阴道及宫颈分泌物检查ppt课件

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1、阴道及宫颈分泌物的实验室检查 农村妇女宫颈癌检查项目技术培训 2019 1 阴道分泌物来自于 阴道黏膜 宫颈腺体 前庭大腺 子宫内膜 女性生殖系统分泌的液体 俗称 白带 它用于女性生殖系统感染 肿瘤的诊断 雌激素水平的判断及STD等有一定应用价值 2019 2 检查内容 阴道分泌物清洁度分级念珠菌 滴虫 线索细胞细菌性阴道病阴道分泌物性状PH值胺实验线索细胞 2019 3 检查内容 宫颈分泌物宫颈炎症淋球菌 2019 4 检查方法 标本采集一般性状检查湿片显微镜检查革兰氏染色显微镜检查 2019 5 阴道微生态平衡体系 解剖结构微生态菌群内分泌调节 2019 6 阴道微生态菌群及特点 寄生于健

2、康妇女阴道中的细菌和微生物400种以上 健康妇女的阴道内已分离出微生物达29种之多 厌氧与需氧菌比例约为5 1 1 革兰阳性需氧菌及兼性厌氧菌 乳酸杆菌 棒状杆菌 非溶血性链球菌 肠球菌 表皮葡萄球菌等2 革兰阴性需氧菌及兼性厌氧菌 大肠杆菌 加德纳菌等3 厌氧菌 梭状芽孢杆菌 消化链球菌 类杆菌及梭形杆菌等4 其它条件致病菌 支原体 念珠菌等 2019 7 阴道微生态菌群及特点 在正常阴道菌群中 以产生H202乳酸杆菌占优势 健康妇女的分离率可达50 80 阴道乳酸杆菌在维持阴道正常菌群及阴道的自净作用中起着关键作用 2019 8 阴道优势菌的特点 乳酸杆菌生物性状 革兰氏阳性杆菌 无芽胞

3、鞭毛 荚膜 细长弯曲或成球杆状 单个 双极链状无动力的厌氧或兼性厌氧菌生长适宜温度30 40度 最适宜PH3 0 4 8阴道内最常见乳杆菌有20多种 嗜酸 卷曲 格式乳杆菌主要产H202唾液乳杆菌发酵乳杆菌等 2019 9 阴道优势菌的五大功能 分解糖原 维持阴道酸性环境产生多种抑菌物质 乙酸 H202 乳酸菌素 硬脂酸竞争粘附 也称占位性保护竞争营养 大量定植于阴道中的乳酸杆菌营养处于竞争优势状态 利用阴道上皮细胞中的糖原 减少其他菌群的碳源供应 通过竞争营养物而干扰其它菌的生长 刺激免疫系统 激活机体多种免疫细胞 诱导产生TNF a IFN IL 12等细胞因子 从而发挥抗肿瘤和免疫调节作

4、用 2019 10 阴道微生态的特点 宿主和菌群之间 菌群与菌群之间是相互制约 相互作用 相互依赖的对立统一 或是共生关系或是拮抗关系 共处于阴道微生态环境中 保持者协调平衡的状态 2019 11 阴道微生态平衡被打破 就会发生疾病 2019 12 致病原因 传染 不洁避孕工具 卫生用品传染 性传播阴道灌洗 破坏内环境免疫力下降 月经期 妊娠 糖尿病患者等 菌群失调 大剂量长期抗生素药物 抗肿瘤药物内分泌紊乱 卵巢功能衰退 雌激素水平降低 2019 13 女性生殖道感染性疾病是常见病 多发病 常见疾病发病率念珠菌外阴阴道炎31 3 细菌性阴道病10 44 滴虫性阴道病7 44 生殖道菌群失调8

5、9 26 以上出自2009年第12期 中国实用妇产科杂志 2019 14 标本采集 通常由妇产科医师采集 采集前24h禁止性交 盆浴 灌洗 上药 一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部 穹后部及宫颈口擦拭 及时送检 制备成生理盐水涂片 直接湿片镜检或经革兰氏染色镜检 用于阴道清洁度检查 病原微生物检查 性传播疾病检查等检查 2019 15 一般性状检查 正常 白色稀糊状 无味 量与雌激素水平 生殖器官充血程度有关 2019 16 异常 无色透明粘性白带 见于雌激素药物和卵巢颗粒细胞瘤 脓性白带 化脓性 泡沫状脓性白带 慢性宫颈炎 老年性阴道炎 子宫内膜炎 宫颈积脓阴道异物等 豆腐渣样白带 念球菌阴道

6、炎 血性白带 肿瘤 宫颈息肉 子宫粘液下肌瘤 老年性阴道炎等 黄色水样白带 组织变性坏死所致 子宫粘液下肌瘤 恶性肿瘤奶油状白带 见于阴道加德纳感染 2019 17 涂片检查 阴道分泌物生理盐水湿片镜检 在载玻片上加1滴或2滴生理盐水 将阴道分泌物与生理盐水混合成悬液 加盖玻片后 在显微镜下检查 阴道分泌物涂片革兰氏染色宫颈分泌物涂片革兰氏染色 2019 18 检查内容 阴道 宫颈分泌物检查方法及取材部位 2019 19 阴道分泌物湿片显微镜检查 质量保证 检验前 载玻片要干净 NS要新鲜 检验中 涂片要均匀 观察标准 检验后 与临床疾病的符合程度 2019 20 阴道分泌物湿片显微镜检查 检

7、查内容 用高倍镜检查 主要依靠上皮细胞 杆菌与球菌的比例 白细胞的数量划分清洁度 在低倍镜 10 10 下检查 寻找呈典型晃动运动的毛滴虫 2019 21 阴道分泌物湿片显微镜检查 检查内容 在高倍镜 10 40 下检查 观察假丝酵母菌 孢子和假菌丝 和毛滴虫 以及线索细胞 线索细胞为阴道上皮细胞表面吸附或聚集着许多球杆菌 使细胞呈颗粒状外观 细胞边缘模糊不清呈锯齿状 2019 22 阴道分泌物湿片显微镜检查 临床意义 清洁度分级 湿片中见活动滴虫 可诊断滴虫性阴道炎 敏感性为38 82 湿片中见假菌丝或芽生孢子支持假丝酵母菌性阴道病的诊断 2019 23 阴道分泌物湿片显微镜检查 临床意义

8、一般认当线索细胞占全部上皮细胞的20 以上时为线索细胞阳性 根据线索细胞能准确诊断85 95 的细菌性阴道病 卵巢功能不足 雌激素减低 阴道上皮增生较差时可见到阴道杆菌减少 易感染 清洁度为 度时常可同时发现病原微生物 提示存在感染引起的阴道炎和 或宫颈炎 盆腔炎 2019 24 阴道清洁度判断标准 参考值 为正常 为异常 临床意义 阴道的清洁度与阴道杆菌多少有关 而阴道杆菌的消长与卵巢功能 病原体侵袭等因素有关 清洁度的检查对阴道炎症的诊断和治疗有重要价值 正常情况下 阴道清洁度与女性激素的周期变化特点有关 卵巢功能不足时 易被病原体感染 导致阴道不清洁 病理情况下 常见的有非特异性 霉菌性

9、 滴虫性等各种阴道炎 2019 25 清洁度I级 2019 26 清洁度III级 2019 27 清洁度IV级 2019 28 革兰氏染色显微镜检查 阴道分泌物涂片革兰氏染色显微镜检查内容 油镜观察阴道菌群的情况及有无线索细胞 正常阴道菌群以乳酸杆菌占优势 可能有少量的球菌和棒状杆菌 临床意义 观察细菌的染色性 形态和排列 观察假丝酵母菌孢子和假菌丝 观察线索细胞敏感性和特异性高于湿片法 分别为89 和93 2019 29 革兰氏染色显微镜检查 宫颈分泌物涂片革兰氏染色显微镜检查内容 油镜观察细胞 如上皮细胞 中性粒细胞 情况和病原体的染色特性 临床意义 多形核白细胞数 15 HPF 或油镜下

10、多形核白细胞 10 提示有宫颈感染 诊断宫颈淋球菌感染与培养的符合率50 70 确诊需做淋病奈瑟菌培养 2019 30 革兰氏染色法 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家ChristainGran创立的 基本步骤是 1 初染 结晶紫染色2 媒染 碘液媒染3 脱色 乙醇脱色4 复染 番红复染 2019 31 革兰氏染色法实验原理 细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的 初染后 所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色 碘作为媒染剂 它能与结晶紫结合成结晶紫 碘的复合物 增强染料与细菌的结合力 当用脱色剂处理时 革兰氏阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成 壁厚 类脂质含

11、量低 用乙醇脱色时细胞壁脱水 使肽聚糖层的网状结构孔径缩小 透性降低 从而使结晶紫 碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内 经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色 革兰氏阴性菌则不同 由于其细胞壁肽聚糖层较薄 类脂质含量高 所以当脱色处理时 类脂质被乙醇溶解 细胞壁透性增大 使结晶紫 碘的复合物比较容易被洗脱出来 用复染剂复染后 细胞被染上复染剂的红色 2019 32 操作步骤 1 涂片 干燥 固定 2 染色 1 初染 加草酸铵结晶紫一滴 约一分钟 水洗 2 媒染 滴加碘液冲去残水 并覆盖一分钟 水洗 3 脱色 将水甩净 并衬以白背景 用95 乙醇滴洗至刚刚无紫色为止 约20 30秒 立即用水冲净乙醇

12、 4 复染 用番红液染1 2分钟 水洗 2019 33 3 镜检 干燥后 油镜观察 以分散开的细菌颜色为准 2019 34 经此法染色后 细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌 细胞中初染剂被脱色剂洗脱而染上复染剂的颜色 红色 的细菌为革兰氏阴性菌 GramstainofGram GramstainofGram 2019 35 阴道中常见细菌革兰氏染色特性 乳酸杆菌为大的革兰阳性杆菌 末端钝圆或平齐 呈单根 链状或栅状排列 阴道加德纳菌为革兰染色不定性球杆菌 厌氧菌包括动弯杆菌 普氏杆菌或阳性球菌 淋病奈瑟氏菌为革兰染色阴性的双球菌 2019 36 阴道毛滴虫 镜检 染色 不染色 胶乳免疫凝

13、集法 单抗 2019 37 真菌 白念珠菌 85 阴道纤毛菌 不染色 染色镜检均可 2019 38 加德纳菌 2019 39 线索细胞阴道鳞状上皮细胞黏附了大量加德纳菌及其他短小杆菌而形成巨大细胞团 上皮细胞表面粗糙 有斑点和大量细小颗粒 2019 40 淋病奈瑟菌 宫颈管内分泌物 革兰染色 G 双球菌 染色镜检 培养 免疫学检查 PCR等 2019 41 淋病奈瑟菌培养 1 菌落特征 生长24小时淋病奈瑟菌菌落直径大约为0 5 1cm 呈圆形 灰白色 湿润 光滑 半透明呈露滴样凸起菌落 2 细菌特征 为G 双球菌 直径0 6 0 8 m 肾形或卵圆形 常成双凹面相对排列 无芽孢 无鞭毛 有荚

14、膜 3 氧化酶试验 试剂为1 盐酸四甲基对苯二胺或1 盐酸二甲基对苯二胺溶液 在10 15秒钟内出现深紫红色 二甲基对苯二胺 或深紫色 四甲基对苯二胺 即为阳性反应 淋病奈瑟菌氧化酶试验为阳性 但氧化酶反应并非特异性试验 所有奈瑟菌属细菌及许多其它细菌亦呈阳性 如氧化酶阴性 一般可排除淋病奈瑟菌 2019 42 淋病奈瑟菌培养 结果判断 标本培养24 48小时后观察结果 48小时仍无菌生长时 可作出淋病奈瑟菌培养阴性的报告 对选择性培养基上分离的可疑菌落应作初步鉴定和确证性鉴定 菌落特征 革兰染色和氧化酶试验是初步鉴定淋球菌的三个主要指标 确证性鉴定是在初步鉴定的基础上利用生化反应将细菌鉴定到种 2019 43 2019 44 2019 45 后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料仅供参考 实际情况实际分析 感谢您的观看和下载 Theusercandemonstrateonaprojectororcomputer orprintthepresentationandmakeitintoafilmtobeusedinawiderfield 谢谢 2019 48