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1、专题二课题微生物的实验室培养1、有关平板划线操作正确的是 （ ） A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养2、下列常用的无菌操作中错误的是 ( )A无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌 B用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒C实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精下列对灭菌和消毒的理解不正确的是()A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常
2、用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法(2012广东模拟)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的()。A利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加、为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列叙述不正确的是()A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏菌种容易被污染或产生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4保藏的方法6(2013衡阳模拟)下列关
3、于大肠杆菌的培养中叙述不正确的是()A在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃7平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是()A接种时再拿起来方便B在皿底上标记日期等方便C正着放置容易破碎D防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为()溶化调pH加棉塞包扎分装称量A BC D、从自然菌样
4、中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从 _环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 的培养基，并在 条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图甲效果的接种方法是 ，获得图乙效果的接种方法是 。（4）配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行 ，接
5、种前要进行 。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在 条件下进行。1(8分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5 g10 g5 g20 g1000 mL(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行_处理。该培养基从物理性质上分类属于_。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)_。、（2011新课标）【生物 选修1：生物技术实践】（15分）有
6、些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。(2009宁夏卷)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑
7、_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方
8、法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色
9、不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。专题二课题微生物的实验室培养答案-、答案：(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌固体培养基(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。(任选两个). 【答案】（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 （3）强 （4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)
10、比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水 (2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高 (5)盐(或NaCl)选择培养基课题土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（ ）A比实际值高B比实际值低C和实际值一致 D比实际值可能高也可能低2.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分
11、别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养24-48小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数3在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()。A鉴别培养基 B加富培养基C选择培养基 D基础培养基4.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是 （ ）A.图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B.如果要测定中活细菌
12、数量，常采用稀释涂布平板法C.若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源D.使用平板划线法可以在上获得单菌落5.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。 实验步骤： （1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。（2）为了得到更加准确的结果，你选用法接种样品。（3）适宜温度下培养。结果分析： （1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信 ，其理由是 。 A一个平板，统计的菌落数是230 B两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240 C三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260 D四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 （2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布
