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1、白血病 淋巴瘤免疫分型 临检血液蒋能刚 1 应用目的 确定淋巴系病变的起源和分化程度 鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病 确定髓系白血病各亚型 对形态学分类不明细胞进行定性 诊断急性未分化型白血病 诊断急性混合细胞白血病 诊断微小残留白血病或白血病浸润 判断白血病 淋巴瘤预后 2 流式细胞术 FlowCytometry 对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数 快速分析 或分选 的一种技术 3 4 数据显示方式 单参数直方图双参数二维点图等高图二维密度图三维图 5 单参数直方图 双参数点图 6 荧光素 FITC 异硫氰酸荧光素 530nm 绿 PE 藻红蛋白 575nm 橙黄 PI 碘
2、化丙啶 620nm 橙红 PerCP 多甲藻黄素叶绿素蛋白 675nm 深红 APC 别藻兰蛋白 660nm 红 7 检测物 细胞表面 胞浆或胞核抗原性物质 8 CD clusterofdifferentiation 1982年起将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群 并进行流水编号 一个CD相关抗体可包含多个克隆号 其他非CD系列抗原 如TCR HLA等 9 正常血细胞中的抗原表达特点 1 系列保守性2 时序性3 抗原表达量的模式化 10 干细胞 嗜碱性细胞 嗜酸性细胞 定向髓系干细胞 红系 巨核系 粒单核系 粒系 单核系 CD36CD71CD235a CD41CD42
3、a bCD61 CD4CD11bCD14CD64HLA DRCD36 CD15CD71CD16 TDTCD7 CD34CD117CD13CD33CD38MPO CD34CD13CD33CD117MPO 11 抗原刺激 干细胞 早前B 前B 静止期B Pro BALL Pre BALL Common BALL CLL SLL 免疫母细胞 浆细胞样淋巴细胞 大B细胞淋巴瘤 淋巴浆细胞淋巴瘤 外套细胞 滤泡区母细胞 中心母细胞 中心细胞 边缘带细胞 浆细胞 套细胞淋巴瘤 伯基特淋巴瘤 大B细胞淋巴瘤 滤泡淋巴瘤 边缘带淋巴瘤 骨髓瘤 TDT CD34 cCD79a CD19 CD10 c TDT C
4、D34 cCD79a CD19 CD20 CD10 c TDT CD34 cCD79a CD19 CD20 CD10 c CD5 CD19 CD20CD22 CD23 sIg FMC7 CD38CD138CD56cIgCD19 CD45 CD22 CD5 CD10 CD23 CD22 CD10 FMC7 CD23 bcl 2 CD5 CD19 CD20 CD22 CD38 IgM sIg CD22 CD10 sIg CD34 TDT CD5 CD22 sIg FMC7 CyclinD1 CD23 CD22 bcl 6 CD10 CD5 CD30 12 干细胞 胸腺 期 胸腺 期 TDT CD3
5、4 CD2cCD3CD7CD71 TDT CD34 CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8 胸腺 期 TDT CD2CD3CD5CD7CD4 CD8TCR Precursor TALL 成熟T细胞各分化群 13 造血细胞在其分化 发育过程中 细胞膜 细胞浆或胞核抗原的有无 表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关 表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性 14 白血病细胞中的抗原表达特点 表达模式基本与相应阶段正常细胞相似 还具有以下特点 1 跨系表达2 时相混乱3 抗原表达量的改变 15 免疫分型四种急性白血病 单表型急性白血病表达某一个系列抗原为主的急性白血病双表型 双克隆急性白血病未分化型
6、急性白血病 16 各系急性白血病重要抗原指标 1 急性淋巴细胞白血病 AL 敏感性特异性B ALL CD19100 非特异cCD79a99 特异T ALL CD7100 非特异cCD3100 特异 17 2 急性髓细胞白血病 AML 表达率特异性CD1370 非特异CD3370 非特异CD11770 特异cMPO70 特异 18 错译表达 Ly AML My ALL 白血病细胞表达非本系细胞抗原标志物 具有预后意义 19 ALLCD13 CD33t 9 22 AMLCD2 DR M3t 15 17 或RAR t 11 17 CD2 DR M4Eoinv 16 或t 16 16 CD19 M0t
7、 9 22 多见M2t 8 21 TdT CD7 见于M0CD56 M5 M4 20 双表型急性白血病记分系统 分值B系T系髓系2cCD79acCD3cMPOCD22TCR cIgMTCR 1CD19CD2CD117CD10CD5CD13CD20CD8CD330 5TdTTdTCD14CD24CD7CD15CD64 21 部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 注 HCLCD103 CD25 22 部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 肝脾 T细胞淋巴瘤 CD2 CD3 CD7 TCR CD16 CD56 CD8 CD4 TCR 23 标本种类 怀疑含有病变细胞的组织或体液 如外周血 骨髓 胸腹水 脑脊液 淋巴结等 标本要求 细胞有活性 最好不要超过48h 24 光散射特征与细胞形态的关系 25 淋巴 单核 粒细胞 CD45 CD45 M4 M5 M3 正常 白血病 L1 3 M0 2M6 M7 T SSC SSC MM非造血来源细胞 CD45在免疫分型中的应用意义 原始 嗜碱 嗜酸 26 正常骨髓 27 AML M1 AML M2 AML M3 AML M4 M5 28 AML M6 非造血细胞 非特异性染色 死亡细胞 ALL 29 分类不明细胞 30 B细胞克隆性 31 结果报告 32 白血病免疫分型其他方法 酶 底物显色荧光显微镜 33 谢谢 34
