第3章套式病毒目ppt课件

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1、第33章套式病毒目 该目病毒包括 冠状病毒科和动脉炎病毒科 一 本科病毒主要特性 冠状病毒属病毒颗粒具有多形性 略呈球形 直径80 220nm 具有囊膜和12 24nm的棒状纤突 纤突顶端膨大呈球状 纤突间有较宽的间隙 由于囊膜纤突排列呈皇冠状 故而得名 核衣壳螺旋对称 基因组为单分子线状正股单股RNA 大小27 32Kb 是已知的RNA病毒中基因组最大的 具有传染性 第一节冠状病毒科 胞浆内复制 通过出芽进入内质网 胞吐释放 冠状病毒能在多种细胞上增殖 一 本科病毒主要特性 二 分类 SARS冠状病毒 1 分类地位 属于冠状病毒科 冠状病毒属 三 常见的冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 2 病毒

2、特点呈圆形 椭圆形或多边形 单分子线状 单股正链RNA 螺旋对称核衣壳 有囊膜 有18 24nm长的冠状纤突 猪传染性胃肠炎病毒 3 抵抗力 病毒对脂溶剂敏感 在低温下极为稳定 猪肠组织中的病毒 在 20 可保存半年以上 室温下可以存活3天 56 作用45min可灭活病毒 0 5mol的MgCl2可以增强其对热的抵抗力 对光敏感 粪便暴露于日光下6h 其内所含病毒即被灭活 0 05 福尔马林在37 下20min可灭活病毒 0 5 的石炭酸在37 下30min可灭活病毒 猪传染性胃肠炎病毒 4 致病性TGEV在世界各地均有发现 是引起仔猪腹泻的一种病原 对其他动物无传染性 临床症状是仔猪腹泻 呕

3、吐 不同年龄和品种的猪均易感 3周龄以下的仔猪具有较高的死亡率 5周龄以后 发病猪的死亡率小于3周龄以内猪 很少死亡 即随着日龄增长 死亡率下降 猪传染性胃肠炎病毒 5 致病机理TGEV的靶器官为小肠 病毒可存在于病猪的各个器官 体液 和排泄物中 但以空场 十二指肠 肠系膜淋巴结内含毒量最高 滴度为每克组织含106个猪感染剂量 可经呼吸道感染 病毒先在鼻粘膜和肺中复制 而后经血液进入小肠 亦可经 口 眼 食管 胃 消化道进入小肠 进入小肠的TGEV 感染小肠绒毛上皮细胞 导致绒毛缩短 影响消化吸收 绒毛受损后 绒毛上皮细胞分泌的乳糖酶及其他双糖酶减少 导致肠内容物的渗透压增高 水从组织进入肠腔

4、 导致腹泻 猪传染性胃肠炎病毒 6 免疫一般认为给母猪作口 鼻同时接种或乳腺内接种 能给哺乳仔猪提供较好的乳汁免疫 乳汁抗体含有IgA IgG IgM IgA主要为分泌型IgA 仅有通过粘膜免疫才能产生母源保护 非经肠免疫不能产生母源保护 仔猪可通过初乳及乳汁获得母源IgA抗体 获得被动免疫 但血清中的IgG抗体不能提供保护 猪传染性胃肠炎病毒 7 微生物学诊断 取疾病早期阶段的仔猪肠粘膜作涂片或冰冻切片 通过荧光抗体或ELISA可快速检出病毒 猪传染性胃肠炎病毒 RT PCR检测 猪传染性胃肠炎病毒 病毒的分离鉴定猪甲状腺原代细胞 较为敏感 初代分离可见微弱的CPE 原代猪肾 猪睾丸细胞盲传

5、多代可见CPE 传代细胞对新分离株不敏感 血清学实验包荧光抗体 间接血凝 环状沉淀试验 琼扩及中和试验等 其中中和试验应用最多 检出率最高 特异性最强 电镜及免疫电镜观察 猪传染性胃肠炎病毒 8 预防与控制用弱毒疫苗免疫并不太有效 用强毒株接种怀孕母猪可使仔猪通过母源抗体获得最佳保护 此外 改善卫生条件 加强管理 对预防疫病有一定作用 猪传染性胃肠炎病毒 冠状病毒科 冠状病毒属 病毒粒子呈球形 大小为100 200nm 具有囊膜 核酸类型为正股单股RNA 一 病毒特点 禽传染性支气管炎病毒IBV 二 血凝性 本病毒含有血凝素 但未经胰酶处理的含毒尿囊液 不能凝集鸡的红细胞 若经1 胰酶在37

6、下作用3h 或56 加热30min 则会出现血凝性 经胰酶处理的病毒 在 65 可保存3周而不失去活性 已经适应鸡胚的毒株缺乏血凝性 IBV能在鸡胚以及鸡胚气管以及来自鸡胚的多种细胞上生长 初次分离最好尿囊腔接种9 11日龄鸡胚 感染组织内不形成包涵体 三 病毒的培养 传染性支气管炎是鸡的一种急性 高度接触性传染的呼吸道疾病 本病仅发生于鸡 鸡不分年龄 性别和品种 均易感 但主要侵害1 4周龄的幼鸡 患鸡主要 特征 表现为 气喘 咳嗽 喷嚏和气管出现锣音 在雏鸡还出现流鼻涕 产蛋鸡产蛋量和质量下降 或停止产蛋 目前 还出现了以肾脏 肠道或腺胃病变为主的致病型 肾型传支的病鸡肾脏肿大 苍白 有尿

7、酸盐沉积 四 病毒的致病性 病毒通过汽雾以及摄入污染粪便的食物 而在鸡群中迅速传播 在环境中 病毒可存活数天 在低温下存活数周 因此 鸡群中往往存在持续感染的带毒者 病毒首先在呼吸道纤毛上皮细胞或肠道复制 可达很高滴度 在感染1 2天后 出现病毒血症 将病毒散布到许多器官 最终导致生殖系统及肾脏的严重损伤 由于病毒感染后 可进入各个器官 某些毒株对未成熟输卵管可产生永久性的结构损伤 五 病毒的致病机理 本病可经呼吸道 消化道传播 从分泌物排毒长达2周 粪便排毒达3周 病毒也可存于感染鸡的精液和急性期病鸡所产的蛋中 康复鸡可带毒49天 35天具有传染性 六 鸡群的带毒情况 从病鸡呼吸道分泌物 肺

8、 肾脏 腺胃 输卵管等处取病料 病毒的分离培养 鸡胚尿囊腔种 鸡胚发育迟缓 出现侏儒胚 七 病毒的微生物学诊断 病毒鉴定 易感雏鸡接种 病毒中和实验 血清学实验 如荧光抗体 琼脂扩散 间接血凝等 核酸探针 PCR等 八 病毒的微生物学诊断 该科只有1个属 即 动脉炎病毒属 一 动脉炎病毒科的成员 第二节动脉炎病毒科 为单链RNA病毒 衣壳呈二十面体对称 核衣壳直径40 45nm 病毒粒子直径为60 70nm 具有囊膜 5nm的突起 对乙醚 氯仿敏感 PRRSV无血凝特性 猪呼吸与繁殖综合症病毒PRRSV 一 病毒特点 符合该科病毒的特性 该病毒无血凝性 一 病毒特点 猪呼吸与繁殖综合症病毒PR

9、RSV 根据核苷酸序列可分为两个基因型 欧洲基因型 A群 代表株LV 美洲基因型 B群 代表株ATCCVR 2332 在中国尚未见有欧洲型的报道 二 病毒的基因型 病毒能在猪肺巨噬细胞 PAM 和传代细胞MarC 145或Vero及MA104培养复制 三 病毒的培养 具有高度的传播性 主要侵害母猪和仔猪 通过空气经呼吸道感染 亦可经精液由交配感染 母猪流产 不育症为特征 出生死胎 弱仔 仔猪呼吸困难 弥漫性间质性肺炎 死亡率高 育肥猪的症状类似猪流感 流涕 部分病猪耳部和躯体末端皮肤发绀 故称 蓝耳病 四 病毒的致病性 病理变化 通常感染猪子宫 胎盘 胎儿乃至新生仔猪无肉眼可见的变化 剖检死产

10、 弱仔和发病仔猪常能观察到肺炎病变 患病哺乳仔猪肺脏出现重度多灶性乃至弥漫性黄褐色或褐色的肝变 脾脏肿大 淋巴结肿胀 胸腺萎缩 心包积液等 感染猪在若干星期内抗体存在的同时出现病毒血症 已经证实抗体可以增强病毒感染 病毒可以通过胎盘感染胎儿 导致脐带出血性病变 病毒感染单核细胞及巨噬细胞 造成免疫抑制 五 病毒的致病机理 病毒分离与鉴定 应用猪肺巨噬细胞 PAM 或传代细胞 MarC 145 VeroMA104 分离病毒 用免疫金 银染色或过氧化酶染色进行鉴定 分子生物学方法 如RT PCR 具有特异敏感快速等优点 六 病毒的微生物学诊断 国内外己经推广应用灭活苗或弱毒苗 但因病毒的变异性以及

11、致病与免疫机理的复杂性 灭活苗的免疫效果不确实 弱毒苗的安全性仍存在隐患 对本病尚无有效的治疗或预防药物 七 防治 本章小结 冠状病毒科的基因组结构和特点决定其易发生变异和进化 致使致病性和抗原性复杂多变 猪的冠状病毒 禽传染性支气管炎病毒及猫传染性腹膜炎病毒是典型 SARS冠状病毒是2003年发现的对人有高致病性的冠状病毒 多种冠状病毒均可引起腹泻 动脉炎病毒科的猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒对猪具有致病性 其检测和预防均具有重要意义 本章复习题 1 比较冠状病毒科与动脉炎病毒科的异同并说明设立套式病毒目的依据 2 以禽传染性支气管炎病毒为例 试述冠状病毒变异的复杂性 3 阐述猪呼吸与繁殖综合征

12、病毒的致病特点 第34章其他正链RNA病毒 该科的病毒在人医和兽医中均具有重要性 其中口蹄疫病毒是人类发现的第一个动物病毒 而且是目前研究最为广泛 深入的病毒之一 人类的脊髓灰质炎病毒也是该科的成员 第一节微RNA病毒科 微RNA病毒科分6个属 口蹄疫病毒属 肠病毒属 心病毒属 鼻病毒属 肝病毒属及副肠孤病毒属 这6个属的重要区别是 口蹄疫ph7以下不稳定1 在低温下稳定鼻病毒属ph5以下失活其他几个属在pH3均稳定2 5 端非编码区 心病毒属及口蹄疫有一个长的聚C尾 其他几个属则无 3 心病毒属与口蹄疫病毒属编码衣壳蛋白的先导蛋白又有区别 一 分类 病毒颗粒无囊膜 直径20 30nm 20面

13、体对称 外表光滑呈球形 每个衣壳单体都由4蛋白组成 VP1 VP2 VP3 VP4 基因组为单分子线状正股单股RNA 基因组RNA具有传染性 二 本科病毒主要特征 属于微RNA病毒科 口蹄疫病毒属 病毒粒子20 25nm 呈圆形或六角形 二十面体对称 无囊膜 在负染标本中 可见由32个壳粒组成的衣壳 口蹄疫病毒FMDV 一 病毒形态特征 实验动物中 豚鼠 小鼠 乳鼠均易感 FMDV可在多种细胞中增值 且增值速度快 二 病毒培养 4 较为稳定 20 70 可保存数年之久 畜舍 墙壁 或地板上的干燥分泌物中的病毒 夏天可存活1个月 冬天2个月 pH7 4 7 6最适 对酸碱敏感 酸碱条件下迅速灭活

14、 pH3或1 NaOH下1min即可灭活 乳品中的口蹄疫病毒于70 10min即可灭活 肉品 或尸体 中的FMDV 由于尸僵后迅速产生乳酸 故肌肉中的病毒可迅速灭活 腺体 淋巴结和骨髓中的病毒由于不易产酸 病毒可活数月 常用消毒剂如 酚类 乙醚 氯仿及一些去污剂对病毒作用不大 但3 5 的福尔马林 0 2 0 5 的过氧乙酸 5 的氨水 5 的次氯酸钠均为口蹄疫病毒的良好消毒剂 由于1 NaOH可在1min内灭活病毒 故畜舍 运输车和饲槽等常用其消毒 三 抵抗力 口蹄疫病毒具有7个血清型 A O C SAT1 SAT2 SAT3及亚洲1型 每一个血清型又可进一步划分为若干亚型 共有亚型65个

15、各型之间临床表现没有什么区别 但各型之间交叉免疫微弱 几乎无交叉免疫 且本病毒具有较大的变异性 病毒在保存或流行过程中常发生抗原漂移 这给本病的预防带来一定的困难 四 血清型 五 致病性 口蹄疫病毒是全球性最重要的动物健康问题之一 世界大部分地区时有发生 仅1973年 就有73个国家和地区爆发 口蹄疫病毒主要侵害偶蹄兽 偶尔见于人和其他动物 人特别是儿童 可得心肌炎引起死亡 家畜中以牛最易感 其次是猪 再次是绵羊 山羊和骆驼 马不感染 本病常在猪群和牛群中大范围流行 国际兽医局 OIE 一直将本病列为发病后必须报告的A类疫病名单之首 本病的主要症状 口 鼻 蹄及乳房等部位发生水泡和溃烂为特征

16、在咽喉 气管 支气管有时有烂斑和溃疡 心包膜有弥散状及点状出血 并有可能出现跛行 不同动物症状稍有不同 怀孕母牛可能流产 而后导致繁殖能力下降 犊牛常不表现临床症状即死亡 主要是心肌炎 猪则以跛蹄为最主要的症状 该病死亡率不高 但感染率很高 五 致病性 五 致病性 病毒在水泡及淋巴结中含毒量最高 在水泡发展的过程中 病毒进入血流 则可分布于全身各部分组织和体液 实验动物中 豚鼠 小鼠 乳鼠均易感 FMDV可在多种细胞中增值 且增值速度快 五 致病性 反刍动物感染的主要途径是通过吸入感染 但亦可通过采食或接触污染物而感染 病毒经呼吸道而感染时 最初在咽部复制 而后传播到其他组织 在临床症状出现前的24h 患畜排出病毒 奶中也带有大量的病毒 并持续数天 感染猪喷出的飞沫中含有大量的病毒 六 致病机理 上皮细胞是FMDV的易感靶细胞 病毒侵入机体后 首先在侵入部位的上皮细胞内增值 引起浆液性渗出物而形成原发性水泡 1 3天后 病毒进入血流 引起动物体温升高和全身症状 病毒随着血流到达所嗜好的部位 如 口腔粘膜 蹄部 以及乳房皮肤的表层组织 继续增值 形成继发性水泡 随着水疱的发展 融合而破裂