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1、1血清 HBV 标志物、前 S1 抗原与 HBVDNA 检测结果的相关性【摘要】目的探讨 HBV血清标志物前 S1抗原（HBVPreS1-Ag）与 HBVDNA的相关性。方法用 ELISA法对乙肝患者分别进行五项HBV血清标志物，前 S1抗原检测，同时采用 PCR法检测HBVDNA的含量。结果大三阳组前 S1抗原（+）检出率均高于小三阳组。前 S1抗原（ +）组血清 HBVDNA检出率为 89%。结论在HBV血清标志物、前 S1抗原与 HBVDNA联合检测为判断 HBV复制和传染性以及指导临床治疗提供更可靠的实验依据。 【关键词】血清 HBV标志物乙肝前 S1抗原荧光定量PCRHBVDNA 乙
2、型肝炎是严重威胁我国人民健康的传染病，主要经血液传播。乙型肝炎病毒（HBV）感染人体后，血中可出现大量 HBV颗粒。完整的病毒颗粒含有外衣壳抗原和内衣壳抗原，含有前 S1的蛋白主要存在于 Dane颗粒上，外衣壳抗原包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 、前 S1抗原和前 S2抗原。内衣壳抗原包括乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）和 e抗原（HBeAg） 。前 S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面具有十分重要的作用。笔者对本院门诊及住院 882例乙肝患者进行 HBV五项血清学标志物，前 S1抗原和 HBVDNA的检测，以探讨 HBV与前 S1抗原和 HBVDNA之间的相互
3、关系，现报告如下。 21材料和方法 1.1标本来源 2007年 1月-2009 年 10月来本院就诊的门诊及住院患者同时检测乙肝五项血清学标志物、前 S1抗原及 HBVDNA检测共 822例。其中男性 531例，女性 281例。年龄最小的 13岁，最大的 79岁，平均 46岁。 1.2检测仪器 DNM-9602G酶标仪（北京普朗公司生产） ，DNX-9620洗板机（北京普朗公司生产）7600PCR 荧光定量扩增仪（广州产）移液器（上海求精生化试剂仪器有限公司） 。 1.3试剂 HBV五项血清学标志物（HBsAg、 HBsAb、 HBeAg、HBeA 、bHBcAb ）试剂盒均由厦门新创生物有限
4、公司提供。乙肝前 S1抗原（ HBVPreS1）检测试剂由广州中山大学达安基因股份有限公司提供。 1.4检测方法 HBVDNA采用荧光定量 PCR法。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,前 S1抗原均采用酶联免疫吸附试验（ELISA 法）检测。并严格按说明书操作。 1.5统计学处理采用 X2检验及配对 t检验。 2结果 822例乙肝患者血清标本中，前 S1抗原阳性 446例，阴性 376例。HBVDNA 阳性 462例，阴性 360例。由表（1）可知，大三阳组前 S1抗原（+）检出率和 HBVDNA阳性检出率均高于小三阳组，差异有统计学意义（P0.001、P0.05）
5、3讨论 33.1国内有报道前 S1抗原是反映 HBV感染的慢性化和严重程度及病毒复制的指标1。本文结果显示 387例大三阳组中，前 S1抗原（+）检出率为 89%，其中 HBVDNA阳性检出率达 91%，与前S1抗原阳性率具有一致性。大三阳组和 HBsAg(+)、HBcAb(+)组与小三阳组的差异有统计学意义。表明这些患者 HBV具有较高的复制水平，具有传染性的重要标志。 3.2236例小三阳血清中 76例检出前 S1抗原阳性。检出率为32%，82 例检出 HBVDNA阳性，检出率为 35%。虽然阳性率低于大三阳组，但仍具有较强的传染性。 3.3108例 HBeAg(+),HBcAb(+)血清
6、中前 S1抗原阳性 23例检出率为 21%，有 29例检出 HBVDNA阳性，检出率为 27%。提示该组患者仍具有较强的病毒复制，传染性强。此情况可能为血清转换期前 C区突变，若经过动态观察，仍表现 HBsAg(+)、HBcAb(+)及HBVDNA阳性，可能为前 C区突变。23.421例 HBsAg（+） 、HBeAg（+）组的前 S1抗原阳性为 2例，检出率为 10%。HBVDNA 阳性 3例检出率为 15%。30 例HBsAb（+） 、HBeAb（+） 、HBcAb （+）患者血清中，前 S1抗原全部阴性，HBVDNA 全部阴性检出率为 0。有学者人为此现象有可能与 HBVDNA前 C区发
7、生突变有关，出现免疫逃逸。 小结：本文检测结果表明，ELISA 与 PCR两种方法可更全面反映HBV感染与复制，几种血清学标志物模式都有一定的前 S1抗原和HBVDNA检出率。由于前 S1抗原和 HBVDNA阳性表示 HBV在4体内复制，若仅以 HBV血清标志物检查结果作为判断 HBVDNA感染、传染性以及 HBV是否在体内复制，有一定的局限性。文献报道HBVDNA的出现早于其他血清标志物，当受检者处于早期感染时PCR的高灵敏度可为早期诊断 HBV感染提供依据3。因此，为临床提供 DNA感染、复制及传染性判断以及指导治疗和观察疗效，建议联合乙肝标志物以及前 S1抗原和 PCR检测 HBVDNA。4 参考文献 1邵军，马悦，杨学颖，等.乙型肝炎病毒前 S2蛋白及其检测的临床意义J.临床军医杂志， 2000，28（4）：107. 2袁庆，邵彩霞，焦震华.乙肝两对半、前 S2抗原抗体及HBVDNA的相关探讨 J.国外医学临床生物化学与检验分册，2005，26 （ 10）：752-753. 3汤继先.PCR 在检测 HBVDNA中的应用J.上海医学检测杂志，1994，9（4）：214. 4敖必蓉，卢元全，血清 HBV标志物、前 S2抗原与 HBVDNA检查结果的相关性J.临床输血与检验，2009 ，11(1).
