细菌分子生物学.ppt

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1、細菌 分子生物学 DNA複製 5 3 3 5 鎖 鎖 岡崎 5 3 3 5 RNA DNA DNA DNA DNA 酵素aabb w 35 10 TATAAT Pribnow TATA RNA 酵素 転写 RNA合成 DNA 原核生物 転写 1 転写開始点 TTGACA Pi lacI O1 O2 Plac lacZ lacY lacA mRNA mRNA 結合 誘導因子 IPTG RNA 結合 阻害 転写調節 遺伝暗号表 mRNA ATP tRNA tRNA合成酵素 tRNA3 末端 10 葉酸 細菌遺伝子 突然変異 塩基 置換 点突然変異pointmutation Transition 転

2、位 A G G A T C C TTransversion 転換 A T A C G T G CT A T G C A C G塩基 欠失 deletion 塩基 挿入 insertion 突然変異 型 変異pointmutation 酸残基 変化TAC Tyr TCC Ser 変異pointmutation 終止 TAC Tyr TAA stop 遺伝子 変異 酸残基 変化 TAC Tyr TAT Tyr ACCCGTGGTATCTTCATAACCGThrArgGlyIlePheIleThrACCCGTGTATCTTCATAACCGThrArgValSerSerStop deletion 変異

3、deletion insertion 読 取 枠 細菌 主 変異現象 形態 変化鞭毛 線毛 莢膜 消失 抗原性 病原性変化集落 変化S R変異 平滑正円形 粗面不規則辺縁 陰性菌 多糖変異R S変異炭疽菌 結核菌H O変異 形成 孤立集落形成 属鞭毛消失H抗原 鞭毛抗原 O抗原 菌体表面抗原 抗原性 変化H抗原相変異 属Vi W変異強毒 virulence抗原 細菌 主 変異現象 毒力 病原性 変化弱毒株attenuatedstrain無毒株avirulentstrain人工培地 継代培養 病原性低下耐性 抵抗性 変化薬剤耐性化 放射線 温度 対 感受性 変化生化学的性状 変化autotrop

4、h 原株 auxotroph 栄養要求変異株 塩基類似体 ICR 191 化剤 他 DNA修飾剤 化学的変異原 DNA 取 込 変異 二本鎖DNA 挿入 変異 化 変異 化 変異 A G T C T C 2 互変異性 放射線 X線 線 DNA鎖切断 再構成 巨大損傷 紫外線 同一DNA鎖上 残基 二量体化 二量体 DNA損傷 修復 光回復紫外線 生 青色光 修復 除去修復 損傷部分 切 出 DNA DNA 修復組換 修復損傷DNA 複製時 生 相同DNA鎖 埋 SOS修復DNA損傷 recA遺伝子発現 lexA遺伝子産物分解 DNA修復遺伝子 転写活性化 DNA損傷 検出 Rec 枯草菌 re

5、c 株 DNA損傷高感受性 利用 化学物質 DNA損傷性 検出Ames Salmonellatyphimurium 要求株 利用 変異原 復帰変異 his his 活性 検出rya変異 膜透過性 亢進 細胞膜変異uvrB変異 除去修復能 欠失変異 上 複製 起 hisG遺伝子 染色体 自律複製 DNA分子染色体 細胞内 染色体 独立 自律複製 細菌 生存 必須 DNA分子環状二本鎖 線状二本鎖 環状一本鎖 ori ColE1 6 6kb E1 複製開始点 4 4kb pBR322 ori TcR AmpR 耐性 耐性 大腸菌 4 6Mb F因子 F 大腸菌 接合 DNA組換 関与 菌 P因子

6、緑膿菌 PF因子R因子 R 薬剤耐性遺伝子 有 接合伝達能 狭義 R因子 産生因子大腸菌 抗菌性毒素 質遺伝子 有 抗菌性毒素 質 病原性 Ent 腸管毒素原性大腸菌ETEC 毒素遺伝子 含 Hly 溶血毒 遺伝子 含 IS3 IS2 IS3 組換 領域 tra oriT oriV F 100kb 100kb 薬剤耐性遺伝子群 R IS1 IS1 oriT tra ori 二 異 DNA分子 会合 交差 起 新 DNA 組 合 生 相同的組換 homologousrecombination DNA 相同領域間 細菌 普遍的組換 Holliday 非相同的組換 nonhomologousreco

7、mbination DNA 非相同領域間 細菌 稀 哺乳動物 一般的転移因子 組換 DNA組換 recombination DNA組換 分枝鎖移動 Holliday Holliday構造 解離 解離 or C A T G C A T G 遺伝子 伝達 Lederberg Tatum 大腸菌 接合 発見 1947年 接合 conjugation 交配 mating 過程 F 働 染色体遺伝子 別 菌 伝達 F 大環状 100kb 移行 関 tra遺伝子群 32kb 有 種類 複製過程oriV 遊離 複製染色体 挿入 染色体oriC 複製 tra遺伝子群32kb 100kb 伝達時 複製開始点 複

8、製 開始点 IS 挿入配列 因子群 転移 必要 配列 oriT originoftransfer F oriV 伝達 必要 遺伝子群 60遺伝子 相同組換 転移 稀 染色体 挿入 IS因子 F E coli染色体 挿入F oriC oriV 挿入後 F 一部 複製 oriV 抑制 Hfr菌挿入F 持 F 菌遊離F 持 形質転換 外来 DNA 導入 細菌 形質 変化 現象 DNA 細胞 導入 遺伝形質 変化 competent DNA 取 込 状態 肺炎球菌対数増殖期 自然 菌特殊 富栄養培地中 大腸菌低温 塩化 処理 染色体 侵入 外被 染色体 粒子 放出 染色体 増殖 外被 質 合成 溶菌

9、環 15 60分 溶原化 溶原性 生活環 形質導入 transduction 粒子 宿主細胞 DNA 別 菌 運 菌 染色体 組換 起 変換 phageconversion 遺伝子 形質発現 細菌 形質 変化 遺伝子 宿主染色体 組 込 必要 細菌染色体 DNA 完全 粒子 不完全 粒子 供与染菌色体DNA片 完全 粒子 溶原化 供与菌DNA 転移因子 transposableelement 上 部位 別 部位 移動 DNA配列挿入配列 insertionsequence IS 1kb前後 小 因子 転移酵素 両末端 逆向 反復配列 invertedrepeatsequence IR transposon 抗生物質耐性遺伝子 両末端 挿入配列 RepliconA ReliconB Cointegrate TE 転移因子 解離 非複製的 cut paste 転移 Donor Recipient 複製的転移 融合 細胞融合 細胞壁溶解酵素 細菌細胞A A 細菌細胞B B 溶液 融合細胞 A B

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