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1、1、 影响琼脂糖凝胶DNA迁移率的因素有那些，分别有怎样的影响？（1） DNA分子大小：DNA片段越长，泳动速度越慢（2） DNA的结构：DNA通常有三种不同的构象：共价闭合环状、线型、开环型：其中共价闭合环状的迁移速度最快，其次为线状，开环型最慢（3） 琼脂糖的浓度：DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系（4） 所加电压：在低浓度，低电压下分离效果较好。在低电压下，泳动速度与电场强度成正比，但最高电场强度不宜超过5V/cm（5） 嵌入燃料的存在：荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA，使其刚性更强，还会使线状DNA迁移率减
2、低15%。（6） 离子强度影响：在没有离子时，溶液导电率最小，DNA几乎不移动：在高离子强度的缓冲浓度中，溶液电导很高并明显产生热，可能会引起凝胶融化或DNA变性2、 上样缓冲液中溴酚蓝起到什么作用？作为指示剂，因为溴酚蓝呈蓝色，而DNA是无色的，在琼脂糖凝胶中不明显，且溴酚蓝的相对分子量比DNA(绝大部分)小，电泳时速度比DNA稍快，因此当溴酚蓝到达电泳槽中间部位时，则电泳结束。3、 常用凝胶电泳有哪些？琼脂糖凝胶电泳有哪些特点？（1） ：凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳；例：交联葡聚糖凝胶：是将纯化后的线性葡聚糖（a-1，b-吡喃型葡聚糖）与环氧氯丙烷反应，再导入
3、丙三醇侧链而在葡聚糖链间形成交联链，再将所得的凝胶制成直径不同的球形即可。所得三维实体在水中能溶胀而不能溶解。交联度越高，凝胶孔径越小。琼脂糖凝胶：从琼脂中除去带电荷的琼脂胶后，剩下的不含磺酸基团、羧酸基团等带电荷基团的中性部分，结构是链状的聚半乳糖，易溶于沸水，冷却后可依靠糖基间的氢键引力形成网状结构的凝胶。凝胶的网孔大小和凝胶的机械强度取决于琼脂糖浓度。因此琼脂糖凝胶可作为分子筛，常用于凝胶层析和电泳。 聚丙烯酰胺凝胶：丙烯酰胺单体和甲叉双丙烯酰胺交联剂在催化剂(如过硫酸铵)作用下形成的凝胶。凝胶孔径大小可以通过制备时所使用的浓度和交联度控制。常用做层析介质、电泳分离支持材料等。（2） ： 1.琼脂糖凝胶结构均匀，含水量大（约占 98 % 99 %），近似自由电泳，样品扩 散度较自由电泳小，对样品吸收吸附极微，因此电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好。 2.琼脂糖呈透明状，无紫外吸收，电泳后的样品可直接用紫外检测；电泳后区带易染色，样品易洗脱，便于定量测定。3.操作简单，电泳速度快，样品不需事先处理就可进行电泳。
