《【最新】蛋白质功效比值(PER)课题设计》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【最新】蛋白质功效比值(PER)课题设计（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验三 蛋白质功效比值（PER）课题设计（一） 目的、意义与应用本实验的目的在于掌握蛋白质功效比值的概念及意义，了解动物实验的设计分组及动物饲料的配制等。蛋白质功效比值（protein efficiency ratio，PER）是测定蛋白质生物利用率最常用的方法，其定义为在严格规定的条件下，处于生长发育期的幼龄动物每摄入 1 克待测蛋白所增加的体重克数。本方法是美国公职分析化学家协会（AOAC）推荐的测定食物蛋白质营养效应的官方标准方法之一，国际上广泛应用。本方法方便具体，虽然动物摄入的蛋白质克数与体重增加之间并不成线形关系，但仍不失为评价蛋白质量的较好方法。此外，为了减少各实验室测定结果的差
2、异，常以已经标定的酪蛋白（标准参考蛋白）的 PER 值为2.5，以此校正测得的 PER 值。本法适用于含氮量高于 1.8%的物质。（二） 实验动物要求用同一来源、同一品系、年龄相近、刚断奶（出生 21-28 天）的雄性大鼠。实验室应保持各种环境条件适宜于大鼠的正常生长发育（室温 22-24，相对湿度为 50%-65%，室内空气要流通） 。动物在实验室适应 3-7 天才能投入实验使用。（三） 动物分组每一种待测样品设一个实验组，外加一个参考（标准）酪蛋白组（阳性对照组） 。大鼠按体重顺序，以随机区组法分组，每组动物不少于 10 只，每组动物数相同。各组动物平均体重组间差不大于 5 克，组内体差不
3、大于 10 克。（四） 动物饲料配方PER 实验用合成饲料。基础饲料中各成分物质用量为：（1） 样品量 X=1。6*100/样品 N（%）（2） 植物油（棉籽油或豆油）为 8-X*样品乙醚浸出物（%）/100（3） 混合无机盐为 5-X*样品灰分（%）/100（4） 混合维生素 1（5） 纤维素为 1-X*样品纤维（%）/100（6） 水分为 5-X*样品水分（%）/100（7） 最后加玉米淀粉或蔗糖至 100 克，充分混匀。在配饲料前，应先测定样品中各种营养素的含量（蛋白质、脂肪、水分、纤维素和灰分）以使各组实验饲料及参考酪蛋白组饲料间各种营养素相等（达到 AOAC 标准） ，使之相互之间具
4、有可比性。实验组蛋白质来源为待测样品，而对照组（参考酪蛋白组）的蛋白质则要来自参考酪蛋白。参考酪蛋白：（国外用 ANRC（商品名称）酪蛋白，此物已经标化，其 PER=2.50。如无ANRC 酪蛋白。也可用经过标化的酪蛋白作为参考酪蛋白。混合盐（美国药典，USP）：称取 NaCL139。3g，取其中一部分置乳钵中，加入 0.79gKI,研磨,过 60 目筛,放入棕色瓶中。将余下的 NaCL 加入下列成分研磨：KH 2PO4 389.0g；CaCO 3381.4g；MgSO 457.3g；FeSO 7H2O27.0g；MnSO 4 H2O4.01g；CuSO 45H200.447g；ZnSO 47
5、H2O0.54g；CoCl 6H2O0.023g；研匀后过 60 目筛,与已经制备的 NaCl-KI 混合,棕色瓶储存备用。混合维生素：VitA（干燥稳定）2000IU，vitD（干燥稳定）200IU，VitE（干燥稳定）10IU，VitK0.5mg，胆碱 200mg，对氨基苯甲酸 10mg，肌醇 10mg，烟酸4mg，VitB 20.8mg，VitB 10.5mg，泛酸钙 4mg，VitB 60.5mg，叶酸 0.2mg，生物素0.04mg，VitB 120.003mg，加葡萄糖或淀粉至 1000mg。（五） 动物饲养实验期为 28 天，在此期间，动物单笼饲养，分别喂各组实验饲料。动物自由摄
6、食及饮水。在实验期间进可能保持实验组动物与参考（标准）酪蛋白组动物的全部环境条件一致。实验期间应记录：（1） 实验开始时每只大鼠的体重（精确至 0.1g） ；（2） 每天各只大鼠的饲料摄取量；（3） 定期（最多 4 天）称量每只大鼠的体重； （4） 实验最后一天记录大鼠的体重和摄食量；（六） 实验结果处理及 PER 值计算（1） 计算每只动物 28 天内体重增长值（g） ；（2） 计算每只动物 28 天内蛋白质摄入量（g） ；（3） 计算 PER直观 PER=体重增长值（g）/蛋白质摄入量（g）相对 PER%=直观 PER*100/本实验参考酪蛋白 PER校正 PER=直观 PER*2.5/本实验参考酪蛋白 PER（七） 结果评价根据各组平均 PER 值，结合其他蛋白质质量评价指标，对该样品的蛋白质质量进行综合评价。（八） 实例计算请就以下实验结果，分别计算出脱脂大豆粉、浓缩大豆分离蛋白和分离大豆蛋白的直观 PER，相对 PER 及校正 PER。PER 实验结果见表 9。表 9 PER 实验结果实验材料 动物增重 蛋白质摄入量直观 PER 相对 PER 校正 PER脱脂大豆粉蛋白523 304浓缩大豆蛋白623 312分离大豆蛋白564 421参考酪蛋白 809 311
