第17章其他细菌课件

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1、第17章 其他细菌,主讲人: 临床微生物学组(14届)全国委员 中 华 医 学 检 验 全 书 主 编 北 华 大 学 临 床 微 生 物 学 教 授 海 南 医 学 院 特聘教授 李影林 2011年4月,第一节 棒状杆菌属,概 述,棒状杆菌属(Corynebacterium)是一群菌体细长,一端或两端膨大呈棒状的革兰阳性杆菌。在医学上,根据对人类有无致病性可分为:致病性棒状杆菌白喉棒状杆菌(C.diphtheriae),白喉棒状杆菌,白喉的病原体,1.典型的白喉棒状杆菌细长,一端或两端膨大成棒状G+杆菌。 2.具有多形性,排列很不规则,犹如散乱堆放的火柴一样,常呈L、V、Y、X、W、N等排列

2、,也可呈菌删栏状排列。 3.无特殊结构。无芽胞、无荚膜,无鞭毛不能运动。 4.有异染颗粒(metachromatic granules)又称迂回体。形态学诊断要点。,形态染色,白喉棒状杆菌用美蓝或奈瑟染色后,菌体一端或两端可见着色较深的颗粒称为异染颗粒。,白喉棒状杆菌异染颗粒(Albert染色),1.需氧或兼性厌氧。 2.营养要求较高。普通培养基上生长不良,在含有血液、血清、蛋黄培养基上生长良好。 3.在不同培养基上有其不同的生长特点。 (1)吕(Loffler)氏血清斜面:生长速度比其他喉间细菌快,小,1224h形成灰白色、微凸、有光泽的菌落。菌型典型、异染颗粒明显。 (2)亚碲酸盐血平板上

3、,抑制其他多菌,白喉棒状杆菌在此培养基上生长吸收碲盐并还原成金属碲菌落为黑色主要用于观察菌落。 (3)液体培养基中,形成腊样菌膜,同时也有颗粒状。 (4)血平板上,菌落灰白不透时,可狭窄的-溶血环,可推移压之易醉。,培养特性,白喉棒状杆菌在亚碲酸钾血平板菌落特征,生化特点及分型,本菌可分解一些糖类产酸不产气。如:葡、麦、果、半乳+;乳蔗、甘一。触酶+,硝酸盐还原+,不消化Pr。,疾病的轻重与菌型无关 。我国以轻型为主。,抵抗力 1.对湿热敏感 58 10min杀死 100 1min立即杀死 2.对干燥寒冷的抵抗力较其他无芽胞菌强 3.对一般消毒剂敏感,10g/石炭酸1杀死 4.对青霉素,广谱抗

4、生素(如红霉素)敏感,对磺胺类不敏感,1.白喉毒素(diphtherotoxin),白喉外毒素是主要致病因素(侵袭性较弱) (1)携带-棒状杆菌噬菌体时产生外毒素,失去-棒状杆菌噬菌体则无毒素产生。 (2)性质: 毒素毒性强,Ag性强。 毒素的形成受环境中铁浓度影响,低铁(含量在1.2g原子铁/g菌Pr时)毒素产量高。 分子量62000。,致病物质(1),无毒的白喉棒状杆菌,产毒的白喉棒状杆菌,-噬菌体,溶原性转换,致病物质(2),(2)性质: 毒素毒性强,Ag性强。 毒素的形成受环境中铁浓度影响,低铁(含量在1.2g原子铁/g菌Pr时)毒素产量高。 分子量62000。,(3)结构:由A、B

5、两条肽链经-SS-连接组成(耐高热、胰酶可解离)。 A链 毒性功能 区。可抑制易感细胞蛋白质合成 B链 本身无毒性。有一个受体结合区,一个转位区。可与心脏细胞、神经细胞等表面受体体结合,协助A链进入这些易感细胞。,致病物质(2),(4)作用机理: A链进入细胞 促使NAD(辅酶)上的腺苷二磷 酸核糖(ADPR)与延伸因子(EF-2)结合 EF-2失活 抑制氨基酸转移至肽链 阻断了宿 主细胞蛋白质合成 引起组织坏死和病变。,2.索状因子,3.K抗原,(1)性质:菌细胞外的一种糖蛋白。 (2)作用:抗吞噬作用。有利于细菌在黏膜表面的定植。,(1)性质:细菌表面的一种毒性糖脂,即海藻糖-6-6,双分

6、枝菌酸。 (2)作用:它能破坏哺乳动物细胞中的线粒体,影响细胞呼吸与磷酸化。,所致疾病,细菌局部繁 殖部位,所致疾病:白喉,传染源:患者和带菌者,传播途径:飞沫、 接 触被污染的物品,主要表现:鼻、咽、喉白喉 形成假膜,呼吸道堵塞 毒血症、侵犯周围神经和心肌及其他器官,免疫性,病后可产生牢固的免疫,抗毒素是保护性抗体。 抗毒素来源: 母体 病后,微生物学检查法,标本:病变部位假膜或分泌物 直接涂片镜检 :根据形态、排列、异染颗粒 可作初步诊断 分离培养:吕氏斜面 毒力试验: 1.Elek平板毒力试验 2.动物(豚鼠)试验,Elek平板毒力试验,防 治 原 则,人工主动免疫:白喉类毒素 人工被动

7、免疫:白喉抗毒素 治疗:早期、足量注射抗毒素, 使用抗生素(青霉素、红霉素),目的要求,掌握:白喉棒状杆菌的形态染色特点、致病性与免疫性以及特异性防治。 熟悉:棒状杆菌属细菌的种类和形态染色特点,白喉棒状杆菌微生物学检查 了解:白喉棒状杆菌培养特性,第二节 鲍特菌属,(Bordetella),分 类,生物学性状,1.形态与染色 (1)G-小球杆菌 (2)无芽胞,无鞭毛 (支气管鲍特菌和鸟 鲍特菌有)有荚膜 (新分离菌株) (3)衰老者常出现 多形性。,百日咳鲍特菌镜下形态(革兰染色),2.培养特点 (1)专性需氧菌,最适温度3537最适pH6.87.0。 (2)初次分离营养要求较高,常用含有血

8、液、甘油、马铃薯的鲍-金(Bordet-Gengou)培养基。 (3)鲍-金 (Bordet-Gengou)培养基 细小、光滑、凸起、银灰色水银滴状菌落,菌落周围有狭窄的溶血环。 (4)液体培养基:均匀混浊生长,管低有少量沉淀。,3537 35d,百日咳鲍特菌菌落特征(CCBA琼脂),3. 生化反应弱,不发酵任何糖类,4.抗原结构,O抗原 菌体抗原 K抗原 表面抗原,又称为凝集原 包括凝集因子16 凝集因子1为相菌的共同抗原,是种的特异性抗原。 WHO推荐在菌苗中应含有1、2、3因子血清型的菌株。,5变异性 : 新分离型,相,有荚膜,毒力强 人工培养后型,相,无荚膜,无毒力,形态、溶血性、抗原

9、性、致病力等也随之变异。 中间过渡相:称为、相。 6抵抗力弱 日光直射; 加热即可被杀死; 干燥尘埃中能存活。,(1)粘附作用 (2)五种毒素的毒性作用 百日咳毒素(pertussis toxin,PT)是主要毒力因子,与陈发性咳嗽,支气管痉挛有关。 丝状血细胞凝集素(filamentous hemagglutinin,FHA)能促进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上(特别是FHA的2型及3型)。,致病物质, 腺苷环化酶毒素(abenylcyclase toxin,ACT)可使吞噬细胞活性受抑制,导致呼吸道免疫力减低。 气管细胞毒素:对气管纤毛上皮细胞有特殊亲和力,低浓度时抑制纤毛摆动,高浓度时使细胞

10、坏死,脱落。 皮肤坏死毒素:引起外周血管收缩,白细胞渗出或出血,导致局部组织缺血、坏死等。,所致疾病,小儿百日咳,飞沫,早期病人 带菌者,易感 儿童,黏附,纤毛上 皮细胞,局部 繁殖,产生毒素,局部炎症,坏死,上皮细胞纤毛运 动受抑制 或破坏,粘稠分泌物增多,不能及时排除,病程分 三期,剧烈咳漱,卡他期:类似普通感冒,痉咳期:痉挛性、阵发性,恢复期:,微生物学检查法,1.分离鉴定 取鼻咽拭子 接种于鲍-金培养基 可疑菌落 涂片镜检 2.生化反应鉴定 3.血清型鉴定 用相免疫血清作凝集试验。 4.快速鉴定 (1)荧光抗体查抗原 (2)ELISA法检测患者血清中的抗PT、抗FHA,四、防治原则,预

11、防 接种疫苗(必须用含有1、2、3型凝集因 子的相菌株) 1.全菌体百日咳菌苗 2.仅含抗原的无菌体菌苗 3.白百破(DPT)三联疫苗 治疗 首选红霉素、氨苄西林,第三节 军团菌属,嗜肺军团菌,1976年新发现的菌属。各种天然水源及冷、热水管道系统(如自来水、空调系统、冷却水塔)是本菌的储存场所。,目前共有39种及3个亚型,61个血清型。其中来自人类标本的菌种主要有19个种。,形态与染色 (1)G-杆菌,着色浅,初分离者为长丝状,长23m宽0.30.4m。菌端纯圆,有的微弯曲,并常见中间粗两端细的纺垂状菌体。 (2)多形性:如杆状、球状或球杆状,菌体长度与培养条件有一定关系。 (3)无芽胞、无

12、荚膜,端鞭毛或侧鞭毛。,培养特点 (1)需氧菌,但必须在含2.55.0CO条件才能生长厌氧条件不长。最适生长温度为352542均不生长。最适H值为6.77.0。 (2)生长较缓慢,初分离一般需要35d,有时长达710d。 (3)营养要求苛刻对营养的特殊要求为L-半胱氨酸和铁(可溶性佳,磷酸铁最佳)。 (4)在活性炭-酵母浸液琼脂培养基(BCYE)上 内形成直径12mm,有光泽菌落。 (5)FG(Fee)琼脂上 针尖大的小菌落。紫外线下照射可产生奶油色荧光。,生化反应 本菌属细菌不能在常用的糖发酵培养基上生长。葡萄糖-,乳糖-,麦芽糖-,果糖-,阿拉伯 胶糖-,水解淀粉+,触酶+,氧化酶弱阳性

13、脲酶-,硝酸盐还原-。,Ag构造 O和H两种Ag。 (1)O-Ag:类脂多糖蛋白的复合物,具有型特异性。 (2)H-Ag 无特异性。,抵抗力 (1)本菌对个界环境因素的抵抗力较强。 (2)但对热和常用清毒剂均敏感。 (3)对氯作用的抵抗力比肠道杆菌强。,致病性,(一)致病物质 1.多种酶、毒素和溶血素直接损伤宿主。 主要 (1)细胞毒素阻碍中性粒细胞氧化代谢 (2)菌细胞中所含磷酸脂酶阻碍刺激中性粒细胞超氧化物阴离子产物,使中型粒细胞内第二信使编排陷于混乱。 这些物质可抑制吞噬体与溶酶体的融合,使吞噬体内的细菌在吞噬细胞内生长繁殖,间接导致宿主细胞死亡。 2.菌毛的黏附作用 3.荚膜的抗吞噬作

14、用 4.内毒素的毒性作用,次要,所 致 疾 病,所致疾病:军团病。 有流感型、肺炎型和肺外型3种类型 主要通过呼吸道吸入带菌飞沫而感染。多流行于夏秋季。 主要症状:发热、寒颤、咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难及腹泻等。 肺炎型(重型)主要是以肺感染为主的全身多器官的严重损害,头痛、畏寒、发热、伴消化道及神经系统症状及体征,死亡率很高。 非肺炎型:潜伏期较短,症状轻。以乏力、肌痛、发热、干咳等流感样症状。CDC报道该菌引起的医院感染可高达23%。,免疫性,细胞内寄生菌,细胞免疫在抗 菌感染过程中起重要作用。,微生物学检查法,(1)标本直接检验法。 显微镜直接镜检意义不大。 Gram染色及Gimenez

15、(姬美奈兹)染色。 核酸检测快速特异的方法。 方法:DNA探针或PCR扩增rRNA,(4)抗体检测检测病人血清中的抗军团菌抗体IgM近期感染;IgG可在体内持续数月流行病学调查用。 间接免疫荧光法(IFA)特异性10% 敏感性约75% 方法: 微量凝集试验(MAA) 试管凝集试验(TAT) ELISA,(2)分离培养 标本BCYE(或FG琼脂) 有光泽的小菌落(FG琼脂上菌落,紫外线照射可产生奶油色荧光。 (3)种的初步鉴定 威开尔斯(Vickers)等根据色素产生情况。建立了产生色素与BCP(Bromocresol Purples)斑点试验方法,用于军团菌的初步鉴定。,(4)抗体检测检测病人血清中的抗军团菌抗体IgM近期感染;IgG可在体内持续数月流行病学调查用。 间接免疫荧光法(IFA)特异性10% 敏感 性约75% 方法: 微量凝集试验(MAA) 试管凝集试验(TAT) ELISA,防治原则 无特异性疫苗 加强水源管理及人工输水管道和设施的消毒处理; 防止军团菌污染空气和水源。 治疗:首选红霉素。,第四节 假单胞菌,(Pseudomonas),通 性,1.G-杆菌 2.有鞭毛(极生鞭毛、单毛或丛毛)运动活泼(鼻疽伯克霍尔德菌除外),无芽胞,有荚膜。 3.专性需氧,生长温度范围广(442)最适温度35。 4.对营养要求不高

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