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1、 自身免疫病（AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。风湿病是一类涉及到关节、软骨、肌肉等结缔组织的慢性疾病。实验室检查特别是免疫学检查对 AID 和风湿病的诊断是及其重要的。有些检查可作为诊断指标之一；有些检查可作为病情进展和预后判断的监测指标；有些检查可作为药物疗效的考核指标之一。随着免疫学技术的发展以及分子生物学的应用，各种自身抗体的检查越来越多地应用于临床。作为临床医生，应该熟悉这些检验的意义，并能结合临床及其他检查，客观地运用这些指标，协助诊断，了解病情，指导治疗。这里仅介绍临床常用的一些自身抗体的检测。一、抗核抗体测定（Ant
2、inuclear antibody ,ANA) ANA 是抗细胞核多种成分的自身抗体，无种属及器官特异性。ANA 可分为抗 DNA 抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。这些抗体共同组成 ANA 谱。抗核抗体（ANA）的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。ANA 的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。只有某种抗体的效价很高时，IFA 才能加以鉴别。homogenous（均质型）又称弥散型，相应的抗原是双链 DNA 和组蛋白复合物。常见于 SLE，特别是肾脏受累病人。也可见于其它结缔组织病，如：风湿性关
3、节炎，MCTD，干燥综合征，硬皮病，慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。Peripheral(周边型 )相应的抗原为双链 DNA，多见于活动性 SLE 病人。Speckle(斑点型 )主要是针对 ENA 的抗体，包括 Sm，RNP，SSA， SSB，Scl-70。一般认为低效价的斑点型 ANA 不是结缔组织病特有的，实际上不代表临床异常。高效价的抗 Sm 抗体多与 SLE 有关。高效价的抗 RNP 自身抗体见于 MCTD，但也见于 SLE。抗 SSA 和抗 SSB抗体，见于 S.S，也可见于 SLE。当病人有抗 SSA 抗体时，通常以皮肤表现和光过敏为主。，也存在于 ANA 阴性狼疮和新生儿狼
4、疮。Scl-70 抗体与硬皮病有关。Nucleoli(核仁型)其靶抗原是与 RNA 分子相关的核蛋白。多见于硬皮病。Centromere(着丝点型)抗着丝点抗体（ACA） ，多见于全身性硬皮病的 CREST 综合征。常用检测方法为 IFA、ELISA、免疫印迹法、RIA、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法等。其中 IFA 是应用较广的一种方法。一般采用鼠肝切片或 Hep-2细胞为底物抗原片，当加入病人血清时，病人血清中的 ANA 可与细胞中相应抗原成分结合。再加入荧光标记抗人 IgG，在荧光显微镜下可见细胞核内亮绿色荧光。参考值 1：10 为阳性临床意义AMA 是原发性胆汁性肝硬化 的标记抗体
5、，阳性率达90%，并且50% 患者抗体效价达1：1280 或更高。此外，也可见于慢性活动性肝炎、隐匿性肝硬化。肝外阻塞性黄疸患者AMA 常阴性，因此可作为鉴别诊断的一个指标。正常人中阳性率1：10为阳性临床意义主要见于明显活动期的自身免疫性肝炎患者，阳性率在80%以上，效价 在1：80以上。急性病毒性肝炎早期 ASMA 也可阳性，且早于 HBsAg 出现。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染者也有不同程度的阳性率。正常人中仅有2%阳性。七. 抗甲状腺球蛋白抗体（ATGA)和抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)ATGA 是由 甲状腺炎引起的自身抗体 ，抗原是一种糖蛋白
6、。ATGA 有器官特异性而无种属特异性。ATMA 的抗原是甲状腺滤泡上皮细胞胞浆内的脂蛋白。常用检测方法有：IFA、IHA 、RIA 、ELISA 等。参考值IHA： 血清效价 1：32， 1：32为阳性，ATGA 和 ATMAELISA：正常为阴性，P/N 2.1 为阳性, ATGA 和 ATMARIA：ATGA 80IU/ml。 ，一般方法所检测的大部分是 IgM-RF。关于 RF 分型，临床应用尚不广泛。多数作者认为：IgMRF 效价高低可在一定程度上反映 RA 的活动性，但无明确的密切关系；IgG-RF 与 RA 患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相关；IgA-RF 见于 RA、硬皮
7、病、Felty 综合征和系统性 红斑狼疮（systemic lupus erythematosus， SLE)，也是 RA 临床活动性的一个指标；IgE-RF 除 RA 患者外，也见于 Felty 综合征和青年型 RA。高水平 IgM-RF 阳性病人预后较差。从早期 RA 患者的 X 线片分析， IgM-RF 持续阳性的病人更易发生骨侵蚀。IgA-RF 在SS 病人中阳性率较高；IgE-RF 在恶性关节炎病人中阳性率较高。在 RA 病人，高效价 RF存在并伴有严重的关节功能受限时，常提示预后不良。注意事项正常人也可有4左右的阳性率。随年龄增加，RF 的检出率会增加。RA 病人 RF 也可阴性，
8、不能单纯依靠 RF 阳性来诊断 RA。RF 还可见于其它多种疾病，其中最常见的是干燥综合征（S.S ） ， 发生率在90以上，且含量一般较高。其它常见的 RF 阳性的疾病有： SLE、系统性硬化症、高球蛋白血症、 结节病、梅毒、麻风、病毒感染、肝硬化等等。有些效价可在1：160 以上，含量在 80IU/ml 以上，在解释结果时应予注意。冷球蛋白（Cryoglobulin CG，)冷球蛋白是一种球蛋白，4时发生沉淀，30 易聚合，37又溶解。CG 分为三类：1.I 型(单克隆型 )：大多为 IgM 或 IgG 型，无抗补体作用。 2.II 型(混合型)：两种或两种以上单克隆 Ig 混合，以 Ig
9、M+IgG 最常见，也可见 IgA+ IgG；IgG+IgM+IgA 等。有抗补体作用。3. III 型(多克隆型)： 没有单克隆蛋白。其检测方法有血球压积管法(定性) 和分光光度计法(定量)。参考值 定性法：阴性定量法：80 g/ml。临床意义SLE 病人血清中可出现混合型 CG。在血管炎、肾小球肾炎、淋巴细胞增生性疾病也可阳性。在巨球蛋白血症或多发性骨髓瘤病人伴雷诺氏现象时与 I 型冷球蛋白血症有关。II 型冷球蛋白血症与自身免疫病例如血管炎、肾小球肾炎 、SLE 、RA 和 SS 有关。在某些感染如肝炎、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染和弓形虫病也可出现。注意事项1. 标本必须在37
10、 采集，并保持温度直至进行实验。2. 一般不用于无冷球蛋白血症临床表现的人群过筛。3. 冷凝集素可能引起某些自动血球计数仪的错误结果。小结:总之，自身抗体的检测对诊断自身免疫病有着重要的意义。人血清中存在着多种自身抗体，有器官特异性的，也有非器官特异性的。因此，在选择自身抗体检测时应综合考虑，合理选用。近年来出现了许多新的自身抗体，在此就不详细叙述了，可以参看有关文献。胞浆抗体Hep-2细胞具有许多胞浆抗原。如有特异性胞浆抗体存在，可出现强阳性胞浆荧光。包括抗线粒体抗体（AMA） 、抗核糖体抗体、抗肌动蛋白抗体即抗平滑肌抗体（ASMA ） 、抗高尔基体抗体、抗丝抗体（如 Vimentin） 。
11、一般最有意义的是 AMA 和 ASMA，可是荧光染色 Hep2细胞却不能鉴定这两种抗体，可应用鼠肾和鼠胃切片作进一步分析。系统性风湿病活动期的评价自身抗体检测以诊断全身性疾病比监测该病活动更有意义。但抗 dsDNA 抗体效价却与活动性有关。应定期检测抗 dsDNA 抗体的效价及 C3、C4的含量。以及测定循环免疫复合物（CIC）的含量。ESR 和 CRP 在炎症反应时常常升高。 RA 病情加重时，CRP 明显增高。SLE 活动期，CRP 一般正常。器官特异性自身免疫性疾病组织抗体许多自身抗体可采用 IFA 测定，用鼠肾和胃的切片能测出抗线粒体、平滑肌、肝肾微粒体和胃壁细胞的抗体。甲状腺组织切片
12、可测定抗甲状腺自身抗体。自身免疫性肝病在肝脏病变中，ANA 阳性率可达40-80%。抗线粒体抗体（AMA）与原发性胆汁性肝硬变有关。特别是高效价的 M2和 M9线粒体抗原。约一半的自身免疫性肝炎的病人有较高效价的 ASMA。此外，肝肾微粒体抗体（LKMAs） ，抗可溶性肝抗原（SLA）抗体，抗肝细胞膜抗体等也可用于自身免疫性肝病诊断和监测。其他肾脏疾病常测定的抗体有抗 dsDNA 抗体，抗肾小球基底膜抗体等，还可测定 CIC，以及作肾组织活检进行荧光染色。韦格纳肉芽肿病是一种发生于上下呼吸道的坏死性血管炎，也累及肾脏，病人常死于肾和肺衰竭。检查抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAs）是诊断指标之一。也可通过 ELISA测定抗髓过氧化物酶抗体，抗蛋白酶3抗体，有助于诊断和鉴别诊断。胃肠道疾病中，恶性贫血与抗胃壁自身抗体有关，与抗内因子抗体的相关性达75%。抗胰岛细胞抗体（ICAs） ，抗谷氨酸脱羧酶抗体（ GADA）与 I 型糖尿病有一定关系。重症肌无力病人可出现抗骨骼肌抗体。多发性肌炎和皮肌炎可有抗 Pm1和抗 Jo-1抗体。抗心肌抗体常见于心肌梗死、心脏手术或心肌损伤后。
