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1、真菌 真菌 有细胞壁 典型细胞核 不含叶绿素 不分根 茎 叶的真核细胞型微生物 细胞质内有完整的细胞器 2019 1 原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较 2019 2 Dimorphism 二相性真菌 机体内寄生37 Unicellular Multicellular 含动物蛋白培养基 yeast 沙保氏培养基25 普通培养基25 mold 2019 3 2019 4 真菌繁殖结构 一条菌丝可生成多个孢子 MorphologyofSpore 2019 5 Categoriesofspore sexualspore asexualspore 分生孢子 叶状孢子 孢子囊孢子 芽生孢子 厚膜孢子
2、 关节孢子 大分生孢子 小分生孢子 2019 6 2019 7 厚膜孢子 2019 8 关节孢子 2019 9 2019 10 标本 1 皮肤的角质性物质 2 各种分泌物和排泄物 3 血液和体液 4 脓汁及渗出物 1 采集的标本要适宜 2 在用药前采集标本 3 采集的标本量要足 4 严格无菌操作 5 采集的标本立即送检 注意 2019 11 镜检真菌形态真菌抗原检测真菌分离培养与鉴定真菌核酸检测真菌毒素检测 实验室检验 2019 12 癣病标本多用KOH湿片检查法 2019 13 意义 判断某些真菌种的致病性等 如皮肤癣菌 曲霉等 直接镜检阳性表示 有诊断意义 看到的就是真菌的形态 可确定某些
3、致病性真菌的属或种 有假阳性结果 局限性 阴性结果不能排除真菌感染 2019 14 常用的染色方法 常用的染色方法有革兰染色 瑞氏染色 荧光染色 乳酸酚棉蓝染色 还有墨汁负染色等 对检测骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌 需作瑞氏染色或姬氏染色后镜检 检测病人脑脊液标本中新生隐球菌 需作墨汁负染色后检查 背景为黑色 新生隐球菌和荚膜不着色 2019 15 二 真菌抗原检测 白假丝酵母菌甘露聚糖抗原 隐球菌多糖荚膜抗原 组织胞浆菌循环多糖抗原常用的方法有胶乳凝集试验 ELISA 半定量放射免疫法 2019 16 三 真菌的分离培养 真菌的培养特点 三低两高 真菌培养是目前准确鉴定真菌的可靠方法 平皿
4、培养大试管培养玻片培养 2019 17 菌落性质 酵母菌还是霉菌 菌落大小 病原性真菌菌落小 而条件致病性真菌菌落大 致病性真菌菌落下沉 有时使培养基开裂 污染性真菌菌落不下沉 很少引起开裂 菌落颜色病原性真菌颜色淡 污染真菌颜色深 菌落的性状是鉴别真菌的重要特征 2019 18 真菌鉴定 1 糖 醇 类发酵试验 2 同化碳源试验 3 同化氮源试验 菌种鉴定是一个复杂过程 仅观察菌落形态是远远不够的 还需作生化反应 分子生物学鉴定 必要时将菌种送有关单位鉴定 2019 19 核酸检测 毒素的检测动物试验 2019 20 1 多烯类抗生素 如两性霉素B 制霉菌素 曲古霉素等 2 吡咯类 包括酮康
5、唑 伊曲康唑 氟康唑 伏立康唑 克霉唑 益康唑等 3 其他类如氟胞嘧啶 抗真菌药物分类 化学结构分类 2019 21 临床标本 直接检查 检测抗原 直接镜检 固定标本染色 墨汁负染色法 KOH法 毛发指甲皮屑 脑脊液 病理检查 2019 22 小结 真菌的致病性 真菌的基本特性 菌丝 孢子 培养特性 标本采集注意事项 常用的检查方法 显微镜检查 分离培养 生化实验 2019 23 思考题 1 简述真菌的致病性特点 2 真菌标本采集是有哪些注意事项 3 形态学检查和培养在真菌检查中的意义 2019 24 一 掌握毛癣菌属 表皮癣菌属和小孢子丝菌生物学特性 微生物学检验方法及鉴定 二 熟悉浅部真菌
6、感染的种类 目的要求 2019 25 皮下组织感染真菌 毛癣菌属 表皮癣菌属 小孢子菌属 表面感染真菌 皮肤癣真菌 糠秕马拉色菌 着色真菌 孢子丝菌 2019 26 位置 寄居于人体皮肤和毛干的最表层 因不接触组织细胞 很少引起宿主细胞反应 嗜脂性酵母样菌代表 秕糠马拉色菌 Malasseziafurfur 症状 皮肤表面出现花斑癣 汗斑 2019 27 微生物检验 1 直接显微镜检查可采用透明胶带粘贴取材法 将透明胶带直接贴于皮肤表面 数分钟后揭下 直接贴于载玻片上镜检或经棉蓝染色或革兰染色后镜检 可见孢子和菌丝 孢子为圆形或卵形 厚壁 芽颈较宽 常成簇分布 菌丝粗短 呈腊肠样 2 分离培养
7、与鉴定 2019 28 毛癣菌属 毛癣菌属 Trichophyton 属半知菌亚门 丝孢菌目 丛梗孢菌科 有20余种 其中14种能引起人和动物的感染 临床上常见的有红色毛癣菌 trichophytonrubrum 须癣毛癣菌 T mentagrophytes 又称石膏样毛癣菌 许兰毛癣菌 T schoenleinii 又称黄癣菌 紫色毛癣菌 T violaceum 断发毛癣菌 T tonsurans 2019 29 毛癣菌 菌落灰白 红 橙或棕色 表面呈绒毛状 粉粒状或蜡样 大分生孢子细长棒状薄壁 菌丝有螺旋状 球拍状 鹿角状和结节状 2019 30 微生物检验 1 标本采集采集新发生的皮肤损
8、害边缘皮屑 指甲近尖端下面甲屑 拔取无光泽病发 2 直接显微镜检查皮屑10 KOH液 指甲25 KOH 25 NaOH处理镜检可见透明 有隔 常有分支的菌丝及成链的关节孢子 2019 31 皮肤癣菌感染的毛发 2019 32 三 分离培养标本70 乙醇或在青 链霉素混合液内处理5min生理盐水洗3次接种沙氏琼脂斜面25 培养观察菌落特征 四 其他鉴定试验毛发穿孔试验脲酶试验特殊营养需要试验 2019 33 毛发穿孔试验 将头发发剪成lcm长 置于已加入25ml蒸馏水和2 3滴10 酵母浸膏液的平皿内 高压灭菌 将待检皮肤真菌接种于平皿内 置25 孵育四周 每周检查一次 每次取数根毛发置载玻片上
9、 经乳酚棉蓝染色后 置低倍镜下观察 若毛发有裂口或陷凹者为阳性 否则为阴性 2019 34 药物敏感试验 对灰黄霉素 伊曲康唑等药物敏感 2019 35 表皮癣菌属 表皮癣菌属 Epidermophyton 目前只有一个种 即絮状表皮癣菌 E floccosum 能引起人类感染 絮状表皮癣菌是一种常见的皮肤癣菌 可引起皮肤感染如股癣 足癣 体癣 手癣和甲癣 2019 36 絮状表皮癣菌生物学性状 皮屑和甲屑经 10 KOH液消化镜检可见分枝断裂的有隔菌丝 少见孢子培养后 菌落初为白色鹅毛状 以后转变为黄色粉末状 镜下可见球拍状菌丝 卵圆形或巨大棒状薄壁大分生孢子 无小分生孢子 在陈旧培养物中可
10、见厚膜孢子 2019 37 表皮癣菌 菌落初为白色鹅毛状 以后变为黄绿色粉末状 粗棒状薄壁大分生孢子 菌丝球拍状 2019 38 小孢子菌属 我国常见的有铁锈色小孢子菌 石膏样小孢子菌和狗小孢子菌等 小孢子菌属感染皮肤和毛发 很少感染甲 2019 39 小孢子菌生物学特性 皮屑和毛发 10 KOH处理镜检 皮屑中有分枝断裂菌丝 在毛发中呈现小孢子镶嵌的鞘包裹着发干 在沙氏培养基中可见白色 棕黄色或黄褐色 粉末或绒毛状菌落 镜下可见梳状 球拍状或结节状菌丝 卵圆形小分生孢子 厚壁梭形 纺锤形 大分生孢子 2019 40 小孢子癣菌 菌落为灰色 橘红色或棕黄色 厚壁大分生孢子 菌丝有结节状 梳状和
11、球拍状 2019 41 2019 42 2019 43 毛癣菌属 2019 44 表皮癣菌属 2019 45 小孢子癣菌属 2019 46 皮下组织真菌感染 主要有着色真菌和孢子丝菌着色真菌感染发生在暴露部位 称着色真菌病 卡氏枝孢霉和裴氏着色芽生菌 申克孢子丝菌 属腐生性真菌 常因外伤接触带菌的花草等引起感染 此菌可引起孢子丝菌下疳 此菌也可引起深部感染 是一种二相性真菌 2019 47 着色真菌 分生孢子 树枝型 剑顶型 花瓶型 2019 48 2019 49 多发生四肢暴露部位 开始为小丘疹 表面干燥或湿润 有鳞屑或鳞痂 逐渐形成斑块结节 呈疣状增殖 2019 50 直接显微镜检查 单个
12、或成群厚壁孢子 有横隔或中间十字分隔 培养 沙氏培养基 生长缓慢 菌落从灰黑色至黑色 有气生菌丝 菌落涂片镜检可见三种类型的分生孢子 有鉴定价值 生化反应 不能水解淀粉 不凝固牛奶 能同化硝酸盐 需维生素B1 对5 FC 伊曲康唑 氟康唑敏感 易产生耐药性 2019 51 孢子丝菌 申克孢子丝菌 传染源 人和动物 传播途径 经破损皮肤接触感染 二相性真菌 2019 52 微生物检验 1 直接显微镜检查 卵圆形的孢子 2019 53 2 分离培养与鉴定 将标本接种于沙氏培养基上25 培养 2 3d开始生长 初为白色湿润的酵母型菌落 以后变为淡咖啡色至深褐色 37 培养2 3d 可形成乳白色或淡褐
13、色酵母型菌落 3 对碘化钾 伊曲康唑 特比萘芬等药物敏感 2019 54 脚气 脚气是一种常见的真菌感染性皮肤病 多见于趾间 足底及足缘 有深在性水疱 糜烂及鳞屑 伴有瘙痒等症状 多见于成人 夏秋重 冬春轻 足多汗及常穿胶鞋者易患本病主要致病菌为红色毛癣菌 石膏样毛癣菌和絮状表皮癣菌 2019 55 医学上通常将脚气分三型 糜烂型 水疱型 角化型本病是由皮肤癣菌所引起的 足部多汗潮湿或鞋袜不通气等都可诱发本病 皮肤癣菌常通过污染的澡堂 游泳池边的地板 浴巾 公用拖鞋 洗脚盆而传染 2019 56 预防 1 要保持脚的清洁干燥 勤换鞋袜 鞋子要通气良好 2 不要用别人的拖鞋 浴巾 擦布等 不要在
14、澡堂 游泳池旁的污水中行走 3 公用澡堂 游泳池要做到污水经常处理 以防相互传染 2019 57 治疗 灰黄霉素 伊曲康唑派瑞松 曲安奈德益康唑乳膏达克宁 硝酸咪康唑软膏 2019 58 第三十章深部感染真菌 2019 59 一 掌握深部感染真菌概念 分类 检验程序 掌握假丝酵母 隐球菌 卡氏肺孢菌微生物学特性 检验方法及鉴定要点 二 熟悉荚膜组织胞浆菌孢子鉴别要点 三 了解抗真菌药物分类及临床应用 目的要求 2019 60 2020 5 19 61 可编辑 一 假丝酵母菌属 分类 临床意义 生物学特性 微生物学检验 二 隐球菌属 分类 临床意义 生物学特性 微生物学检验 三 曲霉菌属 分类
15、临床意义 生物学特性 微生物学检验 四 组织胞浆菌属 分类 临床意义 生物学特性 微生物学检验 五 卡氏肺孢菌 分类 临床意义 生物学特性 微生物学检验 教学内容 2019 62 DEFINITION 是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌 主要有假丝酵母菌 隐球菌 曲霉 毛霉 组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等 组织胞浆菌为二相性真菌 假丝酵母菌 曲霉菌 毛霉菌和卡氏肺孢菌等为条件致病性真菌 只有在一定条件下才引起机体致病 2019 63 第一节假丝酵母菌属 假丝酵母菌 Candida 俗称念珠菌 生物学分类为半知菌亚门 半知菌纲 隐球菌目 假丝酵母菌属 本属菌有81个种 其中有11种对人有致病性 其中
16、白假丝酵母菌最为常见 2019 64 一 白假丝酵母菌 2019 65 圆形或卵圆形 直径3 6 m 革兰阳性 着色不均匀 出芽方式繁殖 在组织内可见芽生孢子 假菌丝 在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子 MicrobiologyCharacteristics 2019 66 将标本接种在沙氏培养基上 25 或37 培养1 d后 可出现奶油色类酵母型菌落 镜检可见假菌丝和芽生孢子 2019 67 1 直接显微镜检查 取脓汁 痰和局部炎症性分泌物直接涂片 革兰染色后镜检 显微镜见到革兰阳性 着色不均匀 圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝 可确认为假丝酵母菌感染 2 抗原检测 取病人血清作ELISA 免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原 3 核酸检测 用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测 具有较好的敏性和特异性 MicrobiologyExamination 2019 68 将标本接种在沙氏培养基上 25 或37 培养1 d后 可出现奶油色类酵母型菌落 镜检可见假菌丝和芽生孢子 2019 69 鉴定 1 芽管形成试验 将假丝酵母菌接种于0 2 0 5m 血清中 37 孵育1 5
