杂菌，不出菇。 二、母种制作 （一）培养基配方 黄豆芽 500 克（煮汁） ，白糖 20 克，琼脂 20 克，羊肚菌基脚50 克，水 1 升。 黄豆芽 500 克（煮汁） ，白糖 20 克，琼脂 20 克，水 1 升。 栎木屑 500 克（煮汁） ，白糖 20 克，琼脂 20 克，水 1 升。 马铃薯 200 克 （煮汁） ， 白糖 20 克， 琼脂 20
4、 克， 蛋白胨 0.5 克， 牛肉膏 0.5 克， 水 1 升。 蛋白胨 1 克，葡萄糖 20 克，琼脂 20 克，酵母膏 1 克，磷酸二氢钾 1 克，硫酸镁 1 克， 维生素 B1，1 克，水 1 升。pH 值自然。 上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水 1 升煮 30 分钟，过滤取汁，并将余下的水补足 1 升，加入其它原料，煮至溶化后，按母种制作常规方法，分装于 18 毫米180 毫米或 20 毫 米200 毫米试管的 1/5，塞上棉塞，使用高压灭菌锅彻底灭菌；在 0.68 千克压力下维持 60 分钟，自然冷却至指针回到原位才可打开，放成斜面备用。 （二）菌种分离 首先要具有食用菌专业基础知
5、识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力，其次要购置母 种培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。根据当地羊肚菌生长 季节，趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。 1.分离方法。羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。它需要一种助生菌与羊肚菌菌丝 共生时才能出菇。这种助生菌长期活动在土壤中，有时以芽孢菌形式出现，有时以菌丝形式 出现。它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此，从土壤中分离 该菌比其它任何方式分离要好些。但从土壤分离难度太大，成功率不到万分之一，并且难以 分辨，所以只有采取羊肚菌基脚土分离，才能真正找到羊肚菌的出菇菌丝。初学者可在四川 绵阳市食用菌研
6、究所购买培养好的羊肚菌优良母种，并参加现场培训。 2.操作过程。在羊肚菌生长的周围，可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易 成功。现介绍两种土壤分离的简易方法 ： 一种是土壤直接分离，另一种是浸提分离。土壤直 接分离法 ： 在羊肚菌生长的地方去掉羊肚菌，取周围 5 厘米以内的土壤，去掉表层，把土壤 放入无菌接种箱内，然后放入试管培养基，进行接种箱空间消毒。即按接种箱每立方米空间 用甲醛 10 毫升，高锰酸钾 5 克，混合产生气体消毒，半小时后才可操作。将基脚土用接种 针挑取黄豆大小一块，迅速放到试管内的空白培养基上，每管放一块，塞上棉塞，接种后取 出培养。浸提分离法 ： 将基脚土用无菌
7、水稀释，澄清后用接种针蘸取少量溶液，滴到试管内 的空白培养基上，塞上棉塞后取出培养。 分离后，放在 1218温度下培养观察。3 天后培养基上萌发菌丝，每天仔细检查每支 试管的发菌及变化情况。 区分和认识各类杂菌是最关键的核心技术。 真正的羊肚菌菌丝最初 为灰白色，生长很快，时间长会变成棕黄色，有时会出现菌核，母种 7 天长满试管，原种、 栽培种 15 天可长满瓶底。是否分离成功，必须做栽培出菇试验，待出菇后才能准确认定是 否羊肚菌的菌种。一旦菌种分离成功，在以后的转接过程中要小心，不能再让杂菌感染，必 须把好高温灭菌关和接种消毒关，才能保证菌种质量和成活率。 （三）转接提纯 待培养基表面余水干
8、后才能使用，否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭 菌进行，将第一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基，放入空白培养基上，每支母种可 接 1015 支，母种只能扩种一次，不能多接或多扩，否则会影响子实体生长。 （四）培养 接种后放在 1822温度下避光培养，23 天菌丝萌发，7 天可长满斜面培养基。如不 使用则放入冰箱在 03温度下保存，时间最长不超过半年。 三、原种制作 （一）培养基配方 栎木屑 50%，棉籽壳 30%，麦麸 15%，白糖 1%，石膏 1%，过磷酸钙 1%，土 2%，pH 值自然。 栎木屑 75%，米糠或麦麸 20%，白糖 1%，石膏 1%，过磷酸钙 1%，土 2%，
9、pH 值自然。 稻草粉 70%，麦麸 25%，石膏 1.5%，过磷酸钙 1.5%，土 2%，pH 值自然。 棉籽壳 90%，木屑 8%，土 2%，pH 值自然。 玉米芯 50%，木屑 30%，米糠 15%，石膏 1%，过磷酸钙 1%，土 3%，pH 值自然。 （二）操作过程 按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达 65%时装瓶。装瓶要求松紧一致，装至 瓶肩，将表面压平，洗去瓶壁内外沾染的培养基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。 （三）灭菌 高压灭菌在 0.68 千克压力下维持 1 小时，常压灭菌在 100温度下保持 68 小时。灭菌 时间不能过长或压力过高，否则会破坏其中养分。 （四）接种与培
10、养 接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种 510 瓶。接种后放在 1822温度下 避光培养，3 天菌丝萌发吃料，10 天菌丝布满培养基表面，1520 天菌丝长满瓶底。培养 期间尽量避免强光刺激，菌龄以不超过 50 天为好。菌丝寿命与温度有关，超过 30以上几 小时就死亡。 四、栽培种制作 （一）培养基配方 栎木屑 75%，米糠或麦麸 20%，白糖 1%，石膏 1%，过磷酸钙 1%，土 2%，pH 值自然。 棉籽壳 75%，麦麸 20%，石膏 1%，过磷酸钙 1%，土 3%，pH 值自然。 稻草粉 75%，麦麸 15%，过磷酸钙 2%，土 3%，pH 值自然。 玉米芯 80%，米糠 15%，石膏 2%，过磷酸钙 1%，土 2%，pH 值自然。 农作物藤秆粉 75%， 米糠 10%， 麦麸 10%， 白糖 1%， 石膏 1%， 过磷酸钙 1%， 土 2%， pH 值自然。 （二）操作过程 按配方将原料混匀后，加水调至含水量为 65%，装瓶，灭菌接种，培养。操作方法同上 述原种。经 1 个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。
