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1、1血浆一氧化氮水平与牙周炎相关性的研究【摘要】 目的 研究慢性牙周炎和牙周健康者血浆一氧化氮(NO)的水平差异,以及 NO 水平与牙周炎症的相关性。方法 选择慢性牙周炎患者 22 人作为实验组,牙周健康者 40 人作为对照组。分别采集清晨空腹静脉血，分离血浆样本,采用硝酸还原酶法测定其中 NO 水平。结果 牙周健康者和慢性牙周炎患者血浆 NO 含量分别为(86.6540.45) mol/L 和(14548.9) mol/L,二者差异具有统计学意义(P0.01),慢性牙周炎患者血浆 NO 水平明显升高，经基础治疗后 NO 含量显著下降。血浆 NO 水平与牙周炎症程度具有正相关关系(P 0.01)
2、。结论 慢性牙周炎患者血浆 NO 水平显著高于牙周健康者, 并与牙周炎严重程度相关。 【关键词】 血浆一氧化氮；牙周炎；相关性【Abstract】 Objective To study the difference of plasma nitric oxide(NO) between chronic periodontitis patients and periodontal healthy subjects,and the relationship between plasma NO levels and periodontal inflammation.Methods 22 patient
3、s of chronic periodontitis were choosed as the experimental group, 40 persons of periodontal healthy as the control group.Gather the fasting blood respectively in the 2morning,separate plasma samples,adopt nitrate reductase method to determine plasma NO levels.Results The plasma NO levels of periodo
4、ntal healthy and chronic periodontitis patients were(86.6540.45) mol/L and(14548.9) mol/L, respectively. The differences of plasma NO levels between the periodontal healthy and chronic periodontitis patients were statistically significant (P0.01).The plasma NO levels of chronic periodontitis patient
5、s elevated significantly. After the initial therapy, the plasma NO levels decreased significantly. Plasma NO levels and the degree of periodontal disease have a positive correlation (P0.01).Conclusions The plasma NO level of chronic periodontitis patients was significantly higher than that of period
6、ontal healthy subjects. The plasma NO level was correlated with the severity of periodontal inflammation.【Key words】 plasma nitric oxide，periodontitis，correlation一氧化氮（NO）是一个具有多功能的重要细胞内信使1 ,血管内皮细胞是体内合成 NO 最主要的细胞。 NO 是一重要的血管活性因子, 使血管舒张并维持血管张力。对于 NO 在牙周病发病过程3中的研究，学者们进行了一些相关的研究。1 材料与方法11 研究对象 为 2007 年 6
7、 月 2008 年 3 月来我院体检和门诊就诊者。正常对照 40 例,为健康者,均无牙周、粘膜等方面的疾病,男 23 例, 女 17 例,年龄 2553 岁。慢性牙周炎患者 22 例,男 14例, 女 8 例,年龄 1956 岁。所有研究对象均知情同意并符合:全身健康、无系统性疾病;3 个月内未服用抗生素及非甾体类抗炎药物;6 个月内未行牙周治疗;女性未妊娠；无吸烟嗜好。正常对照组与牙周炎组的年龄均无显著性差异( P0.05)。1.2 标本的采集及处理 实验组与对照组均于清晨空腹采肘静脉血 2 ml,置于含 10%EDTA 二钠 30 l 和抑肽酶 40 l 的试管中, 混匀, 离心 (4,
8、3000 rpm ,10 min),分离血浆,放-20冰箱保存。测定前使样本置于室温中复融, 再次 4, 3000 rpm 离心 5 min, 取上清液测定。实验组经严格的基础治疗，包括龈上洁治术和龈下刮治及根面平整术，治疗后再次按上述方法测定血浆 NO 水平。1.3 测定方法 按 NO 试剂盒(南京建成生物工程研究所) 说明，用硝酸还原酶法检测血浆样本中 NO 水平,每样本均设复管,空白对照为100 L 双蒸水。各样本分别于 721 型分光光度计、 550 nm 波长、40.5 cm 光径比色测定光密度, 根据试剂盒提供公式计算血浆样本中NO 浓度,单位为 mol/L。1.4 统计学处理 实
9、验数据以 SPSS11.5 统计软件进行分析，实验组与对照组比较采用单因素方差分析，治疗前后比较采用重复测量数据的方差分析，P0.05 为有统计学意义。2 结果2.1 实验组与对照组血浆 NO 水平的比较 我们经实验测定血浆NO 水平在牙周炎时显著高于正常人, 慢性牙周炎患者血浆 NO 的含量与牙周健康者血浆 NO 的含量相比较,差异具有统计学意义(P 0.01),慢性牙周炎患者血浆 NO 的含量显著升高（见表 1） 。表1 慢性牙周炎患者与牙周健康者血浆 NO 水平比较2.2 实验组牙周基础治疗前后血浆 NO 水平的比较 22 例慢性牙周炎患者经严格的牙周基础治疗，治疗后血浆 NO 水平明显
10、下降。血浆 NO 水平与治疗前相比较，差异具有统计学意义（P 0.01）( 见表 2)。表 2 实验组基础治疗前后血浆 NO 水平比较3 讨论5体内的 NO 是由 L精氨酸(LArg) 在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS) 的催化下生成 L瓜氨酸时释放的。由于NO 是一种含不成对电子的气体, 具有自由基结构, 生物半衰期极短仅 3 5 秒, 很快会被氧化为 NO2- 和 NO3- , 所以检测组织或体液内的 NO 含量, 可以通过测定 NO 的代谢终末产物 NO2 -和NO3-含量间接得知。有报道已经证实 NO 对维持口腔内正常菌群的平衡以及抗微生物感染有直接的
11、影响。同时,适量的 NO 对牙周组织的健康及功能的正常发挥起着重要的作用。对 NO 与牙周病的关系 ,不同学者采用了不同的方法进行研究。张昕、陈世璋等应用免疫组化定量分析发现牙周病患者牙龈组织中 NOS 含量比正常牙龈组织中高2 。陈桂珍等通过检测牙周炎患者唾液 NO 的含量,发现牙龈炎和牙周炎患者唾液 NO 的含量显著高于健康人,且牙周炎患者明显高于牙龈炎患者3 。龚斌、徐立平等研究发现正常状况下与牙龈炎症状态下牙龈组织内 NO 含量有显著性差异,牙龈组织 NO 含量则与牙龈指数呈显著负相关4 。已有研究发现牙周治疗前后5 ，6 ，收集慢性牙周炎患者的牙龈组织，观察诱导型一氧化氮合酶的表达，
12、牙周治疗前有大量炎症细胞浸润的标本中，诱导型一氧化氮合酶的表达明显增加，而治疗后则下降。NO 是由内皮细胞及某些神经细胞释放的体内主要的舒张血管物质。内源性 NO 可直接导致血管扩张并可调节血流和血压,还可抑制6血小板在内皮细胞表面黏附及血小板聚集作用。在牙周炎症状态下，血浆 ET 的含量显著增高，而 NO 的水平也相应增高，来对抗 ET 所造成的牙周组织小血管及微血管的强烈收缩，属于一种防御反应。在这个防御反应的过程中，过量产生的 NO 会引起牙周组织破坏，并参与牙周病的发病，间接地造成了牙周组织的损伤，具体的损伤机制尚需进一步研究。我们通过检测血浆 NO 水平来观察血浆 NO 水平与牙周炎
13、的关系，这种方法采集标本简单，检测结果准确可靠。我们的结果显示慢性牙周炎患者血浆 NO 水平显著高于牙周健康者；慢性牙周炎患者经严格的牙周基础治疗后，血浆 NO 水平明显下降，其差别具有统计学意义。我们的结论也证实了慢性牙周炎患者其血浆 NO 水平显著高于牙周健康者，与先前的研究牙龈组织及唾液的 NO 含量变化相一致。【参考文献】1 Dawson TM,Dawson VL, Snyder SH.A novel neuronal messenger molecule in brain the free radical oxideJ. Ann Neurol，1992, 32:297311.2 张昕
14、，陈世璋. 人牙龈组织中内皮素及一氧化氮合成酶的异常与牙周病相关性的研究J.北京口腔医学，1999,7 （2）：76365.3 陈桂珍，孙伟莲. 牙周病患者唾液中一氧化氮含量的研究J. 科技通报，1999,15（2 ）：149151.4 龚斌 ,徐立平,盛迅. 牙龈组织一氧化氮含量与牙龈炎症程度的相关性分析J.口腔医学研究，2006,1: 4346.5 Riccia DN,Bizzini F,Perilli MG,et al.Antiinflammatory effects of Lactobacillus brevis (CD2) on periodontal diseaseJ. Oral Dis，2007,13(4):376385.6 Gullu C,Ozmeric N,Tokman B,et al.Effectiveness of scaling and root planing versus modified Widman flap on nitric oxide synthase and arginase activity in patients with chronic priodontitisJ .J Periodont Res，2005,40(2):168175.
