《平肺口服液抑制肺成纤维细胞生长和诱导凋亡 医学课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《平肺口服液抑制肺成纤维细胞生长和诱导凋亡 医学课件（15页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 平肺口服液抑制肺成纤维细胞生长和诱导凋亡 刘轩 李红艳 夏启胜 徐波 李鸿 贾倞 黄玉堂 李佩文 程志强中日友好医院 北京100029 中日友好医院临床医学研究所liuxuanchina 1 研究背景 放射性肺炎及肺纤维化是胸部放疗中部分正常肺组织因受到一定剂量射线照射而发生的放射损伤肺成纤维细胞是射线作用的效应细胞之一 它在射线作用下发生活化和增殖 持续合成并分泌细胞因子 从而导致胶原代谢调控失衡和肺组织纤维化 Imbalancedwound healingresponse WilsonMS WynnTA Pulmonaryfibrosis pathogenesis etiologyan
2、dregulation MucosalImmunol 2009Mar 2 2 103 21 2 平肺口服液是中日友好医院药学部中药复方制剂 该方源自中西医结合肿瘤专家李佩文教授经验方 能用于放射性肺炎的辩证论治1 治疗原则 养阴清肺 解毒散结实验研究表明 平肺口服液能有效预防大鼠放射性肺损伤21程志强 张嘉 刘轩等 平肺口服液在非小细胞肺癌放疗中的应用 中日友好医院学报 2009 23 6 334 3362刘轩 程志强 徐波等 平肺口服液对放射性肺炎大鼠肺组织细胞因子的调节作用 中国免疫学杂志 2009 25 9 808 812 3 HEstaininginlungtissueofratsaf
3、terasinglewholethoracicirradiationwithadoseof20GyA Normalcontrol B Modelgroup 4weeksafterirradiation C Modelgroup 8weeksafterirradiation D Pingfeigroup 4weeksafterirradiation E Pingfeigroup 8weeksafterirradiation 4 mRNAofIL 6 IL 10andIFN expressionintheratlungtissue4weeksafterasinglewholethoracicirr
4、adiation Note TotalRNAfromthelungtissuewasharvestedatthe4thweekafteradoseof20Gyirradiationinratwholethoraces mRNAofIL 6 IL 10andIFN expressionwasassayedbyRT PCR ProductsofRT PCRwereelectrophoresedin2 agarosegelinthepresenceofethidiumbromide 80V 20min withthesamesample sbeta actinasinternalcontrol Th
5、eratiosoftargetgenevsinternalcontrolwerecalculated andtheresultswereexpressedasmean standarddeviation mean sd TheintensitiesofthespecificbandswereanalysedusingthesoftwareQuantityOne4 4 0 Bio Rad todeterminewhetherthedifferenceswerestatisticallysignificant ComparedwithControlgroup P 0 01 Comparedwith
6、Modelgroup P 0 01 ComparedwithModelgroup P 0 05 5 研究目的 采用血清药理学方法 研究平肺口服液对人胚肺成纤维细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用 6 材料与方法 平肺口服液药物组成 百合15g 麦冬15g 五味子10g 白及10g 瓜蒌10g 鱼腥草30g 白花蛇舌草30g 桑白皮30g 浙贝母10g 生药含量2g mL 中日友好医院药学部 生产批号20070308 7 实验分组与检测方法 人胚肺成纤维细胞CCC HPF 1 第14代 购自中国医学科学院基础所细胞库普通培养组 完全培养基 含10 胎牛血清的高糖DMEM 血清对照组 完全培养基 10 正
7、常大鼠血清生药对照组 完全培养基 平肺口服液终浓度60mg mL含药血清A组 完全培养基 10g kg平肺口服液灌服所得血清含药血清B组 完全培养基 20g kg平肺口服液灌服所得血清 噻唑蓝 MTT 法检测细胞的增殖情况流式细胞术检测细胞周期和凋亡 8 结果 图1正常大鼠血清对CCC HPF 1生长的影响 mean sd n 5 于完全培养基中加入10 正常大鼠血清 培养120h之内大鼠血清不会对细胞生长产生明显影响 因此以该实验条件研究平肺口服液含药血清对CCC HPF 1生长的影响 图1 9 表1平肺口服液含药血清对CCC HPF 1生长的抑制作用 mean sd n 5 注 与普通培养
8、组相比 P 0 01 与血清对照组相比 P 0 05 与血清对照组相比 P 0 01 应用MTT法检测CCC HPF 1的增殖显示 各含药血清组在体外作用72h内对细胞生长均无明显影响 平肺口服液20g kg灌服所获大鼠血清 含药血清B 在体外作用96h和120h可分别抑制细胞生长 表1 图2 10 图2平肺口服液含药血清作用96h的CCC HPF 1注 a 普通培养组 b 血清对照组 c 生药对照组 d 含药血清A组 e 含药血清B组 11 图3平肺口服液含药血清作用96h对CCC HPF 1细胞凋亡率的影响注 a 普通培养组 b 血清对照组 c 生药对照组 d 含药血清B组 12 表2平肺
9、口服液含药血清作用96h对CCC HPF 1细胞周期 细胞凋亡率的影响 mean sd n 3 注 与血清对照组相比 P 0 05 P 0 01 与普通培养组相比 P 0 05 P 0 01 应用流式细胞术检测显示 平肺口服液20g kg灌服所获大鼠血清 含药血清B 可使CCC HPF 1细胞周期阻滞于G1 G0期 细胞凋亡增加 图3 表2 13 讨论 中药血清药理学研究方法是目前联系体内与体外研究 揭示中药作用机理的重要桥梁 建立平肺口服液血清药理学研究方法依据 1 平肺口服液20g kg灌服 造模前一周开始灌服 每日一次 每周5d 共5周 可有效预防大鼠放射性肺损伤2 血清药理学通法给药和采血原则 即将待测药每天给药两次 连续给药3d 末次给药后1h 2h采血 14 结论 平肺口服液20g kg灌服所获含药血清作用96h能抑制人胚肺成纤维细胞的生长 诱导细胞凋亡 以及使细胞周期发生G1 G0期阻滞 结合体内研究结果 认为该药有可能从抑制肺成纤维细胞增殖和诱导凋亡方面预防放射性肺损伤的发生 15
