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1、学 海 无 涯 1 检测细胞中的检测细胞中的 DNA 和和 RNA 一、一、学习任务学习任务分析分析 检测细胞中的 DNA 与 RNA是浙科版必修 1 第一章第三节中的建议活动，在实验的操 作上看，本活动可以锻炼学生使用显微镜的高倍物镜的能力。同时，本活动能使学生增加对 核酸的种类和性质的认识， 为以后相关内容的学习打下基础。 本活动将科学知识同实际操作 相结合，突出了所学内容一定程度的实用应用性。 二、学习者分析二、学习者分析 本活动的授课对象是高二年级的学生。 从知识起点上来看， 学生通过上节课的学习已经 知道了一定程度的关于核酸的知识，他们自然会对“检测细胞中的 DNA 与 RNA”的方
2、法、过 程以及原理产生兴趣，这正是促成学生进行本节活动的兴奋点。此外，学生通过初中实验已 掌握了显微镜的运用方法，这为本活动的开展奠定了知识基础。而从认知思维起点上看，高 二学生的思维方式已经开始从具象思维转向抽象思维， 具备了一定的理论分析能力和逻辑思 维能力。 所以本活动应注重学生与教师的双向交流， 引导学生积极思考， 锻炼他们获取信息、 从现象发掘本质、建构知识体系的能力。 三三、教学重难点、教学重难点 1 1、教学重点：、教学重点：实验原理、显微镜的使用 2 2、教学难点：、教学难点：甲基绿使 DNA 呈绿色，派洛宁使 RNA 呈红色。 四四、教学目标、教学目标 1 1、知识与技能、知
3、识与技能目标目标： (1)能够分析说明 DNA 和 RNA 在结构上的不同点 (2)熟悉显微镜的使用方法 2 2、过程与方法、过程与方法目标目标： (1)掌握制作装片的方法 (2)能够使用试剂对材料进行染色 3 3、情感态度和价值观情感态度和价值观目标目标： 在动手能力方面上得到培养，在学习态度上得以提升而变得更加积极、乐观。 五、五、教学过程教学过程 1 1、实验实验原理原理分析分析 (1)真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内，RNA 主要分布在细胞质中。 (2)甲基绿和派洛宁两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同， 甲基绿对 DNA 亲和力强， 使 DNA 显现出绿色，而派洛宁对
4、 RNA 的亲和力强，使 RNA 呈现出红色。用甲基绿、派洛宁的混合染 色剂将细胞染色，可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。 (3)盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，便于 DNA 与染色剂的结合。 2 2、实验实验材料用具材料用具 (1)材料：新鲜动物（蛙）肝脏。 (2)用具：恒温水浴，100mL 的烧杯，1000mL 烧杯，量筒，滴管，天平，载玻片，盖玻片， 吸水纸，显微镜。 (3)试剂及配制方法 试剂：1mol/L 的盐酸，蒸馏水（盛于滴瓶内） ，派洛宁甲基绿混装粉，乙酸钠，乙酸。 如果实验室没有派洛宁甲基绿混
5、装粉，可以分别用甲基绿和派洛宁 G，然后按染色剂 A 液配 学 海 无 涯 2 制中的方法 2 进行配制。 染色剂的配制 染色剂 A 液的两种配制方法 方法 1：取派洛宁甲基绿粉 1g，加入到 100mL 蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液 放入棕色瓶中备用。 方法 2：取甲基绿 2g 溶于 98mL 蒸馏水中，取派洛宁 G 5g 溶于 95mL 蒸馏水中。取 6mL 甲基绿溶液和 2mL 派洛宁溶液加入到 16mL 蒸馏水中，即为 A 液，放入棕色瓶中备用。 染色剂 B 液的配制方法：B 液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠 16.4g，用蒸馏水溶解至 1000mL 备用；再
6、取乙酸 12mL，用蒸馏水稀释至 1000mL 备用。取配 好的乙酸钠溶液 30mL 和稀释的乙酸 20mL， 加蒸馏水 50mL， 配成 pH 为 4.8 的 B 液 （缓冲液） 。 染色剂的配制染色剂是由 A 液和 B 液混合配制而成的。 取 A 液 20mL 和 B 液 80mL 混合， 就是实验中所用的甲基绿-派洛宁染液。应该注意的是该试剂应现用现配。 3 3、实验实验步骤步骤 (1)涂片 取新鲜的动物肝脏切开，将其断面在一干净的载玻片中央涂抹数下，晾干。 (2)水解 将盛有 60mL 1mol/L 盐酸溶液的小烧杯，置于 30的恒温水浴中。将晾干的载玻片倾斜 着浸没于 30的盐酸溶液
7、中水解 10min（温度适中控制在 301） 。 (3)漂洗 用镊子取出涂血的载玻片， 用滴管向稍微倾斜的载玻片上加水， 让水从一端缓慢流过血膜， 这样反复冲洗 2-3 次。 (4)染色 用吸水纸吸去血膜周围的水分，再将载玻片放入盛有 60mL 甲基绿-派洛宁染液的烧杯中， 冲洗残存的染液，再次用吸水纸吸干血膜周围的水分。 (5)观察 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 在显微镜下，含 RNA 的区域被染成红色，而含 DNA 的区域被染成蓝绿色或淡绿色。注意 RNA、DNA 在细胞中的分
8、布。 4 4、注意事项、注意事项 (1)材料的选择 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； 常用的观察材料：新鲜的动物肝脏 (2)取材要点 动物肝脏要新鲜。 (3)冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。 (4)换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。 5 5、实验相关知识、实验相关知识 (1)加入 1mol/L 盐酸进行水解的目的是：改变细胞膜通透性，加速染色剂进入细胞；使染色 剂中的 DNA 与蛋白质分离；杀死细胞，有利于 DNA 与染色剂结合。 (2)为什么要进行水解：甲基绿和派洛宁不是活细胞所需要的物质，正常情况下，无法穿过 细胞膜进入细胞内，因此实验中使用盐酸破坏细胞膜，增加细胞膜的通透性，以方便染色剂 学 海 无 涯 3 进入细胞。同时，盐酸还能使细胞中染色体中的 DNA 和蛋白质分离，有利于 DNA 与甲基绿染 色剂结合。 (3)将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有 30温水的大烧杯中保温。 水浴加热的目的是使 小烧杯受热均匀。 六、形成性评价六、形成性评价 将对比自己做出来的实验结果和理想中的实验结果， 发现其中的差异并分析产生差异的 原因。
