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1、第十一单元 生物技术实践学案58 微生物的培养与应用考纲要求 1.微生物的分离和培养 实验与探究2.某种微生物数量的测定 实验与探究3. 培养基对微生物的选择作用 实验与探究 4.用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 实验与探究复习要求1.理解培养基对微生物的选择利用并能利用选择培养基分离微生物2.掌握培养微生物的过程、条件和方法3.掌握测量微生物数量的方法、统计菌落数量的方法4.能利用选择培养基分离微生物的方法 基础自查一、微生物的实验室培养1培养基 (1)概念： 。(2)成分：2无菌技术 3实验操作(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备(2)微生物的分离方法 二、土壤中分解尿
2、素的细菌的分离与计数1分离原理：2 统计菌落数目：3实验流程：三、分解纤维素的微生物的分离1纤维素酶 2纤维素分解菌的筛选原理 3土壤中纤维素分解菌的筛选实验流程 课堂深化探究一微生物的培养与应用1微生物的实验室培养(1)培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。分类和应用划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基 半固体培养基 固体培养基 化学成分天然培养基 合成培养基 用途选择培养基 鉴别培养基 培养基配方及营养要素基本营养要素： 营养要素来源功能碳源无机氮源 有机碳源 氮源无机氮源 有机碳源 生长因子 特别提醒微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；
3、最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。制备：计算称量溶化灭菌倒平板。(2)微生物培养的无菌技术 消毒和灭菌的区别使用方法结 果常用的方法消毒 灭菌 三种常用灭菌方法的比较灭菌方法适用材料或用具灭菌条件灭菌时间灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 2.微生物的纯化培养及菌种的保藏(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。方法平板划线法稀释涂布平
4、板法注意事项(1)接种环的灼烧第一次划线前： 每次划线前： 划线结束后： (2) 灼烧接种环之后 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连(4)划线用力要大小适当，防止 (1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1 cm2 cm处(2)涂布平板时涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体目的 培养 二、特定微生物的数量的测定1测定微生物数量的方法(1)直接计数法：常
5、用的是 。(2)间接计数法：常用的是 。2测定微生物数量方法的实际应用(1)土壤中好氧型细菌的计数 (2)检测天然水源中细菌总数和大肠杆菌菌落数细菌总数通常是 。大肠杆菌菌落数通常是指 。(3)检测某种食品中的细菌总数和大肠杆菌菌落数一般说来，大肠杆菌菌落总数越多，说明 。(4)土壤中分解尿素细菌的计数某些细菌中含有尿素分解酶，能 。3制备系列稀释液的方法将1 g土样放入99 mL无菌水中，制成102倍的稀释液，用1 mL无菌移液管吸取上述浓度的溶液0.5 mL，移入装有4.5 mL无菌水的试管中，即配制成103倍的稀释液，用同样的方法可以配制成104、105、106倍的稀释液。将待测样品进行
6、稀释的目的是使微生物细胞分散开，使实验结果更接近真实值三、培养基对微生物的选择分析1分离微生物的方法从混合样品中获得某种微生物的方法通常有哪两种？ 2选择培养基及应用实例(1)选择培养基： (2)选择培养基应用举例对应训练1.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()。A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一2.如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是()。A操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B划线操作
7、须在火焰上进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌3.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()。A涂布了一个平板，统计的菌落数是230B涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值2334.(2011烟台模拟)可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()。A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯
8、胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂5.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()。大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A B C D实验探究尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分
9、如下表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g琼脂15 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)此培养基能否用于植物组织培养？_，理由是_。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选_，这种培养基属于_培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和_，实验需要振荡培养，原因是_。(4)转为固体培养时，常采用_的方法接种，获得单菌落后继续筛选。(5)下列材料或用具中：培养细菌用的培养基与培养皿；玻棒、试管、锥形瓶和吸管；实验操作者的双手。需要灭菌的是：_；需要消毒的是：
10、_(填序号)。(6)在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_(填序号)。由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照(7)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：_限时训练题组一微生物的培养与应用1.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 ()化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线消毒高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A BC D2.（2012河北唐山摸底）请回答下列关于微生物的相关问题（1）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和_，平板划线前要对接种环进
11、行灼烧，原因是为了_。（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有_、_、_和_等营养，同时还必须满足微生物生长对_、_、_的要求。 （3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为原料称量、溶解_分装、包扎灭菌倒平板_培养。题组二特定微生物的数量的测定3.下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是（ ）A.微生物培养前，需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源 4.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（ ）可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌ABCD题组三培养基对微生物的选择分析5.（2012上海虹口期末）“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是()A在全营养的LB培养基(普通培养基)中，筛选大肠杆菌B在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物C用纤维素为唯
